Caracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsii

65 Páginas

Autores:
Cupitra Vergara, Nelson Iván
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2014
Institución:
Universidad del Tolima
Repositorio:
RIUT: Repositorio U. Tolima
Idioma:
spa
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
https://repository.ut.edu.co/handle/001/1255
Palabra clave:
Veneno
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Centruroides
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Scorpions
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Phospholipases,
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Scorpionism
Rights
License
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spelling Cupitra Vergara, Nelson Ivánf136504d-39bc-4fb7-9d1c-eb688fe37aea-12014-11-04T20:44:35Z2014-11-04T20:44:35Z2014-0765 PáginasRecurso ElectrónicoEl veneno de escorpión ha despertado la curiosidad del mundo científico principalmente sobre los géneros Centruroides, Isometrus, Ananteris y Tityus de la familia Buthidae, los cuales albergan algunas especies consideradas como un factor de riesgo para la salud humana en países tropicales (escorpionismo). En Colombia uno de los causantes de este tipo de accidentes por su picadura es Centruroides edwardsii, un escorpión disperso a lo largo del valle del rio magdalena, y de cuyo veneno se ha reportado actividad sobre el sistema nervioso y circulatorio, además de ser reportado como el responsable del 24 % de estos accidentes, solo en los departamentos de Antioquia y Tolima; igualmente se debe resaltar la falta de información sobre la composición y los mecanismos de acción de las toxinas que contiene su ponzoña, limitando asi la comprensión de su bioactividad en la busqueda de compuestos bioactivos de importancia farmacéutica. En esta investigación se evaluó el potencial biológico del veneno de 35 escorpiones identificados como Centruroides edwardsii, los cuales fueron capturados en la vereda rincón de chipalo del municipio de Alvarado y mantenidos en cautiverio, al tiempo que se les llevo a cabo la extracción de su veneno por estimulación eléctrica. Se realizó la caracterización peptídica del veneno a través de R-HPLC y PAGE-SDS, encontrando en su mayoría péptidos de bajo peso molecular (+/- 10 kDa); Se evaluó el efecto antibacteriano, proteolítico, y fosfolítico del veneno crudo, de los cuales no se hallaron resultados estadísticamente significativos, a excepción de la prueba de hemolisis indirecta, la cual posiblemente se dio por la acción de fosfolipasas A2 dependientes de Ca+. El resultado global indica que son las fosfolipasas A2 uno de los componentes encargados de actividad biológica en el veneno, posiblemente relacionadas con el daño neurotóxico tanto en la caza de su alimento, como el accidente escorpiónico.ABSTRACT. The scorpion venom has aroused the curiosity of the scientific world mainly on gender Centruroides, Isometrus, and Tityus Ananteris the Buthidae family, which house some species considered as a risk factor for human health in tropical countries (scorpionism). In Colombia one of the causes of such accidents by their sting is Centruroides edwardsii, a scattered along the valley of the Magdalena River scorpion, whose venom and has been reported on the nervous and circulatory system, as well as being reported as responsible for 24% of these accidents, only in the departments of Antioquia and Tolima; also highlighted a lack of information on the composition and the mechanisms of action of toxins contained their venom, thus limiting the understanding of their bioactivity in the search for bioactive compounds of pharmaceutical importance. in this research the biological potential of venom 35 scorpions identified as Centruroides edwardsii, which were captured in the corner sidewalk Chipalo the municipality of Alvarado and kept in captivity, was assessed while I were conducted extracting venom by electrical stimulation. venom peptide characterization was performed using R-HPLC and SDS-PAGE, the peptides found in most low molecular weight (10 kDa +/-); Antibacterial, proteolytic, and crude venom fosfolítico effect, which was evaluated no statistically significant results were found, except for the indirect hemolysis, which may be given by the action of phospholipase A2 dependent Ca +. The overall result indicates that phospholipase A2 is one of the components responsible for biological activity in the venom, possibly related to nerve damage in both hunting their food, as the scorpion accident.INTRODUCCIÓN 13 1. JUSTIFICACIÓN 15 2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 17 3. OBJETIVOS 18 3.1. OBJETIVOS GENERALES 18 3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS 18 4. METODOLOGÍA 19 4.1. ÁREA DE TRABAJO 19 4.2. COLECTA 19 4.3. DETERMINACION TAXONÓMICA 20 4.4. EXTRACCIÓN DE VENENO 21 4.5. CARACTERIZACIÓN DEL VENENO 21 4.5.1. Cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) 21 4.5.2. Electroforesis en gel de poliacrilamida 22 4.6. EVALUACION DEL POTENCIAL BIOLÓGICO 23 4.6.1. Actividad fosfolipasa 23 4.6.2. Actividad proteolítica 23 4.6.3. Actividad hemolítica directa e indirecta 23 4.6.4.Actividad antimicrobiana 23 4.6.5. Análisis estadístico 24 5. MARCO TEÓRICO 25 5.1. LOS ESCORPIONES (ALACRANES) 25 5.2. VENENO 26 5.3. CARACTERIZACIÓN PROTEICA 28 5.3.1. Cromatografía 28 5.3.2. Electroforesis en gel de poliacrilamida 29 5.4. ACTIVIDAD BIOLÓGICA 29 5.4.1. Actividad fofolipasa A2 29 5.4.2. Actividad proteasa 30 5.4.3. Actividad antibacteriana 31 5.4.4. Péptidos antibasterianos 32 5.5. PÉPTIDOS NEUROTÓXICOS 33 5.6. ANTECEDENTES 34 6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 37 6.1. COLECTA Y DETERMINACIÓN TAXONÓMICA 37 6.2. CARACTERIZACIÓN DEL VENENO 41 6.3. ACTIVIDAD DEL POTENCIAL BIOLÓGICO 42 7. CONCLUSIONES 51 RECOMENDACIONES 52 REFERENCIAS 53application/pdfCupitra Vergara, Nelson Iván. Caracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsii (Gervais 1943). Ibagué : Universidad del Tolima, 2014. <http://repository.ut.edu.co/handle/001/1255>T 0701 274CD3666https://repository.ut.edu.co/handle/001/1255spaIbagué : Universidad del Tolima, 2014Facultad de Ciencias, Programa de BiologíaAtribución-NoComercial-CompartirIgual 2.5 Colombia (CC BY-NC-SA 2-5 CO)http://www.creativecommons.org/licenses by-nc/2.5/co/http://purl.org/coar/access_right/c_abf2VenenoEscorpionesCentruroidesFosfolipasasPéptidosPoisonScorpionsCentruroidesPhospholipases,PeptidesScorpionismFacultad de Ciencias, Programa de BiologíaMurillo Arango, Walter (Director)Méndez Arteaga, Jonh Jairo (Codiretor)Estrada Gómez, Sebastián (Codiretor)PregradoBiólogoCaracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsiiTrabajo de grado - PregradoTextinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://purl.org/coar/version/c_71e4c1898caa6e32http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fPublicationORIGINALRIUT-AAA-spa-2014-Caracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsii (Gervais 1943).pdfRIUT-AAA-spa-2014-Caracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsii (Gervais 1943).pdfapplication/pdf2993299https://repository.ut.edu.co/bitstreams/00fe3b40-d443-4591-bbb5-5cdfc6931624/downloaddf63c137e00fe8e3fd07388903692570MD51Autorización Cupitra Vergara, Nelson Ivan.pdfAutorización Cupitra Vergara, Nelson Ivan.pdfapplication/pdf827976https://repository.ut.edu.co/bitstreams/88d6ae60-db69-421a-b2bb-84c0bef58a58/downloadb9af14785c75c8c84558f98dde978a47MD56CC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-849https://repository.ut.edu.co/bitstreams/f939722a-9af5-4416-9abb-687054669ee6/download4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2fMD52license_textlicense_texttext/html; charset=utf-822302https://repository.ut.edu.co/bitstreams/7433a1d4-5e00-4722-9feb-aad12b3cb86f/download1e0094e9d8adcf16b18effef4ce7ed83MD53license_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-823148https://repository.ut.edu.co/bitstreams/5d1570ac-83b7-4c70-b647-b33aaf471909/download9da0b6dfac957114c6a7714714b86306MD54LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8227https://repository.ut.edu.co/bitstreams/fc7e16b4-91fb-4e5d-92bb-2013c14658b6/download127f1942dfbe07f43e8227b660620c70MD55TEXTRIUT-AAA-spa-2014-Caracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsii (Gervais 1943).pdf.txtRIUT-AAA-spa-2014-Caracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsii (Gervais 1943).pdf.txtExtracted texttext/plain91418https://repository.ut.edu.co/bitstreams/81e1226f-fbf0-4911-939d-c6225beab09f/download49d7032f744d639c5691669f701622f2MD57Autorización Cupitra Vergara, Nelson Ivan.pdf.txtAutorización Cupitra Vergara, Nelson Ivan.pdf.txtExtracted texttext/plain9https://repository.ut.edu.co/bitstreams/1b50ed68-0228-4350-b886-f3a996119b82/downloade0e6e5d223c6aa0a948515ad27d6db1cMD58THUMBNAILRIUT-AAA-spa-2014-Caracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsii (Gervais 1943).pdf.jpgRIUT-AAA-spa-2014-Caracterización y evaluación del potencial biológico del veneno de Centruroides edwardsii (Gervais 1943).pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg9112https://repository.ut.edu.co/bitstreams/a09e27d5-4e12-439c-a39f-84b591db8a6b/download29de2dd466ff4691cb982bd99138377aMD59Autorización Cupitra Vergara, Nelson Ivan.pdf.jpgAutorización Cupitra Vergara, Nelson Ivan.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg12891https://repository.ut.edu.co/bitstreams/e6b5e574-a457-4ab6-8143-637aee54a67d/download177c187e9297614a951e2829ebe31c48MD510001/1255oai:repository.ut.edu.co:001/12552023-03-24 17:47:26.466http://www.creativecommons.org/licenses by-nc/2.5/co/Atribución-NoComercial-CompartirIgual 2.5 Colombia (CC BY-NC-SA 2-5 CO)https://repository.ut.edu.coRepositorio Institucional - Universidad del Tolimasoporte@metabiblioteca.comQ3JlYXRpdmUgQ29tbW9ucyAtIExpY2VuY2lhIGRlIFJlY29ub2NpbWllbnRvIC0gTm9Db21lcmNpYWwgKGJ5LW5jKSA6IFNlIHBlcm1pdGUgbGEgZ2VuZXJhY2nDs24gZGUgb2JyYXMgZGVyaXZhZGFzIHNpZW1wcmUgcXVlIG5vIHNlIGhhZ2EgdW4gdXNvIGNvbWVyY2lhbC4gVGFtcG9jbyBzZSBwdWVkZSB1dGlsaXphciBsYSBvYnJhIG9yaWdpbmFsIGNvbiBmaW5hbGlkYWRlcyBjb21lcmNpYWxlcy4=