Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos

Los liposomas han demostrado ser una alternativa eficaz como herramienta de entrega a tejidos o células específicas en los organismos. La carga parece ser un factor importante para diseñar estos nano fármacos, y en el caso de las células de cerebro como los astrocitos, la carga negativa parece ser p...

Full description

Autores:
Bustamante Guzmán, Nathalia Carolina
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2022
Institución:
Universidad de los Andes
Repositorio:
Séneca: repositorio Uniandes
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/59392
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/1992/59392
Palabra clave:
Liposomas, astrocitos, carga negativa, ensayo de captación, citometría de flujo, microscopia, farmacéuticos
Microbiología
Rights
openAccess
License
Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional
id UNIANDES2_022747c0371f84dd108732d704aa665c
oai_identifier_str oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/59392
network_acronym_str UNIANDES2
network_name_str Séneca: repositorio Uniandes
repository_id_str
dc.title.none.fl_str_mv Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos
title Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos
spellingShingle Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos
Liposomas, astrocitos, carga negativa, ensayo de captación, citometría de flujo, microscopia, farmacéuticos
Microbiología
title_short Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos
title_full Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos
title_fullStr Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos
title_full_unstemmed Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos
title_sort Ensayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanos
dc.creator.fl_str_mv Bustamante Guzmán, Nathalia Carolina
dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv Leidy, Chad
dc.contributor.author.none.fl_str_mv Bustamante Guzmán, Nathalia Carolina
dc.contributor.researchgroup.es_CO.fl_str_mv Laboratorio de biofísica
dc.subject.keyword.none.fl_str_mv Liposomas, astrocitos, carga negativa, ensayo de captación, citometría de flujo, microscopia, farmacéuticos
topic Liposomas, astrocitos, carga negativa, ensayo de captación, citometría de flujo, microscopia, farmacéuticos
Microbiología
dc.subject.themes.es_CO.fl_str_mv Microbiología
description Los liposomas han demostrado ser una alternativa eficaz como herramienta de entrega a tejidos o células específicas en los organismos. La carga parece ser un factor importante para diseñar estos nano fármacos, y en el caso de las células de cerebro como los astrocitos, la carga negativa parece ser particularmente importante y en especial la que aportan los lípidos conocidos como cerebrósidos sulfatados (CBS), pero aún se desconocen con exactitud cuál es la ruta por la cual las células ingresan estos lípidos en su interior, si es por una vía mediada por receptores o si por endocitosis. En este trabajo intentamos probar si la carga negativa superficial de los liposomas es el factor más importante para su captación o si, por el contrario, la es la estructura de los CBS favorecida por alguna ruta mediada por receptores o si es por endocitosis. Para ello se elaboraron liposomas con el lípido CBS y el lípido POPG de origen bacteriano que aporta carga negativa, para cada lípido se diseñaron 3 liposomas con diferente carga. Los ensayos de captación se realizaron con una línea celular de astrocitos humanos, y posteriormente se realizó la lectura de la captación con un citómetro de flujo y microscopia fluorescente. Encontramos que las células de astrocitoma prefieren los liposomas con carga negativa, pero la captación aumenta cuando los liposomas tienen en su composición CBS, sugiriendo el estudio de una ruta alterna para el ingreso de estas moléculas.
publishDate 2022
dc.date.accessioned.none.fl_str_mv 2022-07-29T22:00:22Z
dc.date.available.none.fl_str_mv 2022-07-29T22:00:22Z
dc.date.issued.none.fl_str_mv 2022-07-28
dc.type.none.fl_str_mv Trabajo de grado - Pregrado
dc.type.driver.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
dc.type.version.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
dc.type.coar.none.fl_str_mv http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.content.es_CO.fl_str_mv Text
dc.type.redcol.none.fl_str_mv http://purl.org/redcol/resource_type/TP
format http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
status_str acceptedVersion
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv http://hdl.handle.net/1992/59392
dc.identifier.instname.none.fl_str_mv instname:Universidad de los Andes
dc.identifier.reponame.none.fl_str_mv reponame:Repositorio Institucional Séneca
dc.identifier.repourl.none.fl_str_mv repourl:https://repositorio.uniandes.edu.co/
url http://hdl.handle.net/1992/59392
identifier_str_mv instname:Universidad de los Andes
reponame:Repositorio Institucional Séneca
repourl:https://repositorio.uniandes.edu.co/
dc.language.iso.es_CO.fl_str_mv spa
language spa
dc.relation.references.es_CO.fl_str_mv N. T. Huynh, C. Passirani, P. Saulnier, and J. P. Benoit, Lipid nanocapsules: a new platform for nanomedicine., International journal of pharmaceutics, vol. 379, no. 2, pp. 201-9, Sep. 2009.
R. Baskar, K. A. Lee, R. Yeo, and W. Yeoh, Cancer and radiation therapy: current advances and future directions., International journal of medical sciences, vol. 9, no. 3, pp. 193-9, Jan. 2012.
V. P. Torchilin, Multifunctional nanocarriers., Advanced drug delivery reviews, vol. 58, no. 14, pp. 1532-55, Dec. 2006.
M. Wang and M. Thanou, Targeting nanoparticles to cancer., Pharmacological research: the official journal of the Italian Pharmacological Society, vol. 62, no. 2, pp. 90-9, Ago. 2010.
W. Downhan, Molecular basis for membrane phospholipid diversity: why are there so many lipids: Annual Review of Biochemistry, vol 66, pp.199-232, Jul 1997.
M. V. Sofroniew and H. V. Vinters, Astrocytes: biology and pathology: Acta Neuropathologica, vol 119:7-35, Nov 2010.
Xiao, K., Li, Y., Luo, J., Lee, J. S., Xiao, W., Gonik, A. M., Agarwal, R. G., et al.,"The effect of surface charge on in vivo biodistribution of PEG-oligocholic acid based micellar nanoparticles": Biomaterials, vol 32, no. 13, pp.343-546. 4, Feb. 2011.
B. A. Barres, The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease: Neuron, vol 60:430-440, Nov 2008.
E. Suesca, J. L. Alejo, N. Bolaños, J. Ocampo, C. Leidy, J. M. Gonzalez, Sulfocerebrosides Upregulate Liposome Uptake in Human Astrocytes Without Inducing a Proinflammatory Response, Cytometry, vol 83A:627-635, May 2013.
T.A. Watkins,B. Emery, S. Mulinyawe and B.A. Barres, Distinct stages of myelination regulated by gamma-secretase and astrocytes in a rapidly myelinating CNS coculture system: Neuron, vol 60:555-569, Sep 2008.
J. De Keyser, J. P. Mostert, M. W. Koch, Dysfunctional astrocytes as key players in the pathogenesis of central nervous system disorders: Journal of Neurological Science, vol 267:316, Abr 2008.
X. Kai, J. Luo, W. L. Fowler, Y. Li, J. S. Lee, L. Xing e, R. H. Cheng, L. Wang and K. S. Lam, A self-assembling nanoparticle for paclitaxel delivery in ovarian cancer: Biomaterial, vol 30:60006-6016, Jul 2009
M.E. Davis, Z.G. Chen and D.M. Shin, Nanoparticle therapeutics: an emerging treatment modality for cancer: Nature Reviews: Drug Discovery, vol 7:771-782, Sep 2008.
J.S. Brien and E.L. Sampson, Lipid composition of the normal human brain: Journal of Lipid Research, vol 6:537-44, Oct 1965.
J.S. OBrien and E.L. Sampson, Lipid composition of the normal human brain: Journal of Lipid Research, vol 6:537-44, Oct 1965.
H. Ozgen, W. Baron, D. Hoekstra and N. Kahya, Oligodendroglial membrane dynamics in relation to myelin biogenesis: Cellular and Molecular life sciences, 73:3291-3310, May 2016
dc.rights.license.spa.fl_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional
dc.rights.uri.*.fl_str_mv http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
dc.rights.accessrights.spa.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.coar.spa.fl_str_mv http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
rights_invalid_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.mimetype.es_CO.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidad de los Andes
dc.publisher.program.es_CO.fl_str_mv Microbiología
dc.publisher.faculty.es_CO.fl_str_mv Facultad de Ciencias
dc.publisher.department.es_CO.fl_str_mv Departamento de Ciencias Biológicas
publisher.none.fl_str_mv Universidad de los Andes
institution Universidad de los Andes
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/9a0138f4-043c-4b39-9d7e-a3434a1c229b/download
https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/9b485351-6bdf-4187-8b5b-71c9ad576728/download
https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/439f2cee-b1d4-445d-b8c9-1a468a28f84e/download
https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/667226d2-1b3f-4496-bb7f-26fc775f61ca/download
https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/28031d7e-0368-41a5-a090-966b6646599f/download
bitstream.checksum.fl_str_mv 51ad9a4cf9d564170edf1c9c3fb5d0a9
aa70074c70afddd2d1a30c9762138a62
46114a4cab2459a8a5b374c44e352db5
5aa5c691a1ffe97abd12c2966efcb8d6
2bf4dbdca8ad3d0f5980e7eb85d709a7
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositorio institucional Séneca
repository.mail.fl_str_mv adminrepositorio@uniandes.edu.co
_version_ 1808390424355667968
spelling Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Leidy, Chadvirtual::13546-1Bustamante Guzmán, Nathalia Carolinac3ca928c-6ebc-403b-9ee5-43b7cf95e944600Laboratorio de biofísica2022-07-29T22:00:22Z2022-07-29T22:00:22Z2022-07-28http://hdl.handle.net/1992/59392instname:Universidad de los Andesreponame:Repositorio Institucional Sénecarepourl:https://repositorio.uniandes.edu.co/Los liposomas han demostrado ser una alternativa eficaz como herramienta de entrega a tejidos o células específicas en los organismos. La carga parece ser un factor importante para diseñar estos nano fármacos, y en el caso de las células de cerebro como los astrocitos, la carga negativa parece ser particularmente importante y en especial la que aportan los lípidos conocidos como cerebrósidos sulfatados (CBS), pero aún se desconocen con exactitud cuál es la ruta por la cual las células ingresan estos lípidos en su interior, si es por una vía mediada por receptores o si por endocitosis. En este trabajo intentamos probar si la carga negativa superficial de los liposomas es el factor más importante para su captación o si, por el contrario, la es la estructura de los CBS favorecida por alguna ruta mediada por receptores o si es por endocitosis. Para ello se elaboraron liposomas con el lípido CBS y el lípido POPG de origen bacteriano que aporta carga negativa, para cada lípido se diseñaron 3 liposomas con diferente carga. Los ensayos de captación se realizaron con una línea celular de astrocitos humanos, y posteriormente se realizó la lectura de la captación con un citómetro de flujo y microscopia fluorescente. Encontramos que las células de astrocitoma prefieren los liposomas con carga negativa, pero la captación aumenta cuando los liposomas tienen en su composición CBS, sugiriendo el estudio de una ruta alterna para el ingreso de estas moléculas.MicrobiólogoPregradoapplication/pdfspaUniversidad de los AndesMicrobiologíaFacultad de CienciasDepartamento de Ciencias BiológicasEnsayo de captación de liposomas con carga negativa superficial: Una alternativa mediada por astrocitos humanosTrabajo de grado - Pregradoinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fTexthttp://purl.org/redcol/resource_type/TPLiposomas, astrocitos, carga negativa, ensayo de captación, citometría de flujo, microscopia, farmacéuticosMicrobiologíaN. T. Huynh, C. Passirani, P. Saulnier, and J. P. Benoit, Lipid nanocapsules: a new platform for nanomedicine., International journal of pharmaceutics, vol. 379, no. 2, pp. 201-9, Sep. 2009.R. Baskar, K. A. Lee, R. Yeo, and W. Yeoh, Cancer and radiation therapy: current advances and future directions., International journal of medical sciences, vol. 9, no. 3, pp. 193-9, Jan. 2012.V. P. Torchilin, Multifunctional nanocarriers., Advanced drug delivery reviews, vol. 58, no. 14, pp. 1532-55, Dec. 2006.M. Wang and M. Thanou, Targeting nanoparticles to cancer., Pharmacological research: the official journal of the Italian Pharmacological Society, vol. 62, no. 2, pp. 90-9, Ago. 2010.W. Downhan, Molecular basis for membrane phospholipid diversity: why are there so many lipids: Annual Review of Biochemistry, vol 66, pp.199-232, Jul 1997.M. V. Sofroniew and H. V. Vinters, Astrocytes: biology and pathology: Acta Neuropathologica, vol 119:7-35, Nov 2010.Xiao, K., Li, Y., Luo, J., Lee, J. S., Xiao, W., Gonik, A. M., Agarwal, R. G., et al.,"The effect of surface charge on in vivo biodistribution of PEG-oligocholic acid based micellar nanoparticles": Biomaterials, vol 32, no. 13, pp.343-546. 4, Feb. 2011.B. A. Barres, The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease: Neuron, vol 60:430-440, Nov 2008.E. Suesca, J. L. Alejo, N. Bolaños, J. Ocampo, C. Leidy, J. M. Gonzalez, Sulfocerebrosides Upregulate Liposome Uptake in Human Astrocytes Without Inducing a Proinflammatory Response, Cytometry, vol 83A:627-635, May 2013.T.A. Watkins,B. Emery, S. Mulinyawe and B.A. Barres, Distinct stages of myelination regulated by gamma-secretase and astrocytes in a rapidly myelinating CNS coculture system: Neuron, vol 60:555-569, Sep 2008.J. De Keyser, J. P. Mostert, M. W. Koch, Dysfunctional astrocytes as key players in the pathogenesis of central nervous system disorders: Journal of Neurological Science, vol 267:316, Abr 2008.X. Kai, J. Luo, W. L. Fowler, Y. Li, J. S. Lee, L. Xing e, R. H. Cheng, L. Wang and K. S. Lam, A self-assembling nanoparticle for paclitaxel delivery in ovarian cancer: Biomaterial, vol 30:60006-6016, Jul 2009M.E. Davis, Z.G. Chen and D.M. Shin, Nanoparticle therapeutics: an emerging treatment modality for cancer: Nature Reviews: Drug Discovery, vol 7:771-782, Sep 2008.J.S. Brien and E.L. Sampson, Lipid composition of the normal human brain: Journal of Lipid Research, vol 6:537-44, Oct 1965.J.S. OBrien and E.L. Sampson, Lipid composition of the normal human brain: Journal of Lipid Research, vol 6:537-44, Oct 1965.H. Ozgen, W. Baron, D. Hoekstra and N. Kahya, Oligodendroglial membrane dynamics in relation to myelin biogenesis: Cellular and Molecular life sciences, 73:3291-3310, May 2016200811733Publication29f524d9-be84-4fc7-b365-48c816849b2dvirtual::13546-129f524d9-be84-4fc7-b365-48c816849b2dvirtual::13546-1https://scienti.minciencias.gov.co/cvlac/visualizador/generarCurriculoCv.do?cod_rh=0000674044virtual::13546-1TEXT200811733.pdf.txt200811733.pdf.txtExtracted texttext/plain25791https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/9a0138f4-043c-4b39-9d7e-a3434a1c229b/download51ad9a4cf9d564170edf1c9c3fb5d0a9MD56ORIGINAL200811733.pdf200811733.pdfapplication/pdf687430https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/9b485351-6bdf-4187-8b5b-71c9ad576728/downloadaa70074c70afddd2d1a30c9762138a62MD54200811733.pdf200811733.pdfHIDEapplication/pdf162315https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/439f2cee-b1d4-445d-b8c9-1a468a28f84e/download46114a4cab2459a8a5b374c44e352db5MD55LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81810https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/667226d2-1b3f-4496-bb7f-26fc775f61ca/download5aa5c691a1ffe97abd12c2966efcb8d6MD53THUMBNAIL200811733.pdf.jpg200811733.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg5980https://repositorio.uniandes.edu.co/bitstreams/28031d7e-0368-41a5-a090-966b6646599f/download2bf4dbdca8ad3d0f5980e7eb85d709a7MD571992/59392oai:repositorio.uniandes.edu.co:1992/593922024-03-13 14:57:52.716http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/restrictedhttps://repositorio.uniandes.edu.coRepositorio institucional Sénecaadminrepositorio@uniandes.edu.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