Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander
Digital
- Autores:
-
León Díaz, Laura Katherine
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2021
- Institución:
- Universidad de Santander
- Repositorio:
- Repositorio Universidad de Santander
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.udes.edu.co:001/5526
- Acceso en línea:
- https://repositorio.udes.edu.co/handle/001/5526
- Palabra clave:
- Cacao
Levaduras fermentadoras
ADN ribosomal
Cocoa
Fermenting yeasts
Ribosomal DNA
- Rights
- openAccess
- License
- Derechos Reservados - Universidad de Santander, 2021
| id |
RUDES2_4b07752c7d85462b349063406e3f0214 |
|---|---|
| oai_identifier_str |
oai:repositorio.udes.edu.co:001/5526 |
| network_acronym_str |
RUDES2 |
| network_name_str |
Repositorio Universidad de Santander |
| repository_id_str |
|
| dc.title.spa.fl_str_mv |
Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander |
| title |
Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander |
| spellingShingle |
Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander Cacao Levaduras fermentadoras ADN ribosomal Cocoa Fermenting yeasts Ribosomal DNA |
| title_short |
Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander |
| title_full |
Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander |
| title_fullStr |
Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander |
| title_full_unstemmed |
Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander |
| title_sort |
Identificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander |
| dc.creator.fl_str_mv |
León Díaz, Laura Katherine |
| dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv |
Rueda Forero, Nohora Juliana Sandoval Lozano, Claudia Johanna |
| dc.contributor.author.none.fl_str_mv |
León Díaz, Laura Katherine |
| dc.subject.proposal.spa.fl_str_mv |
Cacao Levaduras fermentadoras ADN ribosomal |
| topic |
Cacao Levaduras fermentadoras ADN ribosomal Cocoa Fermenting yeasts Ribosomal DNA |
| dc.subject.proposal.eng.fl_str_mv |
Cocoa Fermenting yeasts Ribosomal DNA |
| description |
Digital |
| publishDate |
2021 |
| dc.date.accessioned.none.fl_str_mv |
2021-08-20T19:40:07Z |
| dc.date.available.none.fl_str_mv |
2021-08-20T19:40:07Z |
| dc.date.issued.none.fl_str_mv |
2021-01-25 |
| dc.type.spa.fl_str_mv |
Trabajo de grado - Pregrado |
| dc.type.coarversion.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/version/c_71e4c1898caa6e32 |
| dc.type.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
| dc.type.content.spa.fl_str_mv |
Text |
| dc.type.driver.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
| dc.type.redcol.spa.fl_str_mv |
https://purl.org/redcol/resource_type/TP |
| format |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
| dc.identifier.local.none.fl_str_mv |
T 33.21 L266i |
| dc.identifier.uri.none.fl_str_mv |
https://repositorio.udes.edu.co/handle/001/5526 |
| identifier_str_mv |
T 33.21 L266i |
| url |
https://repositorio.udes.edu.co/handle/001/5526 |
| dc.language.iso.spa.fl_str_mv |
spa |
| language |
spa |
| dc.rights.spa.fl_str_mv |
Derechos Reservados - Universidad de Santander, 2021 |
| dc.rights.coar.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
| dc.rights.accessrights.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
| dc.rights.creativecommons.spa.fl_str_mv |
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0) |
| dc.rights.uri.spa.fl_str_mv |
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
| rights_invalid_str_mv |
Derechos Reservados - Universidad de Santander, 2021 Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0) https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
| eu_rights_str_mv |
openAccess |
| dc.format.extent.spa.fl_str_mv |
89 p |
| dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv |
application/pdf |
| dc.publisher.spa.fl_str_mv |
Bucaramanga : Universidad de Santander, 2021 |
| dc.publisher.faculty.spa.fl_str_mv |
Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agropecuarias |
| dc.publisher.place.spa.fl_str_mv |
Bucaramanga, Colombia |
| dc.publisher.program.spa.fl_str_mv |
Microbiología Industrial |
| institution |
Universidad de Santander |
| bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.udes.edu.co/bitstreams/a6258a6c-024f-4d01-822e-618474789f65/download https://repositorio.udes.edu.co/bitstreams/7697c2f6-98ce-4a4b-9198-ad594eed446a/download https://repositorio.udes.edu.co/bitstreams/6cb21264-2737-41f1-b964-1e880156876a/download https://repositorio.udes.edu.co/bitstreams/4143a2db-cfb4-4cc1-b374-3d3fe1e38573/download |
| bitstream.checksum.fl_str_mv |
445e91416f16a3f3d2258f979ce12c03 38d94cf55aa1bf2dac1a736ac45c881c a9fe7b9ea28a7e82d83c802f17f8ac85 ccc5a021ab6c8838209516802785c3ae |
| bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 |
| repository.name.fl_str_mv |
Repositorio Universidad de Santander |
| repository.mail.fl_str_mv |
soporte@metabiblioteca.com |
| _version_ |
1814158825003941888 |
| spelling |
Rueda Forero, Nohora Julianafdefebdb-5a74-4c59-ba33-4ff4cc09bca4-1Sandoval Lozano, Claudia Johanna15784c8e-726a-4890-98b8-972d4bc0787d-1León Díaz, Laura Katherine06aa219c-c3c8-47d8-917d-e530af66c9eb-12021-08-20T19:40:07Z2021-08-20T19:40:07Z2021-01-25DigitalEl cacao ha sido priorizado en Colombia como uno de los productos agropecuarios con mayor potencial gracias al reconocimiento mundial de la calidad de los genotipos que se cultivan en el país (cacao criollo, forastero e híbrido) ya que cuenta con las condiciones adecuadas para el cultivo de este fruto. La fermentación es un proceso de reacciones químicas, mediante las cuales, los azúcares contenidos en la pulpa se transforman en productos como agua, alcohol etílico y ácido acético, entre otras sustancias, por la acción de microorganismos como las levaduras. En este estudio se realizó una caracterización e identificación molecular de levaduras relacionadas a la fermentación de cacao (Theobroma cacao L) mediante PCR punto final de las regiones 5.8S ITS y 26S (dominio D1/D2) del ADN ribosomal (ADNr) utilizando dos pares de cebadores específicos para cada región (ITS y NL) empleando así los siguientes ITS1 (5'- TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3') e ITS4 (5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3'); NL-1F (5’- GCA TAT CAA TAA GCG GAG GAA AAG-3’) y NL-4R (5’-GGT CCG TGT TTC AAG ACG G-3’) realizando un análisis filogenético para las regiones y determinar su género y especie. Se identificaron un total de 40 aislados destacándose Hanseniaspora opuntiae, Pichia kluyverii y Torulaspora delbrueckii como las levaduras dominantes en este estudio, seguidas de Cándida parapsilopsis, Cándida sobosivorans, Criptococcus sp, Hanseniospora meyeri, Pichia kluyverii, Pichia kudriavzevii, Pichia mashurica, Pichia occidentalis, Rhodotorula acuta, Rhodotorula mucilaginosa, Saccharomyces cerevisiae, y Wickerhamomyces anomalus, todas estas con capacidad productoras de compuestos volátiles que le aportan propiedades organolépticas a los granos de cacao.Cocoa has been prioritized in Colombia as one of the agricultural products with the greatest potential thanks to the worldwide recognition of the quality of the genotypes that are cultivated in the country (Creole, foreign and hybrid cocoa) since it has the appropriate conditions for cultivation. of this fruit. Fermentation is a process of chemical reactions, through which the sugars contained in the pulp are transformed into products such as water, ethyl alcohol and acetic acid, among other substances, by the action of microorganisms such as yeast. In this study, a molecular characterization and identification of yeasts related to cocoa fermentation (Theobroma cacao L) was carried out by end-point PCR of the 5.8S ITS and 26S regions (D1 / D2 domain) of ribosomal DNA (rDNA) using two pairs of specific primers for each region (ITS and NL) thus using the following ITS1 (5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3 ') and ITS4 (5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3'); NL-1F (5'-GCA TAT CAA TAA GCG GAG GAA AAG-3 ') and NL-4R (5'-GGT CCG TGT TTC AAG ACG G-3') performing a phylogenetic analysis for the regions and determining their gender and species. A total of 40 isolates were identified, highlighting Hanseniaspora opuntiae, Pichia kluyverii and Torulaspora delbrueckii as the dominant yeasts in this study, followed by Candida parapsilopsis, Cándida sobosivorans, Criptococcus sp, Hanseniospora meyeri, Pichia kluyhurria, Pichia kluyverria, Pichia kluyhurria occidental , Rhodotorula acuta, Rhodotorula mucilaginosa, Saccharomyces cerevisiae, and Wickerhamomyces anomalus, all of these with the capacity to produce volatile compounds that provide organoleptic properties to cocoa beans.PregradoMicrobiólogo Industrial1 ed.Introducción .............................................................................................................................. 16 1. Planteamiento del Problema .................................................................................................. 19 2. Justificación .......................................................................................................................... 21 3. Objetivos ............................................................................................................................... 24 3.1 Objetivo General ................................................................................................................. 24 3.2 Objetivos Específicos .......................................................................................................... 24 4. Marco Referencial ................................................................................................................. 25 4.1 Estado del Arte .................................................................................................................... 25 4.2 Marco Teórico ..................................................................................................................... 30 4.2.1 Proceso de Fermentación del Cacao .................................................................................. 30 4.2.2 Roles de los Microorganismos Involucrados en la Fermentación ...................................... 32 4.2.2.1 Levaduras ...................................................................................................................... 32 4.2.2.2 Bacterias ........................................................................................................................ 35 4.2.3 Métodos de Identificación Molecular ................................................................................ 36 4.2.3.1 Métodos Basados en el Análisis de Regiones Ribosómicas. .......................................... 37 4.2.3.1.1 Secuenciación de Regiones Ribosómicas .................................................................... 38 4.2.3.1.2 Polimorfismo de Longitud en los Fragmentos de Restricción del rDNA/rRNA (RFLPs) .................................................................................................................................. 38 4.2.3.1.3 PCR-DGGE (Denaturing Gradient Gel Electrophoresis) ............................................. 39 4.2.3.1.4 PCR en Tiempo Real .................................................................................................. 39 4.3 Marco Legal ........................................................................................................................ 40 5. Hipótesis ............................................................................................................................... 42 5.1 Hipótesis Nula ..................................................................................................................... 42 5.2 Hipótesis Alternativa ........................................................................................................... 42 6. Método .................................................................................................................................. 43 6.1 Diseño del Estudio .............................................................................................................. 43 6.2 Metodología ........................................................................................................................ 43 6.3 Materiales y Métodos ................................................................................................ 44 6.3.1 Cultivo de Levaduras de Interés ........................................................................................ 44 6.3.2 Extracción y Cuantificación de ADN Genómico ............................................................... 44 6.3.2.1Amplificación por PCR .................................................................................................. 45 6.3.2.2 Electroforesis................................................................................................................. 46 6.3.2.3 Purificación de PCR ...................................................................................................... 47 6.3.2.4 Secuencia y Filogenia.. .................................................................................................. 47 7. Resultados ............................................................................................................................. 49 7.1 Extracción, Cuantificación y Purificación de ADN Genómico ............................................. 49 7.2 Amplificación por PCR ....................................................................................................... 50 7.3 Análisis de Secuencia y Filogenia para cada Aislado ........................................................... 52 8. Discusión .............................................................................................................................. 61 9. Conclusiones ......................................................................................................................... 67 10. Recomendaciones ................................................................................................................ 68 Referencias Bibliográficas......................................................................................................... 69 Apéndices ................................................................................................................................. 7789 papplication/pdfT 33.21 L266ihttps://repositorio.udes.edu.co/handle/001/5526spaBucaramanga : Universidad de Santander, 2021Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y AgropecuariasBucaramanga, ColombiaMicrobiología IndustrialDerechos Reservados - Universidad de Santander, 2021info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/http://purl.org/coar/access_right/c_abf2CacaoLevaduras fermentadorasADN ribosomalCocoaFermenting yeastsRibosomal DNAIdentificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de SantanderTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fTextinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPhttp://purl.org/coar/version/c_71e4c1898caa6e32Todas las AudienciasAfoakwa, E.O., Paterson, A., Fowler, M., Ryan, A., 2011. Flavor formation and character in cocoa and chocolate: a critical review. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 48, 840–857Arana-Sánchez, A., Segura-García, L. E., Kirchmayr, M., Orozco-Ávila, I., Lugo-Cervantes, E., & Gschaedler-Mathis, A. (2015). Identification of predominant yeasts associated with artisan Mexican cocoa fermentations using culture-dependent and culture-independent approaches. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 31(2), 359-369.Ardhana, M.M., Fleet, G.H., 2013. The microbial ecology of cocoa bean fermentations in Indonesia. Int. J. Food Microbiol. 86, 87–99.Cabej, N. (2012). Epigenetic Principles of Evolution. Primera edición. Elsevier Insights.Camu, N., Gonzalez, A., De Winter, T., Van Schoor, A., De Bruyne, K., Vandamme, P., Takrama, J.S., Addo, S.K., De Vuyst, L., 2010 b. Influence of turning and environmental contamination on the dynamics of populations of lactic acid and acetic acid bacteria involved in spontaneous cocoa bean heap fermentation in Ghana. Appl. Environ. Microbiol. 74, 86–98Crafack, M., Mikkelsen, M. B., Saerens, S., Knudsen, M., Blennow, A., Lowor, S., ... & Nielsen, D. S. (2013). Influencing cocoa flavour using Pichia kluyveri and Kluyveromyces marxianus in a defined mixed starter culture for cocoa fermentation. International journal of food microbiology, 167(1), 103-116.Delgado-Ospina, J., Triboletti, S., Alessandria, V., Serio, A., Sergi, M., Paparella, A., ... y Chaves-López, C. (2020). Biodiversidad funcional de levaduras aisladas de granos de cacao secos y fermentados colombianos. Microorganismos, 8 (7), 1086.Drake HL. Acetogenesis. New York: Springer Science & Business Media; 2012Ercolini, D. (2014) PCR-DGGE fingerprinting: novel strategies for detection of microbes in food. J. Microbiol. Methods. 56: 297-314.FEDECACAO. ICCO prevé mayor déficit mundial de cacao,2013: Disponible En http://www.fedecacao.com.co/ site/index.php/1nov-novedades/919-art-tit-2013-06-18- s01Fell, J. W., T. Boekhout, A. Fonseca, G. Scorzetti, and A. Statzell-Tallman. 2010. Biodiversity and systematics of basidiomycetous yeasts as determined by large-subunit rDNA D1/D2 domain sequence analysis. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 50:1351-1371.Fernández-Espinar, M. T., P. Marorell, R. De Llanos y A. Querol, (2016). Molecular methods to identify and characterize yeast in foods and beverages. “Yeast in Food and Beverages”. Querol y Fleet (Eds.). 55-82. Springer-Verlag Alemania, Berlin, Heidelberg.González-Fernández, C., Santos, E.M., Rovira, J., Jaime, I. (2013). The effect of sugar concentration and starter culture on instrumental and sensory textural properties of chorizo- Spanish dry-cured sausage. Meat Science, 74: 467-475.Hall, T., Biosciences, I., & Carlsbad, C. (2011). BioEdit: an important software for molecular biology. GERF Bull Biosci, 2(1), 60-61Hassan, M., Blanc, PJ, Pareilleux, A. y Goma, G. (2010). Producción de equivalentes de manteca de cacao a partir de la fermentación de jugo de tuna por un auxótrofo de ácido graso insaturado de Cryptococcus curvatus cultivado en cultivo discontinuo Process Biochemistry, 30 (7), 629–634. doi: 10.1016 / 0032-9592 (94) 00061-1Henrick-Kling CMT 2010. Identification of Brettanomyces/Dekkera species based on polymorphisms in the rRNA internal transcribed spacer region. Food Technol Biotechnol; 38: 69-75.Hirano S. Upper C. 2000. Bacterial in the leaf ecosystem with emphasis on Pseudomonas syringae-a pathogen, ice nucleus, and epihyte. Microbiology and Molecular Biology Reviews. Vo 64 No.3. 624-653James S., J. Cai, I. N. Roberts, M. D. Collins. (1997). Phylogenetic analysis of the genus Saccharomyces based on 18S rRNA gene sequences: description of Saccharomyces kunashirensis sp. nov. and Saccharomyces martiniae sp. nov. Int J Syst Bacteriol 47: 453– 460.Jespersen, L., Nielsen, D. S., Hønholt, S., & Jakobsen, M. (2015). Occurrence and diversity of yeasts involved in fermentation of West African cocoa beans. FEMS yeast research, 5(4- 5), 441-453.Kabir, G., Peay, P., Bruns, T. (2015). Fungal Community Ecology: A Hybrid Beast with a Molecular Master. BioScience Journal. 58 (9) Pp. 799-810.Kendrick B. 2000. The Fifth Kingdom. 3º ed. Focus Publishing, Newburyport, p 112.Kimura, M. (1980). A simple method for estimating evolutionary rates of base substitutions through comparative studies of nucleotide sequences. Journal of molecular evolution, 16(2), 111-120.Koné, MK, Guéhi, ST, Durand, N., Ban-Koffi, L., Berthiot, L., Tachon, AF, ... y Montet, D. (2016). Contribución de las levaduras predominantes a la aparición de compuestos aromáticos durante la fermentación del grano de cacao. Food Research International, 89, 910-917.Kostinek, M., Ban-Koffi, L., Ottah-Atikpo, M., Teniola, D., Schillinger, U., Holzapfel, W.H., Franz, C., 2014. Diversity of predominant lactic acid bacteria associated with cocoa fermentation in Nigeria. Curr. Microbiol. 56, 306–314.Kumar, S., Stecher, G., Li, M., Knyaz, C. y Tamura, K. (2018). MEGA X: análisis de genética evolutiva molecular en plataformas informáticas. Biología molecular y evolución, 35 (6), 1547-1549.Kurtzman C. P. y C. J. Robnett. (1998). Identification and phylogeny of ascomycetous yeasts from analysis of nuclear large subunit 26S ribosomal ADN partial sequences. Anton van Leeuwenhoek 73:331–371Kurtzman, C. P., Fell, J. W., Boekhout, T. y Robert, V. (2011). Methods for isolation, phenotypic characterization and maintenance of yeasts. The Yeasts (Vol. 1). Elsevier B.V. http://doi.org/10.1016/B978-0-444-52149-1.00007-0Kurtzman, CP, Mateo, RQ, Kolecka, A., Theelen, B., Robert, V. y Boekhout, T. (2015). Avances en la sistemática y filogenia de la levadura y su uso como predictores de vías metabólicas biotecnológicamente importantes. Investigación de levadura FEMS, 15 (6).Lefeber, T., Gobert, W., Vrancken, G., Camu, N., De Vuyst, L., 2011. Dynamics and species diversity of communities of lactic acid bacteria and acetic acid bacteria during spontaneous cocoa bean fermentation in vessels. Food Microbiol. 28, 457–464.Li SL, Sun HM, Zhao HQ, Cao L, Yuan Y, Feng YL, Xue GH. (2012). A single tube modified allele-specific-PCR for rapid detection of erythromycin-resistant Mycoplasma pneumoniae in Beijing. Chinese Medical Journal (Engl). 125(15), 2671-2676Lima, L.J.R., Almeida, M.H., Nout, M.J.R., Zwietering, M.H., 2011. Theobroma cacao L., “The Food of the Gods”: quality determinants of commercial cocoa beans, with particular reference to the impact of fermentation. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 51, 731–761.Lopez, A.S. 2013. The contribution of volatile compounds to the flavour of chocolate and their development during processing. PhD Thesis, University of the West Indies/Cacao Research UnitLópez, U.V. y Pires, J. L. 2015. Botany and production of cocoa. En R. F. Schwan & G. H. Fleet (Eds.), Cocoa and Coffee Fermentations. Chapter 2. 43-64. Boca Raton, FL: Taylor & Francis Group, CCRC Press.Lopez, A.S. and Dimick, P.S. 1991. Enzymes involved in cocoa curing. In Food Enzymology, pp. 211–236. Fox, P.F., Ed. Amsterdam: Elsevier.Ludlow, C.L.; Cromie, G.A.; Garmendia-Torres, C.; Sirr, A.; Hays, M.; Field, C.; Jeffery, E.W.; Fay, J.C.; Dudley, A.M. 2016. Independent Origins of Yeast Associated with Coffee and Cacao Fermentation. Curr. Boil. 26, 965–971.Madigan MT, Martinko JM, Parker J, 2010. Microbiología de los microorganismos. 13ª ed. Benjamin Cummings.Maura, Y.F.; Balzarini, T.; Borges, P.C.; Evrard, P.; De Vuyst, L.; Daniel, H.-M. 2016. The environmental and intrinsic yeast diversity of Cuban cocoa bean heap fermentations. Int. J. Food Microbiol. 233, 34–43.Menezes, A. G. T., Batista, N. N., Ramos, C. L., Silva, A. R. de A. e, Efraim, P., Pinheiro, A. C. M., & Schwan, R. F. (2016). Investigation of chocolate produced from four different Brazilian varieties of cocoa (Theobroma cacao L.) inoculated with Saccharomyces cerevisiae. Food Research International, 81, 83–90. doi:10.1016/j.foodres.2015.12.036Mota-Gutierrez, J.; Botta, C.; Ferrocino, I.; Giordano, M.; Bertolino, M.; Dolci, P.; Cannoni, M.; Cocolin, L. 2018. Dynamics and Biodiversity of Bacterial and Yeast Communities during Fermentation of Cocoa Beans. Appl. Environ. Microbiol.Nielsen, D.S., Teniola, O.D., Ban-Koffi, L., Owusu, M.., Andersson, T.S. and Holzapfel, W.H. 2010. The microbiology of Ghanian cocoa fermentations analysed using culturedependent and cultureindependent methods. International Journal of ´Food Microbiology, 114: 168-186.Payne, M., Hurst, J., Miller, K., Rank, C., y Stuart, D. (2010). Impact of fermentation, drying, roasting, and dutch processing on epicatechin and catechin content of cacao beans and cocoa ingredients, Journal of Agriculture and Food Chemestry. Volume 58; Pages 10518-10527 http://doi.org/10.1021/jf102391q.Petersen, K.M., Møller, P.L. and Jespersen, L. (2001) DNA typing methods for differentiation of Debaryomyces hansenii strains and other yeasts related to surface ripened cheeses. Int.J. Food Microbiol. 69, 11–24. (Occurrence and diversity of yeasts involved in fermentation of West African cocoa beans)Rodriguez, J., Escalona, H., Contreras, S., Orozco, I., Jaramillo, E., y Lugo, E. (2012). Effect of fermentation time and drying temperature on volatile compounds in cocoa. Food Chemistry, 132; 1, 277-288. http://doi.org/10.1016/j.foodchem.2011.10.078.Rodríguez, J. (2011). Estudio de los compuestos volátiles de Theobroma cacao L., durante el proceso de tradicional de fermentación, secado y tostado. Tesis doctoral. México D. F.: Instituto Politécnico Nacional. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. 188.Romero C, P. J. A. Cuervo, Y. G. Ortiz, M. A. Torres, J. G. Rodriguez, O. V. Robles, 2012. Fermented Foods and Beverages 497-501.Saitou, N., & Nei, M. (1987). The neighbor-joining method: a new method for reconstructing phylogenetic trees. Molecular biology and evolution, 4(4), 406-425.Sarmiento A., Herrera J. 2013. Obtención y caracterización de un banco de levaduras con potencial aplicación probiótica. Trabajo de Grado (Microbiología Industrial). Pontificia Universidad Javeriana. Bogotá. P 103Schoch, C., Seifert, K., Hunhndorf, S., Robert, V., Spouge, J., Levesque, A., Consortium, F., 2012. Nuclear ribosomal internal transcribed spacer (ITS) region as a universal DNA barcode marker for Fungi. PNAS, 6241-6242Schwan, R.F., Wheals, A.E., 2014. The microbiology of cocoa fermentation and its role in chocolate quality. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 44, 205–221.Schwan, R. F., Pereira, G. V. M., & Fleet, G. H. (2014). Microbial activities during cocoa fermentation. In R. F. Schwan, & G. H. Fleet (Eds.), Cocoa and coffee fermentations (pp. 125–135). London: CRC Press Taylor and FrancisSegura, L., Kirchmayr, M., Flores, E., Gschaedler, A. (2010). PCR- RFLP de las regiones ITS- 5.8S como herramienta de la identificación de levaduras: ventajas y desventajas. Red de Revistas Científicas de América Latina y el Caribe, España y Portugal. 8 (2) Pp. 1-12.Soto L, Baca BE 2011. Mecanismos de Protección de la Nitrogenasa a la Inactivación por Oxígeno. Revista Latinoamericana de Microbiología.Valdelamar, L. M. M., Díaz, A. S., & Flores, R. C. 2011 Secuenciación de fragmentos de ADN.Webster J, Weber RWS. Introduction to fungi. 3rd ed. Cambridge University press, New York.Wu M., Liu W., Yang G., Yu D., Lin D., Sun H., Chen S. (2014). Engineering of a Pichia pastoris expression system for high-level secretion of HSA/GH fusion protein. Appl. biochem. biotechnol., 172(5): 2400-2411.Zhao, J., & Fleet, G. (2014). Yeasts are essential for cocoa bean fermentation. International Journal of Food Microbiology, 174, 72-87.PublicationORIGINALIdentificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander.pdfIdentificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander.pdfDocumento Principalapplication/pdf783640https://repositorio.udes.edu.co/bitstreams/a6258a6c-024f-4d01-822e-618474789f65/download445e91416f16a3f3d2258f979ce12c03MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-859https://repositorio.udes.edu.co/bitstreams/7697c2f6-98ce-4a4b-9198-ad594eed446a/download38d94cf55aa1bf2dac1a736ac45c881cMD52TEXTIdentificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander.pdf.txtIdentificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander.pdf.txtExtracted texttext/plain101662https://repositorio.udes.edu.co/bitstreams/6cb21264-2737-41f1-b964-1e880156876a/downloada9fe7b9ea28a7e82d83c802f17f8ac85MD53THUMBNAILIdentificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander.pdf.jpgIdentificación Molecular de Levaduras Asociadas a la Fermentación de Cacao Artesanal en el Departamento de Santander.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg6123https://repositorio.udes.edu.co/bitstreams/4143a2db-cfb4-4cc1-b374-3d3fe1e38573/downloadccc5a021ab6c8838209516802785c3aeMD54001/5526oai:repositorio.udes.edu.co:001/55262022-10-25 10:42:42.334https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/Derechos Reservados - Universidad de Santander, 2021https://repositorio.udes.edu.coRepositorio Universidad de Santandersoporte@metabiblioteca.comTGljZW5jaWEgZGUgUHVibGljYWNpw7NuIFVERVMKRGlyZWN0cmljZXMgZGUgVVNPIHkgQUNDRVNPCgo= |