Identificación inmunohistoquímica de neutrófilos en un modelo de inflamación en pez cebra (Danio rerio)
En los vertebrados una de las respuestas del sistema inmune es la inflamación, esta puede ser observada en modelos animales como el pez cebra, que en los últimos años ha adquirido importancia al poder realizar seguimiento in vivo de la respuesta inflamatoria, esto se ha hecho mediante una lesión de...
- Autores:
-
Hernández Melo, Leidy Dayana
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2019
- Institución:
- Universidad de los Andes
- Repositorio:
- Séneca: repositorio Uniandes
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/45773
- Acceso en línea:
- http://hdl.handle.net/1992/45773
- Palabra clave:
- Peces cebra
Neutrófilos
Inflamación
Biología
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En los vertebrados una de las respuestas del sistema inmune es la inflamación, esta puede ser observada en modelos animales como el pez cebra, que en los últimos años ha adquirido importancia al poder realizar seguimiento in vivo de la respuesta inflamatoria, esto se ha hecho mediante una lesión de aleta caudal en la cual se cuantifica la respuesta inflamatoria por la migración de los neutrófilos a la zona de la lesión, normalmente el seguimiento de esta respuesta se ha hecho mediante procedimientos citoquímicos, en los cuales se utiliza normalmente un tinte llamado Sudan Black, el cual permite teñir lípidos que estén presentes en las células tales como monocitos, eosinófilos y neutrófilos. En este trabajo se busca establecer una medición alterna de la respuesta inflamatoria del pez cebra esto mediante un procedimiento inmunohistoquímico con un anticuerpo anti-mieloperoxidasa (anti-MPO), que es una proteína en la membrana de los neutrófilos y que permitiría el marcaje específico de solo estas células en la lesión. De los resultados cabe resaltar que el anticuerpo funciona en muestras de células blancas humanas, al hacer uso de un anticuerpo secundario para obtener la señal de la mieloperoxidasa, pero que no sirve para el modelo de pez cebra. Adicionalmente se evaluo el efecto antiinflamatorio de la acetona, que es uno de los solventes que normalmente se usan para estudiar el efecto de ciertas sustancias en el pez cebra. En conclusión, el anti-MPO no se puede utilizar en el pez cebra, debido posiblemente a que este anticuerpo monoclonal solo reconoce un epítope específico de la mieloperoxidasa que puede incluir parte de la secuencia que no es conservada entre humanos y pez cebra. |
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En este trabajo se busca establecer una medición alterna de la respuesta inflamatoria del pez cebra esto mediante un procedimiento inmunohistoquímico con un anticuerpo anti-mieloperoxidasa (anti-MPO), que es una proteína en la membrana de los neutrófilos y que permitiría el marcaje específico de solo estas células en la lesión. De los resultados cabe resaltar que el anticuerpo funciona en muestras de células blancas humanas, al hacer uso de un anticuerpo secundario para obtener la señal de la mieloperoxidasa, pero que no sirve para el modelo de pez cebra. Adicionalmente se evaluo el efecto antiinflamatorio de la acetona, que es uno de los solventes que normalmente se usan para estudiar el efecto de ciertas sustancias en el pez cebra. En conclusión, el anti-MPO no se puede utilizar en el pez cebra, debido posiblemente a que este anticuerpo monoclonal solo reconoce un epítope específico de la mieloperoxidasa que puede incluir parte de la secuencia que no es conservada entre humanos y pez cebra.In vertebrates, one of the responses of the immune system is inflammation, this can be observed in animal models such as zebrafish, which in recent years has gained importance in being able to track the inflammatory response in vivo, this has been done through a caudal fin lesion in which the inflammatory response is quantified by the migration of neutrophils to the area of the lesion, usually the follow-up of this response has been done by cytochemical procedures, in which a dye called Sudan Black is normally used , which allows staining lipids that are present in cells such as monocytes, eosinophils and neutrophils. This work seeks to establish an alternate measurement of the inflammatory response of zebrafish by an immunohistochemical procedure with an anti-myeloperoxidase (anti-MPO) antibody, which is a protein in the neutrophil membrane and that would allow specific labeling of Only these cells in the lesion. From the results it should be noted that the antibody works in samples of human white cells, by using a secondary antibody to obtain the myeloperoxidase signal, but that does not work for the zebrafish model. Additionally, the anti-inflammatory effect of acetone was evaluated, which is one of the solvents normally used to study the effect of certain substances on zebrafish. In conclusion, anti-MPO cannot be used in zebrafish, possibly because this monoclonal antibody only recognizes a specific epitope of myeloperoxidase that may include part of the sequence that is not conserved between humans and zebrafish.BiólogoPregrado17 hojasapplication/pdfspaUniversidad de los AndesBiologíaFacultad de CienciasDepartamento de Ciencias Biológicasinstname:Universidad de los Andesreponame:Repositorio Institucional SénecaIdentificación inmunohistoquímica de neutrófilos en un modelo de inflamación en pez cebra (Danio rerio)Trabajo de grado - Pregradoinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Texthttp://purl.org/redcol/resource_type/TPPeces cebraNeutrófilosInflamaciónBiologíaPublicationhttps://scholar.google.es/citations?user=J1xQFB4AAAAJvirtual::7453-10000-0001-5671-7017virtual::7453-1https://scienti.minciencias.gov.co/cvlac/visualizador/generarCurriculoCv.do?cod_rh=0001443145virtual::7453-14033451d-4829-428f-99e0-968786798fcbvirtual::7453-14033451d-4829-428f-99e0-968786798fcbvirtual::7453-1ORIGINALu828054.pdfapplication/pdf807757https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/8b9e390d-fb31-45b4-8a4a-b893efee6610/downloadad4db1fe47b76be7801f11d1d7e3af58MD51THUMBNAILu828054.pdf.jpgu828054.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg23323https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/eaecbc08-dbd8-43af-b0d9-e69b4059a3c9/download62a9d8ec35dc246c2b7b9c31be6df14cMD55TEXTu828054.pdf.txtu828054.pdf.txtExtracted texttext/plain45038https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/ea73d59c-5f7f-4c07-bcd6-eecb147173ae/download1001d3bfad1ae858f6a709fdd296c91eMD541992/45773oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/457732024-03-13 13:26:14.395http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/open.accesshttps://repositorio.uniandes.edu.coRepositorio institucional Sénecaadminrepositorio@uniandes.edu.co |