Influencia de la biomasa y la concentración de metanol en la producción de la enzima recombinante hexosaminidasa A en pichia pastoris

En la actualidad la terapia de remplazo enzimático es una alternativa prometedora para el tratamiento de algunos errores innatos del metabolismo. Las enzimas empleadas para este fin son producidas de forma recombinante empleando diversos sistemas de expresión como lo son las bacterias, levaduras y c...

Full description

Autores:
Hernández Pulido, Francy Liliana
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2014
Institución:
Pontificia Universidad Javeriana
Repositorio:
Repositorio Universidad Javeriana
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.javeriana.edu.co:10554/16667
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/10554/16667
Palabra clave:
Hexosaminidasa A
Modelo cinético
Pichia pastoris
Proteína recombinante
Rendiemiento
Hexosaminidase A
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Pichia pastoris
Recombinant protein
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Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas
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openAccess
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Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
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description En la actualidad la terapia de remplazo enzimático es una alternativa prometedora para el tratamiento de algunos errores innatos del metabolismo. Las enzimas empleadas para este fin son producidas de forma recombinante empleando diversos sistemas de expresión como lo son las bacterias, levaduras y células de animales o plantas. En el caso de las levaduras una de las más empleadas ha sido Pichia pastoris, la cual ha mostrado varias ventajas frente a los demás sistemas en cuanto a su productividad. Sin embargo, factores relacionados con las condiciones de cultivo, y concentración de biomasa o inductor tienen efectos importantes sobre la producción de la enzima recombinante. En este sentido, en el presente proyecto se caracterizaron los niveles de producción de la enzima Hexosaminidasa A producida de forma recombinante en la levadura P. pastoris, bajo diferentes concentraciones de biomasa y metanol. Con los resultados obtenidos se construyó un modelo para observar el comportamiento cinético de Pichia pastoris con un sustrato limitante. Los resultados mostraron que los mayores valores de actividad enzimática fueron obtenidos con una concentración inicial de glicerol de 4% y con una concentración de metanol del 0,5% durante la fase de inducción. Los resultados obtenidos en el presente trabajo constituyen información importante en el desarrollo de un proceso de producción eficiente de la enzima recombinante Hexosaminidasa A para uso en terapia de reemplazo enzimático para la enfermedad de Tay Sachs.
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spelling Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Alméciga Díaz, Carlos JavierHernández Pulido, Francy Liliana2015-11-16T01:35:35Z2016-03-29T14:24:50Z2020-04-15T20:13:42Z2015-11-16T01:35:35Z2016-03-29T14:24:50Z2020-04-15T20:13:42Z2014http://hdl.handle.net/10554/16667instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coEn la actualidad la terapia de remplazo enzimático es una alternativa prometedora para el tratamiento de algunos errores innatos del metabolismo. Las enzimas empleadas para este fin son producidas de forma recombinante empleando diversos sistemas de expresión como lo son las bacterias, levaduras y células de animales o plantas. En el caso de las levaduras una de las más empleadas ha sido Pichia pastoris, la cual ha mostrado varias ventajas frente a los demás sistemas en cuanto a su productividad. Sin embargo, factores relacionados con las condiciones de cultivo, y concentración de biomasa o inductor tienen efectos importantes sobre la producción de la enzima recombinante. En este sentido, en el presente proyecto se caracterizaron los niveles de producción de la enzima Hexosaminidasa A producida de forma recombinante en la levadura P. pastoris, bajo diferentes concentraciones de biomasa y metanol. Con los resultados obtenidos se construyó un modelo para observar el comportamiento cinético de Pichia pastoris con un sustrato limitante. Los resultados mostraron que los mayores valores de actividad enzimática fueron obtenidos con una concentración inicial de glicerol de 4% y con una concentración de metanol del 0,5% durante la fase de inducción. Los resultados obtenidos en el presente trabajo constituyen información importante en el desarrollo de un proceso de producción eficiente de la enzima recombinante Hexosaminidasa A para uso en terapia de reemplazo enzimático para la enfermedad de Tay Sachs.At present enzyme replacement therapy is a promising alternative for the treatment of some inborn errors of metabolism. The enzymes employed for this purpose are recombinant produced using various expression systems such as bacteria, yeast and animal or plant cells. In the matter of yeasts one of the most use had been Pichia pastoris, this yeast had show many advantages in comparison with others systems talking about productivity. However, factors related to culture conditions and biomass concentration or inductor has important effects on the production of the recombinant enzyme. In this project production levels of hexosaminidase enzyme recombinant produced in yeast P. pastoris under different concentrations of biomass and methanol they were characterized. With the results a model was constructed to observe the kinetic behavior of Pichia pastoris with a limiting substrate. The results showed that higher enzyme activity values were obtained with an initial concentration of 4% glycerol and with a methanol concentration of 0.5% during the induction phase. The results obtained in this study are important information on the development of an efficient production process of the recombinant enzyme hexosaminidase A for use in enzyme replacement therapy for Tay Sachs.Microbiólogo (a) IndustrialPregradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaMicrobiología IndustrialFacultad de CienciasHexosaminidasa AModelo cinéticoPichia pastorisProteína recombinanteRendiemientoHexosaminidase AKinetic modelPichia pastorisRecombinant proteinYieldMicrobiología industrial - Tesis y disertaciones académicasInfluencia de la biomasa y la concentración de metanol en la producción de la enzima recombinante hexosaminidasa A en pichia pastorisTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisORIGINALHernandezPulidoFrancyLiliana2014.pdfHernandezPulidoFrancyLiliana2014.pdfapplication/pdf812114http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/16667/1/HernandezPulidoFrancyLiliana2014.pdfd150a6ff366f539dc7d9a643c1481d1aMD51open accessLicencia de uso.pdfLicencia de uso.pdfapplication/pdf318565http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/16667/2/Licencia%20de%20uso.pdf13cf2ce39b6fdf9d23fce9837fb3894fMD52metadata only accessTHUMBNAILDocumento.pdf.jpgDocumento.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg5259http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/16667/3/Documento.pdf.jpgddd8ff0e0ab65f6c56e1d1231374a005MD53open accessLicencia de uso.pdf.jpgLicencia de uso.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg8857http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/16667/4/Licencia%20de%20uso.pdf.jpge6fadc2533bf1fbf823e82ffbf416304MD54open accessHernandezPulidoFrancyLiliana2014.pdf.jpgHernandezPulidoFrancyLiliana2014.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg5259http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/16667/5/HernandezPulidoFrancyLiliana2014.pdf.jpgddd8ff0e0ab65f6c56e1d1231374a005MD55open access10554/16667oai:repository.javeriana.edu.co:10554/166672022-05-03 14:43:21.492Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepositorio@javeriana.edu.co