Evaluación de la bixina como matriz MALDI para el análisis de pigmentos naturales
La cis-Bixina (hidrógeno-(9’Z)-6,6’-diapocaroteno-6,6’-dioato de metilo) es un apocarotenoide presente en la cubierta externa de las semillas de Bixa orellana. Siendo un pigmento altamente conjugado, presenta una absortividad molar alta (32818 M-1 cm-1) y bandas de absorción a 430, 457, 487 y 355 nm...
- Autores:
-
León Jaimes, Juan Esteban
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2022
- Institución:
- Universidad Industrial de Santander
- Repositorio:
- Repositorio UIS
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/9916
- Palabra clave:
- cis-bixina
matriz
Espectrometría de masas
MALDI
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- openAccess
- License
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La cis-Bixina (hidrógeno-(9’Z)-6,6’-diapocaroteno-6,6’-dioato de metilo) es un apocarotenoide presente en la cubierta externa de las semillas de Bixa orellana. Siendo un pigmento altamente conjugado, presenta una absortividad molar alta (32818 M-1 cm-1) y bandas de absorción a 430, 457, 487 y 355 nm (característica de la conformación cis-). Su extracción implicó el uso de tres técnicas: Extracción con Fluido Supercrítico (SFE), Extracción con solvente asistida por Ultrasonido (UAE) y Extracción en Fase Sólida (SPE). La extracción SFE se hizo con el fin de desgrasar y/o eliminar compuestos adheridos fuertemente a la capa lipídica de la semilla, como carotenoides y terpenoides (incluyendo trans-bixina). Por otra parte, UAE y SPE se utilizaron para extraer el compuesto de interés (soluble en solventes orgánicos) y purificarlo usando una resina de intercambio aniónico (SAX). Diferentes técnicas analíticas fueron empleadas para la caracterización de cis-bixina, entre ellas, DRS, FT-IR y LDI MS, las cuales confirmaron su aislamiento y purificación. Asimismo, en el análisis por HPLC-UV/Vis se observó un solo pico con un tR = 3,8 min. Por otra parte, el bajo rendimiento cuántico de fluorescencia, (Φcis-Bixina = 0,02) mostró que su relajación principalmente no es radiativa. Asimismo, en los ensayos LDI no se observa formación de cationes radicales de cis-bixina, sino aductos de sodio [M+Na]+, donde el descriptor analítico S/N se puede aumentar agregando iones Na+. Con el fin de estudiar el comportamiento de cis-bixina en fase gaseosa y su desempeño analítico como matriz MALDI, se llevaron a cabo ensayos con triacilglicéridos, xantofilas y clorofilas como analitos. Se observó que se requiere de un agente promotor de la desorción (APD) como antraceno o DCTB para hacer posible su función como matriz MALDI de transferencia catiónica. El análisis fue satisfactorio usando antraceno como APD y triacilglicéridos de aceites comerciales (girasol, oliva y sacha inchi) como analitos, los cuales probablemente tienen afinidades catiónicas mayores que cis-bixina. |
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Su extracción implicó el uso de tres técnicas: Extracción con Fluido Supercrítico (SFE), Extracción con solvente asistida por Ultrasonido (UAE) y Extracción en Fase Sólida (SPE). La extracción SFE se hizo con el fin de desgrasar y/o eliminar compuestos adheridos fuertemente a la capa lipídica de la semilla, como carotenoides y terpenoides (incluyendo trans-bixina). Por otra parte, UAE y SPE se utilizaron para extraer el compuesto de interés (soluble en solventes orgánicos) y purificarlo usando una resina de intercambio aniónico (SAX). Diferentes técnicas analíticas fueron empleadas para la caracterización de cis-bixina, entre ellas, DRS, FT-IR y LDI MS, las cuales confirmaron su aislamiento y purificación. Asimismo, en el análisis por HPLC-UV/Vis se observó un solo pico con un tR = 3,8 min. Por otra parte, el bajo rendimiento cuántico de fluorescencia, (Φcis-Bixina = 0,02) mostró que su relajación principalmente no es radiativa. Asimismo, en los ensayos LDI no se observa formación de cationes radicales de cis-bixina, sino aductos de sodio [M+Na]+, donde el descriptor analítico S/N se puede aumentar agregando iones Na+. Con el fin de estudiar el comportamiento de cis-bixina en fase gaseosa y su desempeño analítico como matriz MALDI, se llevaron a cabo ensayos con triacilglicéridos, xantofilas y clorofilas como analitos. Se observó que se requiere de un agente promotor de la desorción (APD) como antraceno o DCTB para hacer posible su función como matriz MALDI de transferencia catiónica. El análisis fue satisfactorio usando antraceno como APD y triacilglicéridos de aceites comerciales (girasol, oliva y sacha inchi) como analitos, los cuales probablemente tienen afinidades catiónicas mayores que cis-bixina.PregradoQuímicocis-Bixin (hydrogen-(9'Z)-6,6'-diapocarotene-6,6'-methyl dioate) is an apocarotenoid present in the outer coat of Bixa orellana seeds. Being a highly conjugated pigment, it has a high molar absorptivity (32818 M-1 cm-1) and absorption bands at 430, 457, 487 and 355 nm (characteristic of the cis-conformation). Its extraction involved the use of three techniques: Supercritical Fluid Extraction (SFE), Ultrasonic Assisted Solvent Extraction (UAE) and Solid Phase Extraction (SPE). The SFE extraction was done to defat and/or eliminate compounds strongly adhered to the lipid layer of the seed, such as carotenoids and terpenoids (including trans-bixin). On the other hand, UAE and SPE were used to extract the compound of interest (soluble in organic solvents) and purify it using an anion exchange resin (SAX). Different analytical techniques were used for the characterization of cis-bixin, including DRS, FT-IR and LDI MS, which confirmed its isolation and purification. Likewise, in the HPLC-UV/Vis analysis, a single peak with a tR = 3.8 min was observed. On the other hand, the low fluorescence quantum yield, (Φcis-Bixin = 0.02) showed that its relaxation is mainly non-radiative. Likewise, in the LDI assays, the formation of cis-bixin radical cations is not observed, but sodium adducts [M+Na]+, where the analytical descriptor S/N can be increased by adding Na+ ions. In order to study the behavior of cis-bixin in the gas phase and its analytical performance as a MALDI matrix, tests with triacylglycerides, xanthophylls and chlorophylls as analytes were carried out. It was observed that a desorption promoting agent (DPA) such as anthracene or DCTB is required to enable its function as a MALDI cation transfer matrix. The analysis was successful using anthracene as DPA and triacylglycerides from commercial oils (sunflower, olive and sacha inchi) as analytes, which probably have higher cationic affinities than cis-bixin.application/pdfspaUniversidad Industrial de SantanderFacultad de CienciasQuímicaEscuela de Químicacis-bixinamatrizEspectrometría de masasMALDIcis-bixinmatrixMass SpectrometryMALDIEvaluación de la bixina como matriz MALDI para el análisis de pigmentos naturalesEvaluation of bixin as a MALDI matrix for the analysis of natural pigmentsTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bccehttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fORIGINALDocumento.pdfDocumento.pdfapplication/pdf4982952https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/b233c622-b588-4453-b42d-a722f6122b42/download5f641b49e7322e892343062f57c09a63MD51Carta de autorización.pdfCarta de autorización.pdfapplication/pdf88135https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/2f08b06d-6334-4000-ab1a-ee5be23c5921/download8fe2c2e8a5e1dbdd6c1b229b367570d3MD53Nota de proyecto.pdfNota de proyecto.pdfapplication/pdf184433https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/136e81c3-a796-4962-9648-1dbcc88978ed/download456010216c66c365d6c6a35adff9672fMD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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