Evaluación de la actividad proteolítica endógena de Hansenula polymorph
La limpieza y sanitización de un área, equipo o superficie en la fabricación medicamentos tiene por objeto reducir los residuos de suciedad o contaminan por debajo de los límites establecidos, de forma que no afecte la calidad seguridad de cualquier producto fabricado. En el presente trabajo se real...
- Autores:
-
Luna Cabrera, Sandra Janneth
Sánchez Botero, Cilia Maria
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2002
- Institución:
- Pontificia Universidad Javeriana
- Repositorio:
- Repositorio Universidad Javeriana
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repository.javeriana.edu.co:10554/61591
- Acceso en línea:
- http://hdl.handle.net/10554/61591
- Palabra clave:
- Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas
Proteínas
Levaduras
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- openAccess
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- Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
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La limpieza y sanitización de un área, equipo o superficie en la fabricación medicamentos tiene por objeto reducir los residuos de suciedad o contaminan por debajo de los límites establecidos, de forma que no afecte la calidad seguridad de cualquier producto fabricado. En el presente trabajo se realizó una validación microbiológica de las áreas producción de la vacuna contra la Fiebre Amarilla y los laboratorios Aseguramiento de la Calidad en el Instituto Nacional de Salud optimizando POEs y elaborando los registros para llevar a cabo el monitoreo. Se tomar varios muestreos ambientales de las áreas por el método de Sedimentación, las superficies y equipos por el método del escobillón y a los operarios media un frotis. Los medios utilizados en el estudio fueron agares Nutritivo, Sang Saboureaud, EMB y Tripticasa de Soya. Se establecieron límites de aceptación alerta y acción realizando un análisis estadístico de Frecuencias Acumuladas 95%. Los resultados obtenidos fueron comparados con las normas establecidas por las Buenas Prácticas de Manufactura para dar la validación de las áreas. 72% de los puntos evaluados en las áreas de producción y un 44% en l laboratorios de la División de Aseguramiento de la Calidad quedaron validad mientras que un 28% de los puntos en el área de producción de la vacuna y 56% en los laboratorios de la División de Aseguramiento no quedaron validad debido a que no presentan una infraestructura y sistemas de apoyo crítico adecuados y el procedimiento de limpieza y sanitización de las áreas no es óptimo. Finalmente, se sugirieron las modificaciones y recomendaciones pertinentes p la validación microbiológica de las áreas. |
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Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, "Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores", los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Zuluaga, DaniloPedroza, Aura MarinaLuna Cabrera, Sandra JannethSánchez Botero, Cilia Maria2022-09-02T12:23:46Z2022-09-02T12:23:46Z2002-10-28http://hdl.handle.net/10554/61591instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coLa limpieza y sanitización de un área, equipo o superficie en la fabricación medicamentos tiene por objeto reducir los residuos de suciedad o contaminan por debajo de los límites establecidos, de forma que no afecte la calidad seguridad de cualquier producto fabricado. En el presente trabajo se realizó una validación microbiológica de las áreas producción de la vacuna contra la Fiebre Amarilla y los laboratorios Aseguramiento de la Calidad en el Instituto Nacional de Salud optimizando POEs y elaborando los registros para llevar a cabo el monitoreo. Se tomar varios muestreos ambientales de las áreas por el método de Sedimentación, las superficies y equipos por el método del escobillón y a los operarios media un frotis. Los medios utilizados en el estudio fueron agares Nutritivo, Sang Saboureaud, EMB y Tripticasa de Soya. Se establecieron límites de aceptación alerta y acción realizando un análisis estadístico de Frecuencias Acumuladas 95%. Los resultados obtenidos fueron comparados con las normas establecidas por las Buenas Prácticas de Manufactura para dar la validación de las áreas. 72% de los puntos evaluados en las áreas de producción y un 44% en l laboratorios de la División de Aseguramiento de la Calidad quedaron validad mientras que un 28% de los puntos en el área de producción de la vacuna y 56% en los laboratorios de la División de Aseguramiento no quedaron validad debido a que no presentan una infraestructura y sistemas de apoyo crítico adecuados y el procedimiento de limpieza y sanitización de las áreas no es óptimo. Finalmente, se sugirieron las modificaciones y recomendaciones pertinentes p la validación microbiológica de las áreas.The yeast endogenous proteolytic activity is very important in the protein expressi since a high level of activity would totally or partially affect the protein that we ne to express. In this work were test two strains of Hansenula polymorpha, designate as IDJP and IDJP-16/pET1. The growth process was perform in different culture med minimum media whith leucine and YPD media; minimun media without leucine YPD respectively. The growing conditions were incubation at 37°C with agitatio 250 rpm for 24 hours. The positive control used to evaluate the intracellular extracellular proteolytic activity was the Saccharomyces cerevesiae strain that culture in the same conditions of H. polymorpha but incubate at 30°C. The pET1 plasmid doesn’t result in a metabolic load for the growth of the yeast. culture media with the best nutritive conditions was YPD, that reached the greater with value of 0.326 h –1. The samples were centrifugate and the supernatant was culture in milk agar at p/v; for the qualitative extracellular proteolytic activity evaluation, were formation of a proteolytic halo doesn’t was observed for H. polymorpha while prot eolytic halo was observed in the 12 hour for the control strain with a diameter 2.5 cm. For the intracellular proteolytic activity evaluation the pellet was used f cellular lysis, in where was used cells lysis buffer and glass beads of 0.5 mm. lysis results were culture in milk agar at 1% p/v, H. polymorpha does not form proteolytic halo in any samples, while the control strain formed the halo at 8, 10 12 hour. To this samples the proteolytic activity were evaluate quantitative using thricloroacetic acid technique obtaining as result 1,93 UP/min, 1,06 UP/min and 0 UP/min respectively. The technique for the extracellular quantitative proteoly activity were aplicate to the control strain at the 12 hour obtaining as result 3 UP/min.Microbiólogo (a) IndustrialPregradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaMicrobiología IndustrialFacultad de CienciasEvaluación de la actividad proteolítica endógena de Hansenula polymorphTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisMicrobiología industrial - Tesis y disertaciones académicasProteínasLevadurasORIGINALtesis17 (1).pdftesis17 (1).pdfDocumentoapplication/pdf720190http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/61591/1/tesis17%20%281%29.pdf8998332e27597d265aebe0ec18a2361cMD51embargoed access|||9999-09-02LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82603http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/61591/2/license.txt2070d280cc89439d983d9eee1b17df53MD52open accessTHUMBNAILtesis17 (1).pdf.jpgtesis17 (1).pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg3882http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/61591/3/tesis17%20%281%29.pdf.jpgca24728cc40658c4b566e026ef1d23adMD53open access10554/61591oai:repository.javeriana.edu.co:10554/615912022-09-03 03:06:04.027Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepositorio@javeriana.edu.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 |