Design and manufacture of a low-cost microfluidic platform for the synthesis of giant liposomes for the encapsulation and separation of yeasts: Applications for the screening of membrane-active peptides

El descubrimiento de nuevos péptidos con actividad de membrana (MAPs) es un área de considerable interés en la biotecnología moderna, debido su amplia aplicabilidad en varios campos que van desde el desarrollo de nuevos vehículos de administración (a través de péptidos que penetran en las células) h...

Full description

Autores:
Gómez Tinoco, Saúl Camilo
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2021
Institución:
Universidad de los Andes
Repositorio:
Séneca: repositorio Uniandes
Idioma:
eng
OAI Identifier:
oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/55215
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/1992/55215
Palabra clave:
Plataforma microfluídica
Síntesis
Ingeniería
Rights
openAccess
License
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
Description
Summary:El descubrimiento de nuevos péptidos con actividad de membrana (MAPs) es un área de considerable interés en la biotecnología moderna, debido su amplia aplicabilidad en varios campos que van desde el desarrollo de nuevos vehículos de administración (a través de péptidos que penetran en las células) hasta dar respuesta a la amenaza latente de la resistencia a los antibióticos (a través de péptidos antimicrobianos). Teniendo esto en cuenta, se han ideado diferentes estrategias para dicho proceso de descubrimiento. Sin embargo, todas estas resultan ser laboriosas y en gran medida ineficientes, lo que ha llevado al desarrollo de plataformas de cribado de alto desempeño (HTS). Este enfoque resuelve estas limitaciones pero aumenta considerablemente los costos asociados al proceso. En consecuencia, se han propuesto rutas alternativas basadas en la construcción de bibliotecas diseñadas de forma no racional expresadas de forma recombinante en las superficies de las levaduras. Sin embargo, un desafío importante es realizar un HTS robusto de posibles candidatos con actividad de membrana. Por el contrario, el uso de plataformas microfluídicas capaces de llevar a cabo reacciones en nanoescala presenta una alternativa prometedora para identificar nuevos MAPs. Por lo tanto, este proyecto tiene como objetivo desarrollar e implementar una plataforma microfluídica de bajo costo para sintetizar vesículas unilamelares gigantes (GUVs) como entidades que imitan membranas celulares. Además, se busca crear un dispositivo microfluídico para proporcionar un contacto íntimo entre los GUVs sintetizados y unas micropartículas de quitosano funcionalizadas con el péptido Buforina II que sirven como homólogos de levaduras que expresan MAPs. Finalmente, establecer estrategias para aislar potenciales candidatos. Las plataformas microfluídica fueron evaluadas tanto in silico como in vitro demostrando resultados prometedores para el diseño de la librería no racional de MAPs.