Electroporación In-Situ: estudios preliminares

Las limitaciones actuales del proceso de bioaugmentación en suelo, han conllevado a la necesidad de implementar nuevas tecnologías que permitan mantener la capacidad de biodegradación en el suelo. Una de estas, corresponde al proceso de modificación genética in situ, la cual requiere de procesos med...

Full description

Autores:
Sotomayor Ahumada, Carlos Andrés
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2017
Institución:
Universidad de los Andes
Repositorio:
Séneca: repositorio Uniandes
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/38844
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/1992/38844
Palabra clave:
Electroporación
Plásmidos
Escherichia coli
Ingeniería
Rights
openAccess
License
https://repositorio.uniandes.edu.co/static/pdf/aceptacion_uso_es.pdf
Description
Summary:Las limitaciones actuales del proceso de bioaugmentación en suelo, han conllevado a la necesidad de implementar nuevas tecnologías que permitan mantener la capacidad de biodegradación en el suelo. Una de estas, corresponde al proceso de modificación genética in situ, la cual requiere de procesos mediante los cuales ADN foráneo se incorpore en células nativas. En el laboratorio, una de las técnicas más comúnmente utilizadas para introducir ADN foráneo en células bacterianas se llama electroformación. Sin embargo, para lograr este método in situ (en la matriz suelo) es necesario utilizar muy altos voltajes para lograr eficiencias de transformación aceptables. En el presente estudio se desarrollan pruebas In-Vitro en medio líquido y en suelo utilizando bajos voltajes, con el fin de lograr la electrotransformación de una cepa de E. Coli con el plásmido pUC19. La eficiencia del proceso se mide por medio de la resistencia a ampicilina que se le confiere una vez el plásmido pUC19 entra en la célula de E. coli. De los ensayos realizados, se logró electroporación en medio líquido a 300 V y con un pulso de 1500 msec. Sin embargo, no se obtuvieron resultados favorables en suelo