Expresión de la glutamina sintetasa en pez cebra (Danio rerio) durante el desarrollo embrionario
Las enfermedades del neurodesarrollo son trastornos que afectan la adquisición e implicación de conjuntos de información e interacción social en los individuos que las padecen. El uso de modelos animales como el pez cebra ha sido fundamental para el análisis de diversas enfermedades. Estos modelos o...
- Autores:
-
Medina Ardila, Valentina
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2024
- Institución:
- Universidad de los Andes
- Repositorio:
- Séneca: repositorio Uniandes
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/74895
- Acceso en línea:
- https://hdl.handle.net/1992/74895
- Palabra clave:
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Glutamina Sintetasa
MAP2
Neurodesarrollo
Gliotransmisores
Microbiología
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Las enfermedades del neurodesarrollo son trastornos que afectan la adquisición e implicación de conjuntos de información e interacción social en los individuos que las padecen. El uso de modelos animales como el pez cebra ha sido fundamental para el análisis de diversas enfermedades. Estos modelos ofrecen una oportunidad única para estudiar el neurodesarrollo y enfermedades infecciosas que implican interacciones entre virus y hospedero. Una de las enzimas de gran importancia en las enfermedades del neurodesarrollo es la glutamina sintetasa, la cual desempeña un papel crucial en el desarrollo del sistema nervioso al participar directamente en la transmisión sináptica mediante la liberación de moléculas sinápticamente activas, conocidas como "gliotransmisores" (. Este estudio tuvo como objetivo estandarizar el uso del anticuerpo primario anti Gl Syn (glutamina sintetasa) de Santa Cruz Biotechnology con código #74430, diseñado contra proteínas humanas y con reactividad en ratón, y rata, en pez cebra durante su desarrollo. Para ello, se estableció un protocolo exitoso de inmunofluorescencia en embriones de pez cebra de 22, 31, 36, 48 y 72 hpf tanto completos como en secciones histológicas Se destacaron marcaciones positivas en estructuras cerebrales y musculares en los diferentes estadíos evaluados. Las áreas con mayor expresión de la proteína fueron el rombencéfalo, cerebro medio, retina, vesícula olfatoria, zona ventricular cerebral, miosepto, vena caudal, miotomas adyacentes y mesodermo presomítico. Además, se observó complementariedad con otros marcadores neuronales como MAP2, obteniéndose marcaciones positivas y complementarias entre el marcador de glial y el marcador neuronal. Estos hallazgos facilitan el uso de anticuerpos con reactividad en otras especies en el modelo animal del pez cebra, permitiendo un análisis detallado de la expresión y localización de proteínas específicas y facilitando el estudio de las características del neurodesarrollo tanto en pez cebra (Danio rerio) como en mamíferos. |
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Albarracín, S. L., Baldeón, M. E., Sangronis, E., Cucufate Petruschina, A., & Reyes, F. G. (2016). L-Glutamato: un aminoácido clave para las funciones sensoriales y metabólicas. Archivos latinoamericanos de nutrición, 66(2), 101-112. Bonet, A., & Grau, T. (2007). La glutamina, un aminoácido casi indispensable en el enfermo crítico. Medicina intensiva, 31(7), 402-406. Bricard, Y., Ralliere, C., Lebret, V., Lefevre, F., & Rescan, P. Y. (2014). Early fish myoseptal cells: insights from the trout and relationships with amniote axial tenocytes. Plos one, 9(3), e91876. Calavia, M. G. (2013). La glía de los corpúsculos sensitivos de los mamíferos como base de la mecanotransducción y su potencial neurogénico (Doctoral dissertation, Universidad de Oviedo). Cortés, F. V. (2019). Reflexión sobre la justificación metodológica del uso de animales en investigación biomédica. Revista Colombiana de Bioética, 14(1), 52-68. Centers for Disease Control and Prevention (2015). 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Una de las enzimas de gran importancia en las enfermedades del neurodesarrollo es la glutamina sintetasa, la cual desempeña un papel crucial en el desarrollo del sistema nervioso al participar directamente en la transmisión sináptica mediante la liberación de moléculas sinápticamente activas, conocidas como "gliotransmisores" (. Este estudio tuvo como objetivo estandarizar el uso del anticuerpo primario anti Gl Syn (glutamina sintetasa) de Santa Cruz Biotechnology con código #74430, diseñado contra proteínas humanas y con reactividad en ratón, y rata, en pez cebra durante su desarrollo. Para ello, se estableció un protocolo exitoso de inmunofluorescencia en embriones de pez cebra de 22, 31, 36, 48 y 72 hpf tanto completos como en secciones histológicas Se destacaron marcaciones positivas en estructuras cerebrales y musculares en los diferentes estadíos evaluados. Las áreas con mayor expresión de la proteína fueron el rombencéfalo, cerebro medio, retina, vesícula olfatoria, zona ventricular cerebral, miosepto, vena caudal, miotomas adyacentes y mesodermo presomítico. Además, se observó complementariedad con otros marcadores neuronales como MAP2, obteniéndose marcaciones positivas y complementarias entre el marcador de glial y el marcador neuronal. Estos hallazgos facilitan el uso de anticuerpos con reactividad en otras especies en el modelo animal del pez cebra, permitiendo un análisis detallado de la expresión y localización de proteínas específicas y facilitando el estudio de las características del neurodesarrollo tanto en pez cebra (Danio rerio) como en mamíferos.Neurodevelopmental disorders are conditions that affect the acquisition and processing of information and social interaction in affected individuals. The use of animal models such as zebrafish has been fundamental for analyzing various diseases. These models offer a unique opportunity to study neurodevelopment and infectious diseases that imply virus-host interactions. One of the enzymes of great importance in neurodevelopmental diseases is glutamine synthetase, which plays a crucial role in the development of the nervous system by directly participating in synaptic transmission through the release of synaptically active molecules known as "gliotransmitters". This study was aimed to standardize the primary antibody against Gl Syn (glutamine synthetase) from Santa Cruz Biotechnology with code #74430, designed againts the human protein with reactivity against mouse, and rat, during zebrafish development. For this purpose, a successful immunofluorescence protocol was established in zebrafish embryos at 22, 31, 36, 48, and 72 hpf in whole embryos as well as in histological sections. Remarcable positive reactivity was identified at the different stages evaluated highlighting brain and muscle structures. The areas with the highest protein expression were the rhombencephalon, midbrain, retina, olfactory vesicle, cerebral ventricular zone, myoseptum, caudal vein, adjacent myotomes, and presomitic mesoderm. Additionally, complementarity was observed with other neuronal markers such as MAP2, with positive and complementary markings between the glial marker and the neuronal marker. These findings facilitate the use of antibodies with reactivity in other species in the zebrafish animal model, allowing detailed analysis of the expression and localization of specific proteins and facilitating the study of neurodevelopmental characteristics in both zebrafish (Danio rerio) and mammals.Pregrado45 páginasapplication/pdfspaUniversidad de los AndesMicrobiologíaFacultad de CienciasDepartamento de Ciencias BiológicasAttribution 4.0 Internationalhttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Expresión de la glutamina sintetasa en pez cebra (Danio rerio) durante el desarrollo embrionarioTrabajo de grado - Pregradoinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fTexthttp://purl.org/redcol/resource_type/TPInmunofluorescenciaPez CebraGlutamina SintetasaMAP2NeurodesarrolloGliotransmisoresMicrobiologíaAlbarracín, S. L., Baldeón, M. E., Sangronis, E., Cucufate Petruschina, A., & Reyes, F. G. (2016). L-Glutamato: un aminoácido clave para las funciones sensoriales y metabólicas. Archivos latinoamericanos de nutrición, 66(2), 101-112.Bonet, A., & Grau, T. (2007). La glutamina, un aminoácido casi indispensable en el enfermo crítico. Medicina intensiva, 31(7), 402-406.Bricard, Y., Ralliere, C., Lebret, V., Lefevre, F., & Rescan, P. Y. (2014). Early fish myoseptal cells: insights from the trout and relationships with amniote axial tenocytes. Plos one, 9(3), e91876.Calavia, M. G. (2013). La glía de los corpúsculos sensitivos de los mamíferos como base de la mecanotransducción y su potencial neurogénico (Doctoral dissertation, Universidad de Oviedo).Cortés, F. V. (2019). Reflexión sobre la justificación metodológica del uso de animales en investigación biomédica. Revista Colombiana de Bioética, 14(1), 52-68.Centers for Disease Control and Prevention (2015). Microcefalia y otros defectos congénitos. https://www.cdc.gov/zika/es/healtheffects/birth_defects.html#:~:text=Los%20beb%C3%A9s%20infectados%20con%20zika,tienen%20pueden%20sufrir%20problemas%20ocularesDuque Parra, J. E. (2023). Las células gliales una visión integrativa: Desde los fundamentos histológicos hasta su aplicación clínica. Editorial Universidad de Caldas.Evadney, A., S., J., M., D., ShuklaDeepak, & TiwariVaibhav. (2014). Zebrafish: Modeling for Herpes Simplex Virus Infections. Https://Home.Liebertpub.Com/Zeb, 11(1), 17–25. https://doi.org/10.1089/ZEB.2013.0920Elsalini, O. A., & Rohr, K. B. (2003). Phenylthiourea disrupts thyroid function in developing zebrafish. Development genes and evolution, 212, 593-598.Franco, J. T., & Saavedra, F. (2005). Compartimentación intercelular del acetato en neuronas y astrocitos durante la prelactancia. Universitas Scientiarum, 10, 21-38.Freeman, M. R., & Doherty, J. (2006). Glial cell biology in Drosophila and vertebrates. 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