Reconocimiento de células humanas CD34+ en las líneas celulares K652, THP-1 y sangre periférica mediante tinción inmunohistoquímica

El cáncer en Países de primer mundo es el responsable de la muerte del 12% de menores de 20 años, entre estos la Leucemia abarca el 30% de las muertes (Pizzo et.al.,2011). Dada su importancia clínica múltiples acercamientos se han utilizado para diagnosticar y clasificar los distintos tipos de neoplasias sanguíneas. En el presente trabajo planteamos el uso de marcadores moleculares de reconocimiento celular como una herramienta eficiente y específica para distintos estudios con Leucemias Agudas. Específicamente se buscó demostrar el uso del marcador CD34 (Cúmulo de diferenciación de células progenitoras del sistema inmune) como una herramienta útil para el reconocimiento de células madre o progenitores hematopoyéticos en humanos, dado que dicha proteína posee un alto interés en el diagnóstico de leucemias agudas (LA) (Fatjova et.al., 2010). Durante este se estandarizó una secuencia sistemática de pasos basada en una amplia revisión bibliográfica y lectura de protocolos (ABCAM, 2017). Sin embargo, cada uno de estos es sometido a variaciones dadas las condiciones experimentales y a los anticuerpos a ser usados. Los pasos y variables críticos de este procedimiento en los cuales se hace especial énfasis son la concentración inicial de muestra, tiempos y temperatura de incubación, tiempos de revelado y contratinción. Variables a las cuales se suman las relativas a la complejidad metodológica de la fijación en para-formaldehído como lo son el tiempo de fijado y el desenmascaramiento de antígenos (Shi et.al.,1997). Dichas variables fueron modificadas y estandarizadas durante el estudio con el fin de aumentar la eficiencia y especificidad del proceso de inmunotinción mediante el estudio en células Thp-1 (Líneas celulares de LMA). La densidad celular de 1 millón de células por mL, las diluciones de anticuerpo primario de 1/50 y de secundario de 1/750 mostraron la tinción más efectiva y específica para el marcador dado. Este proceso se replicó con éxito en células K56

• Autores: Bayona Arévalo, David Alejandro
• Tipo de recurso: Trabajo de grado de pregrado
• Fecha de publicación: 2018
• Institución: Universidad de los Andes
• Repositorio: Séneca: repositorio Uniandes
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/40396
• Acceso en línea: http://hdl.handle.net/1992/40396
• Palabra clave: Leucemia aguda; Inmunohistoquímica; Biología
• Rights: openAccess
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