Estandarización de un método microespectrofotométrico para la determinación de la actividad enzimática de la Fosfomanomutasa 2 en una muestra control de Bogotá Colombia

La deficiencia en la glicosilación PMM2-CDG (CDG Ia) es una enfermedad autosómica recesiva, causada por el daño de la enzima citoplasmática fosfomanomutasa 2 (E.C.5.4.2.8), la cual cataliza la conversión de manosa-1-fosfato a manosa-6-fosfato, indispensable para la N-glicosilación. Esta enfermedad es de orden multisistémica caracterizado por fallos neurológicos, digestivos, nefrológicos, hepáticos, hematológicos y cardíacos. En Colombia no hay laboratorios clínicos que realicen la prueba enzimática para el diagnóstico como tampoco hay estudios que reporten intervalos de actividad enzimática, por lo cual el objetivo de este estudio fue establecer los valores de referencia de la actividad específica de la PMM2. El método diagnóstico microespectrofotométrico fue estandarizado con 50 muestras de controles voluntarios, para ello se extrajeron los leucocitos mediante el método dextrán-heparina a partir de sangre total, se sonicaron para extraer la enzima de interés y se cuantificó el contenido de proteína por el método de Folin-Lowry. Para determinar la integridad de las muestras se usó como control la enzima lisosomal N-Acetilgalactosamina-6-sulfatosulfatasa. Los análisis estadísticos permitieron comprobar que no existen diferencias significativas entre género ni edad al encontrar un valor-p 0,12 y 0,6537 respectivamente, bajo un nivel de significancia de 0,05. Se encontró un valor de actividad específica en el límite superior mayor a lo reportado con respecto a otras investigaciones. El valor de referencia de actividad enzimática determinado en este estudio fue de 6,546-48,023 nmol/h. mg de proteína. Los valores de actividad obtenidos en este grupo control permitirán iniciar el diagnóstico de pacientes deficientes de PMM2 desde edad neonatal y contribuir así con el sistema de salud colombiano, como también dar un manejo acertado por parte del personal médico, como de la familia y así mejorar la calidad de vida de estos pacientes.

• Tipo de recurso: Trabajo de grado de pregrado
• Fecha de publicación: 2019
• Institución: Universidad Distrital Francisco José de Caldas
• Repositorio: RIUD: repositorio U. Distrital
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repository.udistrital.edu.co:11349/23261
• Acceso en línea: http://hdl.handle.net/11349/23261
• Palabra clave: Defectos congénitos de glicosilación; Fosfomanomutasa 2; Método microespectrofotométrico; Actividad enzimática; CDG-Ia; Licenciatura en Química - Tesis y disertaciones académicas; Enzimas - Análisis; Bioquímica; Biología molecular; Enfermedades genéticas; Congenital glycosylation defects; Phosphomanomutase 2; Microspectrophotometric method; Enzymatic activity; CDG-Ia
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