Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus vih-1
Se implementó una prueba de tamizaje preliminar para evaluar la potencial inhibición ejercida por productos de origen natural y sintético sobre la actividad de la proteína Transcriptasa Reversa del virus VIH-1, en respuesta a la necesidad de disponer de un ensayo in vitro no radioactivo, relativamen...
- Autores:
-
Wilches Arciniegas, Carolina
Cordero Camacho, Claudia Patricia
Aristizabal Gutierrez, Fabio Ancizar
- Tipo de recurso:
- Article of journal
- Fecha de publicación:
- 2005
- Institución:
- Universidad Nacional de Colombia
- Repositorio:
- Universidad Nacional de Colombia
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.unal.edu.co:unal/22891
- Acceso en línea:
- https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/22891
http://bdigital.unal.edu.co/13926/
- Palabra clave:
- HIV-1 - Reverse Transcriptase - AIDS - cDNA - Retrotranscription
Cy3.
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- openAccess
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Se implementó una prueba de tamizaje preliminar para evaluar la potencial inhibición ejercida por productos de origen natural y sintético sobre la actividad de la proteína Transcriptasa Reversa del virus VIH-1, en respuesta a la necesidad de disponer de un ensayo in vitro no radioactivo, relativamente rápido, que arroje resultados válidos, con costos moderados, bioseguro y de fácil acceso. Esta prueba se basa en la capacidad que tiene la proteína transcriptasa reversa viral para formar DNA de cadena sencilla (cDNA) a partir de RNA, utilizando deoxinucleótidos trifosfatados (dNTPs), proceso conocido como transcripción reversa. Para detectar la actividad de la proteína se realizaron ensayos fluorométricos in vitro, usando proteína recombinante sin purificar, y nucleótidos fluorescentemente marcados (Cy3-dCTP) como parte del sustrato. Las condiciones establecidas para la actividad de la proteína fueron 5µg/reacción de RNA total y 2µg/reacción de oligo-dT12-18, reflejadas en 43.6% de incorporación del nucleótido fluoromarcado |
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Wilches Arciniegas, Carolina and Cordero Camacho, Claudia Patricia and Aristizabal Gutierrez, Fabio Ancizar (2005) Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus vih-1. Revista Colombiana de Ciencias Químico Farmacéuticas; Vol. 34, núm. 1 (2005) 0034-7418 1909-6356 . |
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