Implementación de un protocolo para la detección de virus dengue por RT-qPCR en muestras biológicas

El dengue es una enfermedad tropical causada por un virus perteneciente a la familia Flaviviridae, es transmitido principalmente por artrópodos hematófagos especialmente por la picadura de mosquitos hembra de la especie Aedes aegypti; este virus presenta cuatro serotipos que causan desde una enfermedad asintomática, síntomas similares a una gripe, hasta hemorragias, falla sistémica y muerte. En Colombia, el principal método de detección molecular del virus en muestras biológicas es la PCR convencional o semianidada; dado que el país en la actualidad tiene una mayor capacidad en infraestructura y personal calificado para realizar pruebas de PCR cuantitativa o en tiempo real (qPCR) en este estudio se evaluó el desempeño de tres protocolos reportados de RT-qPCR en la literatura. Uno tiene como blanco de detección el gen de cápside, otro el extremo 3´no traducible y el tercero un fragmento específico de cada serotipo. Una vez estandarizadas las condiciones de amplificación para cada protocolo, se estableció la eficiencia de la reacción y la sensibilidad analítica de cada ensayo. Los resultados demostraron que el protocolo multiplex, que permite la serotipificación, es el que presenta mayor sensibilidad y por tanto fue utilizado para la detección del virus en muestras provenientes de donantes de sangre y mosquitos Ae. aegypti recolectados en campo. La comparación de los resultados obtenidos con RT-qPCR contra el método tradicional de RT-PCR anidada, nos permite sugerir que este último permite identificar muestras con cargas virales más bajas, por lo cual sería el indicado para definir infección infección por virus dengue.

• Autores: Vanegas Moncada, Oscar Leonardo
• Tipo de recurso: Trabajo de grado de pregrado
• Fecha de publicación: 2022
• Institución: Universidad El Bosque
• Repositorio: Repositorio U. El Bosque
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repositorio.unbosque.edu.co:20.500.12495/8273
• Acceso en línea: http://hdl.handle.net/20.500.12495/8273
• Palabra clave: Dengue; Serotipo; RT-qPCR; Detección; 570; Dengue; Serotype; RT-qPCR; Detection
• Rights: openAccess
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