Estudio de la expresión de proteínas en el modelo Leishmania-Macrófago con énfasis en canales iónicos

La caracterización de las propiedades eléctricas de las membranas implicadas en la interacción Leishmania-Macrófago, ha permitido describir la presencia y el cambio de ciertas corrientes iónicas producto de la función de ciertas proteínas. Los cambios de las corrientes iónicas de potasio en la membr...

Full description

Autores:
Buitrago Gutiérrez, July Constanza
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2014
Institución:
Universidad Nacional de Colombia
Repositorio:
Universidad Nacional de Colombia
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unal.edu.co:unal/52140
Acceso en línea:
https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/52140
http://bdigital.unal.edu.co/46407/
Palabra clave:
54 Química y ciencias afines / Chemistry
57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology
Leishmania
Macrófago
Fagosoma LBP
Proteínas
Canales iónicos
Potasio
Cloruro
Macrophage
Phagosome
Protein
Ionic channel
Potassium
Chloride
Rights
openAccess
License
Atribución-NoComercial 4.0 Internacional
Description
Summary:La caracterización de las propiedades eléctricas de las membranas implicadas en la interacción Leishmania-Macrófago, ha permitido describir la presencia y el cambio de ciertas corrientes iónicas producto de la función de ciertas proteínas. Los cambios de las corrientes iónicas de potasio en la membrana del macrófago como consecuencia de la infección, sugieren alteración en el patrón de expresión de proteínas entre macrófagos no infectados e infectados. Estos resultados nos llevaron a iniciar el estudio de la expresión de las proteínas responsables de las corrientes iónicas registradas en el modelo Leishmania-macrófago y los cambios en el proteoma después de la infección. En este estudio, se describen las mejores condiciones experimentales para la obtención de extractos de proteína total y extractos enriquecidos con proteínas de membrana, y se logra la detección de las proteínas Kir2.1, Kv1.5 y CLC3 en macrófagos, Kir2.1 en fagosomas y CLC en parásitos de Leishmania por western blot. La disminución en la expresión de Kir2.1 a medida que la infección progresa apoya la interpretación que la hiperpolarización reportada puede ser secundaria al aumento de las corrientes de salida de potasio voltaje dependientes. El análisis comparativo mediante electroforesis bidimensional (2DE) de los proteomas de macrófagos no infectados e infectados, muestra diferencias estadísticamente significativas en 58% de los spots de proteína detectados. A futuro su identificación por espectrometría de masas permitirá conocer las proteínas involucradas.