Desarrollo de un modelo in vitro de deficiencia constitutiva de la enzima GALNS en células estromales mesenquimales humanas mediante el uso de CRISPR-Cas9
La mucopolisacaridosis Tipo IVA o síndrome de Morquio es una enfermedad autosómica recesiva causada por la deficiencia de la enzima N galactosamina -6- sulfatasa (GALNS), necesaria para descomponer los glucosaminoglicanos (GAG) queratán sulfato (KS) y condroitín sulfato (CS). La deficiencia enzimáti...
- Autores:
-
Dorsant Ardón, Valérie
- Tipo de recurso:
- Fecha de publicación:
- 2022
- Institución:
- Universidad Nacional de Colombia
- Repositorio:
- Universidad Nacional de Colombia
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.unal.edu.co:unal/82024
- Palabra clave:
- 570 - Biología::576 - Genética y evolución
Pruebas de Mutagenicidad
Células Madre Mesenquimatosas
Mutagenicity Tests
Mesenchymal Stem Cells
Células estromales mesenquimales
Proteína 9 asociada a CRISPR
Edición génica
Mucopolisacaridosis tipo IV A
Enfermedad de Morquio
Mesenchymal stromal cells
CRISPR-Associated Protein 9
Gene edition
Mucopolysaccharidoses type VI A
Morquio’s disease
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- openAccess
- License
- Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
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Desarrollo de un modelo in vitro de deficiencia constitutiva de la enzima GALNS en células estromales mesenquimales humanas mediante el uso de CRISPR-Cas9 570 - Biología::576 - Genética y evolución Pruebas de Mutagenicidad Células Madre Mesenquimatosas Mutagenicity Tests Mesenchymal Stem Cells Células estromales mesenquimales Proteína 9 asociada a CRISPR Edición génica Mucopolisacaridosis tipo IV A Enfermedad de Morquio Mesenchymal stromal cells CRISPR-Associated Protein 9 Gene edition Mucopolysaccharidoses type VI A Morquio’s disease |
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570 - Biología::576 - Genética y evolución Pruebas de Mutagenicidad Células Madre Mesenquimatosas Mutagenicity Tests Mesenchymal Stem Cells Células estromales mesenquimales Proteína 9 asociada a CRISPR Edición génica Mucopolisacaridosis tipo IV A Enfermedad de Morquio Mesenchymal stromal cells CRISPR-Associated Protein 9 Gene edition Mucopolysaccharidoses type VI A Morquio’s disease |
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La mucopolisacaridosis Tipo IVA o síndrome de Morquio es una enfermedad autosómica recesiva causada por la deficiencia de la enzima N galactosamina -6- sulfatasa (GALNS), necesaria para descomponer los glucosaminoglicanos (GAG) queratán sulfato (KS) y condroitín sulfato (CS). La deficiencia enzimática conlleva a la disfunción lisosomal especialmente en tejidos conectivos ricos en KS y CS como cartílago, córnea y válvulas cardiacas. Existe evidencia acumulada in vitro e in vivo que aborda los mecanismos fisiopatológicos que determinan finalmente las manifestaciones clínicas en pacientes afectados, especialmente en tejidos osteocondrales. Sin embargo, la dificultad en la obtención de tejidos óseos y articulares de pacientes afectados ha limitado el estudio de los efectos deletéreos tempranos de la deficiencia de GALNS en el componente estromal mesenquimal. Específicamente es poco conocido el efecto de la pérdida de la de GALNS el potencial proliferativo y de diferenciación osteogénica de estas células. Para este estudio se emplearon CEM de gelatina de Wharton (GW) de cordón umbilical, las cuales han sido ampliamente estudiadas en el grupo de investigación de la Unidad de Terapias Avanzadas del IDCBIS, estas fueron editadas mediante el uso de CRISPR-Cas9 para la generación de células knock-out, y se determinó compromiso en su capacidad proliferativa, y de diferenciación osteogénica asociada al porcentaje predicho de edición génica. (Texto tomada de la fuente) |
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Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Salguero López, Gustavo Andrés1528bc70a60d7f30895b0a109a1c5be3Dueñas Gómez, Zulma Janeth12c9a5d786762f195e89a27a45656805Dorsant Ardón, Valériebcf426618d673bd76f51f3dedd731debUnidad de Terapias Avanzadas – Instituto Distrital de Ciencia Biotecnología e Innovación (IDCBIS)2022-08-23T16:03:42Z2022-08-23T16:03:42Z2022-08-19https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/82024Universidad Nacional de ColombiaRepositorio Institucional Universidad Nacional de Colombiahttps://repositorio.unal.edu.co/La mucopolisacaridosis Tipo IVA o síndrome de Morquio es una enfermedad autosómica recesiva causada por la deficiencia de la enzima N galactosamina -6- sulfatasa (GALNS), necesaria para descomponer los glucosaminoglicanos (GAG) queratán sulfato (KS) y condroitín sulfato (CS). La deficiencia enzimática conlleva a la disfunción lisosomal especialmente en tejidos conectivos ricos en KS y CS como cartílago, córnea y válvulas cardiacas. Existe evidencia acumulada in vitro e in vivo que aborda los mecanismos fisiopatológicos que determinan finalmente las manifestaciones clínicas en pacientes afectados, especialmente en tejidos osteocondrales. Sin embargo, la dificultad en la obtención de tejidos óseos y articulares de pacientes afectados ha limitado el estudio de los efectos deletéreos tempranos de la deficiencia de GALNS en el componente estromal mesenquimal. Específicamente es poco conocido el efecto de la pérdida de la de GALNS el potencial proliferativo y de diferenciación osteogénica de estas células. Para este estudio se emplearon CEM de gelatina de Wharton (GW) de cordón umbilical, las cuales han sido ampliamente estudiadas en el grupo de investigación de la Unidad de Terapias Avanzadas del IDCBIS, estas fueron editadas mediante el uso de CRISPR-Cas9 para la generación de células knock-out, y se determinó compromiso en su capacidad proliferativa, y de diferenciación osteogénica asociada al porcentaje predicho de edición génica. (Texto tomada de la fuente)Mucopolysaccharidoses type IVA or Morquio's disease is a pathology with a recessive inheritance pattern due to the deficiency of the N-galactosamine-6-sulfatase enzyme (GALNS), required for the metabolism of the glycosaminoglycans (GAG) Keratan sulfate (KS) and Chondroitin Sulfate (CS). The enzyme deficiency leads to lysosomal dysfunction that affects primarily CS and KS rich tissues like cartilage, cornea, and heart valves. There is increasing in vivo and in vitro evidence that describes the physio pathological mechanisms that lead to the clinical presentation in these patients especially in osteochondral tissues. However, it is difficult to obtain biopsy samples of bone and articular cartilage from these patients, and this limits the study of the early pathological signs due to GALNS deficiency in mesenchymal stromal cells (MSC). For this study MSCs from Wharton jelly were used, these cells have been broadly studied in the Advanced Therapies Unit Group at IDCBIS, these cells were edited using CRISP-Cas9 to generate a knockout for the GALNS gene, and a negative effect in proliferation and differentiation was found in association of the predicted gene editing percentage of the cellular pool.MaestríaMagíster en Genética HumanaIngeniería Molecular y Celular71 páginasapplication/pdfspa570 - Biología::576 - Genética y evoluciónPruebas de MutagenicidadCélulas Madre MesenquimatosasMutagenicity TestsMesenchymal Stem CellsCélulas estromales mesenquimalesProteína 9 asociada a CRISPREdición génicaMucopolisacaridosis tipo IV AEnfermedad de MorquioMesenchymal stromal cellsCRISPR-Associated Protein 9Gene editionMucopolysaccharidoses type VI AMorquio’s diseaseDesarrollo de un modelo in vitro de deficiencia constitutiva de la enzima GALNS en células estromales mesenquimales humanas mediante el uso de CRISPR-Cas9Development of an in vitro model of the GALNS enzyme deficiency in human mesenchymal stromal cells using the CRISPR/Cas9 systemTrabajo de grado - Maestríainfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionTexthttp://purl.org/redcol/resource_type/TMBogotá - Medicina - Maestría en Genética HumanaDepartamento de MorfologíaFacultad de MedicinaBogotá, ColombiaUniversidad Nacional de Colombia - Sede BogotáRedColLaReferenciaSingh J, Di Ferrante N, Niebes P, Tavella D. 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