Caracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifós
74 Páginas
- Autores:
-
Sánchez Sánchez, Sandra Mabel
- Tipo de recurso:
- Fecha de publicación:
- 2012
- Institución:
- Universidad del Tolima
- Repositorio:
- RIUT: Repositorio U. Tolima
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- Palabra clave:
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Sánchez Sánchez, Sandra Mabel71f0597c-8dc0-46f3-a149-98388f275626-12014-11-04T15:32:30Z2014-11-04T15:32:30Z201274 PáginasRecurso ElectrónicoEl uso indiscriminado de agroquímicos se ha relacionado con desórdenes neurocomportamentales que reflejan disfunción cognitiva y psicomotora, incluso tras exposición crónica a niveles bajos. Los plaguicidas organofosforados tipo oxón como el clorpirifós producen trastornos crónicos neurodegenerativos, como la neuropatía retardada y la leucoencefalopatía inducida por organofosforados, las cuales se caracterizan por disfunción motora, degeneración axonal y procesos de desmielinización. En el presente estudio se evaluaron los efectos tóxicos del clorpirifós sobre la población neuronal y la reactividad astrocitaria, microglial y de la proteína base mielina tras la exposición subcrónica (4 y 8 semanas) a dosis subletales bajas (114 μg/Kg y 228 μg/Kg) en un modelo de neurotoxicidad encefálica inducida en ratas Wistar. Las dosis fueron administradas semanalmente por gavaje y 8 días después del último tratamiento se sacrificaron los animales y se obtuvieron cortes coronales encefálicos de 50 μm. Mediante técnicas de histoquímica e inmunohistoquímica convencional se caracterizaron los cambios morfológicos de los astrocitos, la microglía y la proteína base mielina (MBP) en corteza, hipocampo (CA1), zona paraventricular, estriado y cápsula interna. De acuerdo a los resultados obtenidos se encontró un incremento en la inmunorreactividad, densidad y población astrocitaria y microglial, con cambios morfológicos e hiperreactividad de MBP, formas aberrantes y distribución anómala de la proteína. En conclusión, el clorpirifós induce cambios morfológicos y de inmunorreactividad en astrocitos, microglía y mielina madura, compatibles con neurotoxicidad subcrónica. La evidencia experimental sugiere que los anticuerpos anti-GFAP, anti-OX42 y anti-MBP, pueden ser usados como biomarcadores de neurotoxicidad crónica causada por clorpirifós.ABSTRACT. The indiscriminate use of agrochemicals has been associated with neurobehavioral disorders that reflect cognitive and psychomotor dysfunction, even after chronic exposure to low levels. Organophosphate pesticides such as chlorpyrifos oxon could produce chronic neurodegenerative disorders such as Delayed neuropathy induced by organophosphates which are characterized by motor dysfunction, axonal degeneration and demyelination processes. In this study, were evaluated the toxic effects of chlorpyrifos on the neuronal population, astrocytic reactivity, microglial reaction and myelin basic protein after subchronic exposure (4 and 8 weeks) at lower sublethal doses (114 mg / Kg and 228 mcg / kg) in a model of neurotoxicity induced in Wistar rat brain. Weekly doses of chlorpyrifos were administered by gavage and to 8 days after the last treatment the animals were sacrificed and coronal brain sections were obtained from 50 microns. By histochemical and immunohistochemical techniques conventional were characterized morphological changes of astrocytes, microglia and myelin basic protein (MBP) in cortex, hippocampus (CA1), paraventricular area, striatum and internal capsule. According to the obtained results was evident an increase in immunoreactivity and population density of astrocytes and microglial cells with morphological changes, Also hyperreactivity of MBP, aberrant forms and abnormal distribution of the protein. In conclusion, chlorpyrifos induces morphological changes and immunoreactivity in astrocytes, microglia and mature myelin compatible with subchronic neurotoxicity, whereby the anti-GFAP antibody, anti-MBP and anti-OX42, could serve as biomarkers of chronic neurotoxicity caused by this type of organophosphate.INTRODUCCIÓN 16 1. OBJETIVOS 17 1.1. OBJETIVO GENERAL 17 1.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS 17 2. MARCO TEÓRICO 18 2.1. GENERALIDADES DE LOS PLAGUICIDAS 18 2.1.1. Clasificación 18 2.1.1.1. Según el tipo de organismo que se desea controlar 18 2.1.1.2. Según el grupo químico del principio activo 18 2.1.1.3. Según su persistencia en el medio ambiente 18 2.1.1.4. Según su toxicidad aguda (O.M.S.) 18 2.1.2. Epidemiología 19 2.1.3. Efectos secundarios de su aplicación 19 2.2. PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS 20 2.2.1. Mecanismo de acción de los organofosforados 21 2.3. ESTERASA BLANCO DE NEUROPATÍA (NTE) 22 2.4. MIELINA Y PROCESOS DE DESMIELINIZACIÓN 24 2.5. RESPUESTA CELULAR DEL SNC FRENTE AL TÓXICO26 2.5.1. Células astrogliales 26 2.5.1.1. Respuesta de los astrocitos ante la injuria 27 2.5.2. Células microgliales 28 2.5.2.1. Respuesta de la microglía ante la injuria 29 3. MATERIALES Y MÉTODOS 31 3.1. MANEJO Y CUIDADO DE LOS ANIMALES 31 3.2. AGENTE INDUCTOR 31 3.3. ENSAYO PRELIMINAR PARA ESTABLECIMIENTO DE LAS POSOLOGÍAS DEL DISEÑO EXPERIMENTAL 31 3.4. INDUCCIÓN DE NEUROTOXICIDAD POR EXPOSICIÓN SUBCRÓNICA AL CPF 32 3.5. PERFUSIÓN, CRIOPRESERVACIÓN Y CORTES 32 3.6. TÉCNICA HISTOQUÍMICA . 34 3.7. TÉCNICAS INMUNOHISTOQUÍMICAS 34 3.8. ZONAS DE ESTUDIO 35 3.9. REGISTRO FOTOGRÁFICO Y DENSITOMETRIA 35 3.10. ANÁLISIS ESTADISTICO 36 4. RESULTADOS 38 4.1. ENSAYO PRELIMINAR PARA EL ESTABLECIMIENTO DE LAS POSOLOGÍAS 38 4.2. INDUCCIÓN DE NEUROTOXICIDAD SUBCRÓNICA POR CPF 38 4.3. REACTIVIDAD DE LAS CÉLULAS ASTROGLIALES POR EFECTO DEL CPF 39 4.4. CAMBIOS MORFOLÓGICOS DE LOS ASTROCITOS PROTOPLASMICOS EN ZONA CA1 DEL HIPOCAMPO POR EFECTO DEL CPF 42 4.5. CAMBIOS MORFOLÓGICOS DE LOS ASTROCITOS FIBROSOS EN LA ZPV POR EFECTO DEL CPF 45 4.6. EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DEL CPF SOBRE LA POBLACIÓN NEURONAL EN ENCÉFALO 45 4.7. RESPUESTA DE LAS CÉLULAS MICROGLIALES POR EFECTO DEL CPF 47 4.8. INMUNORREACTIVIDAD MICROGLIAL EN SUSTANCIA BLANCA ENCEFÁLICA LUEGO DE LA EXPOSICIÓN A CPF 48 4.9. INMUNOREACTIVIDAD DE MBP EN ANIMALES TRATADOS CON CPF 50 5. DISCUSIÓN 55 5.1. EL CPF NO AFECTA LA GANANCIA DE PESO CORPORAL A DOSIS SUBLETALES Y EXPOSICIÓN SUBCRÓNICA 55 5.2. EL CPF A DOSIS SUBLETALES Y SUBCRÓNICAS NO AFECTA LA POBLACIÓN NEURONAL EN RATAS 55 5.3. EL CPF A DOSIS SUBLETALES Y SUBCRÓNICAS AFECTA LA ACTIVIDAD ASTROCITARIA ENCEFÁLICA EN RATAS 55 5.4. LA HIPERREACTIVIDAD MICROGLIAL DEPENDE DEL TIEMPO DE EXPOSICIÓN A CPF 57 5.5. LA NEUROTOXICIDAD INDUCIDA POR CPF EXACERBA LA INMUNORREACTIVIDAD DE LA PROTEÍNA BASE MIELINA (MBP) 58 5.6. HIPÓTESIS DE LA DESMIELINIZACIÓN INDUCIDA POR EL CPF Y LA IMPLICACIÓN DE LA REACTIVIDAD CELULAR COMO MECANISMO DE REPARACIÓN DEL SNC 59 6. CONCLUSIONES 62 7. RECOMENDACIONES 63 REFERENCIAS 64Sánchez Sánchez, Sandra Mabel. Caracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifós. Ibagué : Universidad del Tolima, 2012. <http://repository.ut.edu.co/handle/001/1247>T 0701 217CD 2833https://repository.ut.edu.co/handle/001/1247spaIbagué : Universidad del Tolima, 2012Facultad de Ciencias, Programa de BiologíaAtribución-NoComercial-CompartirIgual 2.5 Colombia (CC BY-NC-SA 2-5 CO)http://www.creativecommons.org/licenses by-nc/2.5/co/http://purl.org/coar/access_right/c_abf2AgroquímicosClorpirifósNeurotoxicidadActivación microglialRespuesta astrocitariaDesmielinizaciónAgrochemicals,ChlorpyrifosNeurotoxicityMicroglial activationAstrocytic responseDemyelinationCéspedes Rubio, Angel Enrique (Director)PregradoBoólogoCaracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifósTrabajo de grado - PregradoTextinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://purl.org/coar/version/c_71e4c1898caa6e32http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fPublicationORIGINALRIUT-AAA-spa-2012-Caracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifós.pdfRIUT-AAA-spa-2012-Caracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifós.pdfapplication/pdf21482444https://repository.ut.edu.co/bitstreams/014d273d-0dcd-4bdc-a12f-51253f5d28f5/download0403e55767d19ba56a3e4d7380285434MD51RIUT-AAA-Spa-2012-Sánchez Sánchez Sandra Mabel.pdfRIUT-AAA-Spa-2012-Sánchez Sánchez Sandra Mabel.pdfapplication/pdf590731https://repository.ut.edu.co/bitstreams/e48fea67-1407-4884-b841-f27ffa10dce0/download767bd1ba0a3cb8f9ee1bbb7012671868MD56RIUT-AAA-Spa-2012-Sánchez Sánchez Sandra Mabel.pdfRIUT-AAA-Spa-2012-Sánchez Sánchez Sandra Mabel.pdfapplication/pdf590731https://repository.ut.edu.co/bitstreams/e41daea3-d321-4d16-95c0-2902c31e64a8/download767bd1ba0a3cb8f9ee1bbb7012671868MD57CC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-849https://repository.ut.edu.co/bitstreams/36d5e219-3495-4e51-8483-9f14c1d3d5b4/download4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2fMD52license_textlicense_texttext/html; charset=utf-822302https://repository.ut.edu.co/bitstreams/3f7a33fe-8522-4fa2-a57b-81a339f4676b/download1e0094e9d8adcf16b18effef4ce7ed83MD53license_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-823148https://repository.ut.edu.co/bitstreams/468574b1-0dec-4e3c-be5d-366e857b5f79/download9da0b6dfac957114c6a7714714b86306MD54LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8227https://repository.ut.edu.co/bitstreams/c59462b9-c062-486c-a4d8-fe0eef14f4a6/download127f1942dfbe07f43e8227b660620c70MD55TEXTRIUT-AAA-spa-2012-Caracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifós.pdf.txtRIUT-AAA-spa-2012-Caracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifós.pdf.txtExtracted texttext/plain142986https://repository.ut.edu.co/bitstreams/736f01dc-924c-4e98-9ce5-7d9225066c63/downloadb5246982b3e6b917344d8063cb3adcb2MD58RIUT-AAA-Spa-2012-Sánchez Sánchez Sandra Mabel.pdf.txtRIUT-AAA-Spa-2012-Sánchez Sánchez Sandra Mabel.pdf.txtExtracted texttext/plain5https://repository.ut.edu.co/bitstreams/fd8d5c5f-48ec-403c-8843-89f1b4e5a103/downloadff69264abe5942fdc676567147f527a2MD59THUMBNAILRIUT-AAA-spa-2012-Caracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifós.pdf.jpgRIUT-AAA-spa-2012-Caracterización inmunotoxicológica en un modelo murino de neurotoxicidad encefálica inducida por clorpirifós.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg5615https://repository.ut.edu.co/bitstreams/6db39be4-cc3a-4291-8c72-4fbb322ba768/downloade60e842be6584ddb86e2ca04f59c5807MD510RIUT-AAA-Spa-2012-Sánchez Sánchez Sandra Mabel.pdf.jpgRIUT-AAA-Spa-2012-Sánchez Sánchez Sandra Mabel.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg9395https://repository.ut.edu.co/bitstreams/fa57fd41-3bb1-4ebb-81eb-3740ed5331fe/downloaddb9325df5d67f335ea6219ad2c89cadcMD511001/1247oai:repository.ut.edu.co:001/12472023-03-24 17:50:06.743http://www.creativecommons.org/licenses by-nc/2.5/co/Atribución-NoComercial-CompartirIgual 2.5 Colombia (CC BY-NC-SA 2-5 CO)https://repository.ut.edu.coRepositorio Institucional - Universidad del Tolimasoporte@metabiblioteca.comQ3JlYXRpdmUgQ29tbW9ucyAtIExpY2VuY2lhIGRlIFJlY29ub2NpbWllbnRvIC0gTm9Db21lcmNpYWwgKGJ5LW5jKSA6IFNlIHBlcm1pdGUgbGEgZ2VuZXJhY2nDs24gZGUgb2JyYXMgZGVyaXZhZGFzIHNpZW1wcmUgcXVlIG5vIHNlIGhhZ2EgdW4gdXNvIGNvbWVyY2lhbC4gVGFtcG9jbyBzZSBwdWVkZSB1dGlsaXphciBsYSBvYnJhIG9yaWdpbmFsIGNvbiBmaW5hbGlkYWRlcyBjb21lcmNpYWxlcy4= |