Diseño de un medio de cultivo para el aislamiento y crecimiento de la bacteria productora de hidrógeno Ruminococcus albus

Ruminococcus albus es una bacteria fibrolítica que ejerce una función importante en el fluido ruminal por su capacidad para degradar celulosa y hemicelulosa y por sus interacciones con otras especies. Asimismo, es un microorganismo con alto potencial biotecnológico por su capacidad para producir hidrogeno y porque puede ser usado como complemento dietario de ganado, pollos y caballos. A pesar de que esta bacteria se ha estudiado desde 1950, la mejora de medios de cultivo que permitan su aislamiento selectivo y específico a partir de fluido ruminal contribuiría a facilitar su estudio y aplicabilidad. El objetivo de este estudio fue optimizar un medio de cultivo para su aislamiento y crecimiento evaluando diferentes medios y agentes selectivos. En una primera fase se evaluó el método de roll-tube para aislar microorganismos celulíticos propuesta por Hungate (1969), utilizando carboximetilcelulosa (CMC) y papel filtro Whatman No1 (PMC) como fuentes de carbono en un medio modificado basado en el medio RGC (Rumen Fluid Glucose Cellobiose), identificando solo tres aislamientos de Streptococcus bovis/equinus en lugar de R. albus. En una segunda fase se evaluó el crecimiento de la cepa 7 de R. albus en el medio DSMZ 436 cuya reactivación tardó nueve días y los repiques crecieron después de 48 horas incubando a 37°C. Posteriormente se evaluó un medio químicamente definido, midiendo la tasa de crecimiento de las cepas 7, 8, SY3 y B199 que alcanzaron la fase exponencial tardía después de aproximadamente 10 horas de incubación a 37°C y 39°C. Adicionalmente se evaluó el crecimiento de las cepas en presencia de diferentes compuestos, con el fin de proponerlos como agentes selectivos. La cepa B199 creció después de 48 horas de incubación en presencia de ácido propiónico al 0.5% y LiCl al 0.5%, mientras que el resto crecieron antes de las 24 horas. Asimismo, todas las cepas crecieron en presencia de ácido nalidixico, exceptuando la cepa 8. Para estudios futuros se propone aislar R. albus usando fibra vegetal como fuente de carbono y probar la selectividad de estos tres agentes en el medio químicamente definido mediante la técnica de roll-tube y evaluar el crecimiento del microorganismo frente a otros posibles agentes selectivos como el feniletil alcohol entre otros. Del mismo modo se recomienda que para aislar, cultivar y criopreservar exitosamente este microorganismo es necesario tener en cuenta las características de su metabolismo y de su hábitat y seguir las recomendaciones sugeridas por la literatura para el trabajo en el laboratorio.

• Autores: Sanabria Lozano, Diana Paola
• Fecha de publicación: 2016
• Institución: Universidad Nacional de Colombia
• Repositorio: Universidad Nacional de Colombia
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repositorio.unal.edu.co:unal/58627
• Acceso en línea: https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/58627; http://bdigital.unal.edu.co/55416/
• Palabra clave: 57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology; 6 Tecnología (ciencias aplicadas) / Technology; 63 Agricultura y tecnologías relacionadas / Agriculture; Ruminococcus albus; Bacterias celulolíticas; Microorganismos ruminales; Ruminal bacteria; Cellulolytic bacteria
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