Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2

La incidencia mundial de trastornos óseos ha aumentado en los últimos años. y los injertos óseos son el tratamiento más frecuente, a pesar de sus complicaciones (rechazo, transmisión de enfermedades, disponibilidad limitada y morbilidad). La ingeniería de tejidos pretende desarrollar sustitutos biol...

Full description

Autores:
Delgado Parra, Julián David
Hernández Garcés, Daniel
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2021
Institución:
Universidad El Bosque
Repositorio:
Repositorio U. El Bosque
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unbosque.edu.co:20.500.12495/6533
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/20.500.12495/6533
Palabra clave:
BMP2
Ácido fólico
Osteogénesis
RUNX2
OSX
OCN
Pulpa dental
Células madre
Tejido óseo
BMP2
Folic Acid
Osteogenesis
RUNX2
OSX
OCN
WU400
Rights
openAccess
License
Atribución-CompartirIgual 4.0 Internacional
id UNBOSQUE2_df1e84adb7ac3a1f33a9b99c6da5e002
oai_identifier_str oai:repositorio.unbosque.edu.co:20.500.12495/6533
network_acronym_str UNBOSQUE2
network_name_str Repositorio U. El Bosque
repository_id_str
dc.title.spa.fl_str_mv Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
dc.title.translated.spa.fl_str_mv Expression of osteogenic differentiation markers in dental pulp mesenchymal cells treated with folic acid and BMP2
title Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
spellingShingle Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
BMP2
Ácido fólico
Osteogénesis
RUNX2
OSX
OCN
Pulpa dental
Células madre
Tejido óseo
BMP2
Folic Acid
Osteogenesis
RUNX2
OSX
OCN
WU400
title_short Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
title_full Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
title_fullStr Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
title_full_unstemmed Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
title_sort Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
dc.creator.fl_str_mv Delgado Parra, Julián David
Hernández Garcés, Daniel
dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv Bendahan Álvarez, Zita Carolina
Escobar Márquez, Lina María
Mora Díaz, Ingrid Isabel
Castellanos Parra, Jaime Eduardo
dc.contributor.author.none.fl_str_mv Delgado Parra, Julián David
Hernández Garcés, Daniel
dc.subject.spa.fl_str_mv BMP2
Ácido fólico
Osteogénesis
RUNX2
OSX
OCN
topic BMP2
Ácido fólico
Osteogénesis
RUNX2
OSX
OCN
Pulpa dental
Células madre
Tejido óseo
BMP2
Folic Acid
Osteogenesis
RUNX2
OSX
OCN
WU400
dc.subject.decs.spa.fl_str_mv Pulpa dental
Células madre
Tejido óseo
dc.subject.keywords.spa.fl_str_mv BMP2
Folic Acid
Osteogenesis
RUNX2
OSX
OCN
dc.subject.nlm.none.fl_str_mv WU400
description La incidencia mundial de trastornos óseos ha aumentado en los últimos años. y los injertos óseos son el tratamiento más frecuente, a pesar de sus complicaciones (rechazo, transmisión de enfermedades, disponibilidad limitada y morbilidad). La ingeniería de tejidos pretende desarrollar sustitutos biológicos que restablezcan la función de los tejidos alterados. Aunque la proteína morfogenética ósea (BMP2) y el ácido fólico (FA) son factores importantes para la formación y regeneración ósea, su efecto sobre las células mesenquimales (MSC) sigue siendo controvertido. Objetivo: Determinar la expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células madre de la pulpa dental humana (hDPSC) tratadas con FA y BMP2. Métodos: Las hDPSC aisladas y caracterizadas se trataron con dos concentraciones diferentes de FA y BMP2 para evaluar cambios fenotípicos mediante microscopía invertida, tasa de proliferación, mediante ensayo de resazurina, cambios en el ciclo celular mediante tinción con 7AAD y marcadores de diferenciación osteogénica: osterix (OSX), osteocalcina (OCN) y RUNX2 por PCR en tiempo real. Las variables cuantitativas se analizaron con las pruebas t de Student o ANOVA. Resultados: Las células tratadas con 1,6mM y 0,8mM de FA se observaron más alargadas y menos confluentes que las no tratadas (control), se observó una reducción en la proliferación en las células tratadas con FA, sin alterar el contenido de ADN ni el ciclo celular. BMP2 (50-100ng/ml) no generó cambios morfológicos, pero aumentó la proliferación celular 8,4%-6,4% y estimuló significativamente la expresión de RUNX2 y OSX en comparación con FA. Conclusiones: FA indujo cambios morfológicos y reducción en la proliferación de hDPSC, en contraste con BMP2, que indujo un aumento en el número de células. FA 0,8mM y BMP2 50ng/ml promovieron la diferenciación de hDPCs hacia el linaje osteoblástico, verificado con la expresión de: OSX, OCN, RUNX2. FA podría promover la formación de hueso, pero se necesitan más estudios para comprobar su efecto.
publishDate 2021
dc.date.issued.none.fl_str_mv 2021-08-12
dc.date.accessioned.none.fl_str_mv 2022-01-20T20:35:10Z
dc.date.available.none.fl_str_mv 2022-01-20T20:35:10Z
dc.type.local.spa.fl_str_mv Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Especialización
dc.type.hasversion.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
dc.type.coar.none.fl_str_mv http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.driver.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
format http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
status_str acceptedVersion
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv http://hdl.handle.net/20.500.12495/6533
dc.identifier.instname.spa.fl_str_mv instname:Universidad El Bosque
dc.identifier.reponame.spa.fl_str_mv reponame:Repositorio Institucional Universidad El Bosque
dc.identifier.repourl.none.fl_str_mv repourl:https://repositorio.unbosque.edu.co
url http://hdl.handle.net/20.500.12495/6533
identifier_str_mv instname:Universidad El Bosque
reponame:Repositorio Institucional Universidad El Bosque
repourl:https://repositorio.unbosque.edu.co
dc.language.iso.none.fl_str_mv spa
language spa
dc.rights.*.fl_str_mv Atribución-CompartirIgual 4.0 Internacional
dc.rights.uri.*.fl_str_mv http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/
dc.rights.local.spa.fl_str_mv Acceso abierto
dc.rights.accessrights.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
rights_invalid_str_mv Atribución-CompartirIgual 4.0 Internacional
http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/
Acceso abierto
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.mimetype.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.program.spa.fl_str_mv Especialización en Ortodoncia
dc.publisher.grantor.spa.fl_str_mv Universidad El Bosque
dc.publisher.faculty.spa.fl_str_mv Facultad de Odontología
institution Universidad El Bosque
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/39117be1-067b-4c73-8a13-ae74ca3d5c4d/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/71014735-6ade-47ff-a26c-613faac00bca/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/2db124ca-5f3d-42ca-a55a-db1125c14181/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/41a8fda0-c0e6-4cd3-a88b-78c3a9d8f464/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/fdd4917f-e281-4303-a614-8fe133785b06/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/6a91a581-05ab-43f3-9992-82f10b1aeb35/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/d9a71d0e-9a4d-4719-a0ea-4012b6ab97ee/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/a1d9ce5f-5d14-4120-a914-876f3a981e7c/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/6bdadb0b-301f-43be-ac7f-93148254f2a1/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/5301828c-0971-4c8b-8d7c-c7c8a718c114/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/cfb510e4-bc67-4548-b1ea-bbc9605cc035/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/5e4f0591-e372-44df-898e-29a89abe40e8/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/d2b94334-7a23-4411-b8ca-f4dbb2c5a0b5/download
https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/9a0b9b7b-da72-47a1-adcb-5d7a8a72ad31/download
bitstream.checksum.fl_str_mv c3e16eaa50cdc36de0b717af294cff98
7480bda165b4d5cc919c822988c4ddbc
aff60ad9e203ce15e44f63022a6146ac
ba60049d7ef208f2cb415f61ac3e280c
84a900c9dd4b2a10095a94649e1ce116
8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33
ca31b54477a68997beabda69412f8b2f
9498bab38f8ffad64bb4da2dcf7a991a
088f463fe9137cef83e87b5ef564de71
2c28f85f7e6f4c6f57d3fca29df94a94
72360bc13d63f1a4f7af21fdd40835fc
a2f3abda6cd22e3a896f3e397f9acb82
651fd034cfbbc141f309f020789f9915
d080045242130a9587080c37525d331f
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositorio Institucional Universidad El Bosque
repository.mail.fl_str_mv bibliotecas@biteca.com
_version_ 1814100716323602432
spelling Bendahan Álvarez, Zita CarolinaEscobar Márquez, Lina MaríaMora Díaz, Ingrid IsabelCastellanos Parra, Jaime EduardoDelgado Parra, Julián DavidHernández Garcés, Daniel2022-01-20T20:35:10Z2022-01-20T20:35:10Z2021-08-12http://hdl.handle.net/20.500.12495/6533instname:Universidad El Bosquereponame:Repositorio Institucional Universidad El Bosquerepourl:https://repositorio.unbosque.edu.coLa incidencia mundial de trastornos óseos ha aumentado en los últimos años. y los injertos óseos son el tratamiento más frecuente, a pesar de sus complicaciones (rechazo, transmisión de enfermedades, disponibilidad limitada y morbilidad). La ingeniería de tejidos pretende desarrollar sustitutos biológicos que restablezcan la función de los tejidos alterados. Aunque la proteína morfogenética ósea (BMP2) y el ácido fólico (FA) son factores importantes para la formación y regeneración ósea, su efecto sobre las células mesenquimales (MSC) sigue siendo controvertido. Objetivo: Determinar la expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células madre de la pulpa dental humana (hDPSC) tratadas con FA y BMP2. Métodos: Las hDPSC aisladas y caracterizadas se trataron con dos concentraciones diferentes de FA y BMP2 para evaluar cambios fenotípicos mediante microscopía invertida, tasa de proliferación, mediante ensayo de resazurina, cambios en el ciclo celular mediante tinción con 7AAD y marcadores de diferenciación osteogénica: osterix (OSX), osteocalcina (OCN) y RUNX2 por PCR en tiempo real. Las variables cuantitativas se analizaron con las pruebas t de Student o ANOVA. Resultados: Las células tratadas con 1,6mM y 0,8mM de FA se observaron más alargadas y menos confluentes que las no tratadas (control), se observó una reducción en la proliferación en las células tratadas con FA, sin alterar el contenido de ADN ni el ciclo celular. BMP2 (50-100ng/ml) no generó cambios morfológicos, pero aumentó la proliferación celular 8,4%-6,4% y estimuló significativamente la expresión de RUNX2 y OSX en comparación con FA. Conclusiones: FA indujo cambios morfológicos y reducción en la proliferación de hDPSC, en contraste con BMP2, que indujo un aumento en el número de células. FA 0,8mM y BMP2 50ng/ml promovieron la diferenciación de hDPCs hacia el linaje osteoblástico, verificado con la expresión de: OSX, OCN, RUNX2. FA podría promover la formación de hueso, pero se necesitan más estudios para comprobar su efecto.Especialista en OrtodonciaEspecializaciónBone complications have increased worldwide and grafts are the most common treatment despite its complications (rejection, disease transmission, limited availability and morbidity). Tissue engineering aims to develop biological substitutes for altered tissues. Osseous morphogen protein (BMP2) and folic acid (FA) are important factors for regeneration but their effect on mesenchymal cells (MSC) is still controversial. Objective: to determine the expression of osteogenic differentiation markers on human dental pulp stem cells (hDPSC) treated with FA and BMP2. Methods: Isolated and characterised hDPSC were treated with two different concentrations of FA and BMP2 in order to evaluate phenotypical changes with inverted microscopy; proliferation rate with resazurin; cellular cycle change with 7AAD tinction and osteogenic differentiation markers: osterix (OSX), osteocalcin (OCN) and RUNX2 with PCR real time. Quantitative variables were analysed with Student’s t-test or ANOVA. Results: Cells treated with 1.6 mM and 0.8 mM of FA were enlarged and less confluent than those not treated (control). Cells treated with FA without alteration of the DNA or cellular cycle showed a reduction of proliferation. BMP2 (50 ng/ml to 100 ng/ml) did not generate morphological changes but increased cellular proliferation 8.4% to 6.4% and significantly stimulated the expression of RUNX2 and OSX compared to FA. Conclusions: FA induced morphological changes and reduction of proliferations with BMP2, which increased cell count. FA 0.8 mM and BMP2 50 ng/ml stimulated differentiation of hDPCs towards osteoblast lineage, verified with the expression of OSX, OCN and RUNX2. FA could promote the formation of bone; however, further studies are required for confirmation.application/pdfspaAtribución-CompartirIgual 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/Acceso abiertoinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2BMP2Ácido fólicoOsteogénesisRUNX2OSXOCNPulpa dentalCélulas madreTejido óseoBMP2Folic AcidOsteogenesisRUNX2OSXOCNWU400Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2Expression of osteogenic differentiation markers in dental pulp mesenchymal cells treated with folic acid and BMP2Especialización en OrtodonciaUniversidad El BosqueFacultad de OdontologíaTesis/Trabajo de grado - Monografía - Especializacióninfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisORIGINALDelgado_Parra_Julián_David_2021.pdfDelgado_Parra_Julián_David_2021.pdfapplication/pdf1291692https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/39117be1-067b-4c73-8a13-ae74ca3d5c4d/downloadc3e16eaa50cdc36de0b717af294cff98MD51Delgado_Parra_Julián_David_2021_Anexos.pdfDelgado_Parra_Julián_David_2021_Anexos.pdfapplication/pdf740326https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/71014735-6ade-47ff-a26c-613faac00bca/download7480bda165b4d5cc919c822988c4ddbcMD52Delgado_Parra_Julián_David_2021_Formato_de_entrega.pdfDelgado_Parra_Julián_David_2021_Formato_de_entrega.pdfapplication/pdf307363https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/2db124ca-5f3d-42ca-a55a-db1125c14181/downloadaff60ad9e203ce15e44f63022a6146acMD53Delgado_Parra_Julián_David_2021_Probatus.pdfDelgado_Parra_Julián_David_2021_Probatus.pdfapplication/pdf217268https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/41a8fda0-c0e6-4cd3-a88b-78c3a9d8f464/downloadba60049d7ef208f2cb415f61ac3e280cMD54CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-81025https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/fdd4917f-e281-4303-a614-8fe133785b06/download84a900c9dd4b2a10095a94649e1ce116MD55LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/6a91a581-05ab-43f3-9992-82f10b1aeb35/download8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD56THUMBNAILDelgado_Parra_Julián_David_2021.pdf.jpgDelgado_Parra_Julián_David_2021.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg4281https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/d9a71d0e-9a4d-4719-a0ea-4012b6ab97ee/downloadca31b54477a68997beabda69412f8b2fMD57Delgado_Parra_Julián_David_2021_Anexos.pdf.jpgDelgado_Parra_Julián_David_2021_Anexos.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg5411https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/a1d9ce5f-5d14-4120-a914-876f3a981e7c/download9498bab38f8ffad64bb4da2dcf7a991aMD58Delgado_Parra_Julián_David_2021_Formato_de_entrega.pdf.jpgDelgado_Parra_Julián_David_2021_Formato_de_entrega.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg9291https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/6bdadb0b-301f-43be-ac7f-93148254f2a1/download088f463fe9137cef83e87b5ef564de71MD59Delgado_Parra_Julián_David_2021_Probatus.pdf.jpgDelgado_Parra_Julián_David_2021_Probatus.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg7083https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/5301828c-0971-4c8b-8d7c-c7c8a718c114/download2c28f85f7e6f4c6f57d3fca29df94a94MD510TEXTDelgado_Parra_Julián_David_2021.pdf.txtDelgado_Parra_Julián_David_2021.pdf.txtExtracted texttext/plain92933https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/cfb510e4-bc67-4548-b1ea-bbc9605cc035/download72360bc13d63f1a4f7af21fdd40835fcMD511Delgado_Parra_Julián_David_2021_Anexos.pdf.txtDelgado_Parra_Julián_David_2021_Anexos.pdf.txtExtracted texttext/plain163https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/5e4f0591-e372-44df-898e-29a89abe40e8/downloada2f3abda6cd22e3a896f3e397f9acb82MD512Delgado_Parra_Julián_David_2021_Formato_de_entrega.pdf.txtDelgado_Parra_Julián_David_2021_Formato_de_entrega.pdf.txtExtracted texttext/plain10733https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/d2b94334-7a23-4411-b8ca-f4dbb2c5a0b5/download651fd034cfbbc141f309f020789f9915MD513Delgado_Parra_Julián_David_2021_Probatus.pdf.txtDelgado_Parra_Julián_David_2021_Probatus.pdf.txtExtracted texttext/plain17https://repositorio.unbosque.edu.co/bitstreams/9a0b9b7b-da72-47a1-adcb-5d7a8a72ad31/downloadd080045242130a9587080c37525d331fMD51420.500.12495/6533oai:repositorio.unbosque.edu.co:20.500.12495/65332024-02-06 23:49:07.281http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/Atribución-CompartirIgual 4.0 Internacionalopen.accesshttps://repositorio.unbosque.edu.coRepositorio Institucional Universidad El Bosquebibliotecas@biteca.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