Evaluación de isoespintanol y sericina como suplementos en los medios para la producción in vitro de embriones bovinos

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Autores:
Betancur Restrepo, Manuela
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2022
Institución:
Universidad Nacional de Colombia
Repositorio:
Universidad Nacional de Colombia
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unal.edu.co:unal/82309
Acceso en línea:
https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/82309
https://repositorio.unal.edu.co/
Palabra clave:
630 - Agricultura y tecnologías relacionadas
570 - Biología::576 - Genética y evolución
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Muñoz, G. (2018, 2 agosto). La ganadería vacuna y la seguridad alimentaria. Banco Interamericano de Desarrollo. https://blogs.iadb.org/sostenibilidad/es/la-ganaderia-vacuna-y-la-seguridad-alimentaria/
Gonella Diaza, Ángela M., Atuesta Bustos, J. E., Bernal Ulloa, S. M., & Chacón Jaramillo, L. (2013). Generalidades de la producción de embriones bovinos in vitro. Revista De Investigación Agraria Y Ambiental, 4(1), 65–80. https://doi.org/10.22490/21456453.1967
Mucci, N, Aller, J F, Kaiser, G G, Hozbor, F, & Alberio, R H. (2006). In vitro production of bovine embryos: serum supplementation to the culture media. Archivos de medicina veterinaria, 38(2), 97-104. https://dx.doi.org/10.4067/S0301-732X2006000200002
IETS Data Retrieval Committee. (2021). 2020 Statistics of embryo production and transfer in domestic farm animals (N°4). https://www.iets.org/
Quintela Arias, L. A., Becerra, J. J., & Peña, A. (2016). Aplicaciones de los embriones bovinos producidos in vitro. https://www.researchgate.net/publication/308968839_Aplicaciones_de_los_embriones_bovinos_producidos_in_vitro
Leivas FG, Brum DS, Fialho SS, Saliba WP, Alvim MTT, Bernardi Ml, et al. Fetal calf serum enhances in vitro production of Bos taurus indicus embryos. Theriogenology. 2011; 75:429–433. doi: 10.1016/j. theriogenology.2010.08.017 PMID: 20961608 10.
Solis, A., Sandoya, G., & de Armas, R. (2012). Evaluación de tres protocolos de criopreservación de embriones bovinos obtenidos in vivo e in vitro. Evaluación de tres protocolos de criopreservación de embriones bovinos obtenidos in vivo e in vitro, 13(10). https://www.redalyc.org/pdf/636/63624631005.pdf
Simancas-Escorcia, V, Vergara Hernández, C, & Díaz-Caballero, A. (2018). Influencia del suero fetal bovino en el cultivo de fibroblastos gingivales. Avances en Odontoestomatología, 34(6), 299-309. http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0213-12852018000600004&lng=es&tlng=es
Barajas-Gamboa, J. A., Serpa-Guerra, A. M., Restrepo-Osorio, A., & Álvarez-López, C. (2016). Aplicaciones de la sericina: una proteina globular proveniente de la seda. Ingeniería y Competitividad, 18(2), 193. https://doi.org/10.25100/iyc.v18i2.2167
Aghaz, F., Hajarian, H., Shabankareh, H. K., & Abdolmohammadi, A. (2015). Effect of sericin supplementation in maturation medium on cumulus cell expansion, oocyte nuclear maturation, and subsequent embryo development in Sanjabi ewes during the breeding season. Theriogenology, 84(9), 1631–1635. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.08.013
Aghaz, F., Hajarian, H., & Karami Shabankareh, H. (2016). Enhanced in vitro developmental competence of sheep embryos following sericin supplementation of the in vitro maturation and in vitro culture media. Small Ruminant Research, 136, 257–260. https://doi.org/10.1016/j.smallrumres.2016.01.019
Torres-Osorio, V., Urrego, R., Echeverri Zuluaga, J. J., & López-Herrera, A. (2019). Estrés oxidativo y el uso de antioxidantes en la producción in vitro de embriones mamíferos. Revisión. Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias, 10(2), 433–459. https://doi.org/10.22319/rmcp.v10i2.4652
Mora Agüero, S. D. L. N., Zeledón Aguilera, A. S., & Vargas Rubio, T. (2019). Estrés oxidativo y antioxidantes: efectos en el embarazo. Revista Medica Sinergia, 4(5), 89–100. https://doi.org/10.31434/rms.v4i5.211
Alfa Editores. (2018, 22 mayo). Ergotioneína y glutatión, antioxidantes benéficos de los champiñones. https://www.alfa-editores.com.mx/ergotioneina-y-glutation-antioxidantes-beneficos-de-los-champinones/
Delgado Tiburcio, G. A. (2018). Efecto de tres niveles de oxígeno en la atmósfera de cultivo y la adición de un antioxidante comercial en el desarrollo de embriones bovinos producidos in vitro. Acta Universitaria, 28(2), 53–57. https://doi.org/10.15174/au.2018.1769
Jaramillo Bolívar, N., Arzuaga Cedeño, J. M., Giraldo Giraldo, J. J., & Vásquez Araque, N. A. (2019). Parámetros metabólicos, antioxidantes y competencia para el desarrollo embrionario de ovocitos bovinos madurados in vitro con L-Carnitina. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 30(1), 265–275. https://doi.org/10.15381/rivep.v30i1.15703
Escobar Escobar, J. (2021). Evaluación del efecto antioxidante del Resveratrol sobre la criotolerancia de embriones bovinos de la raza Hartón del Valle producidos in vitro. Universidad Nacional de Colombia.
Restrepo B., G., & Rojano, B. A. (2018). Actividad antioxidante del isoespintanol y el timol en el semen equino criopreservado. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 29(1), 205–216. https://doi.org/10.15381/rivep.v29i1.14253
Tejera M, I., Usuga S, A., Restrepo R, O., Restrepo B, G, & Gomez O, J. (2021). Congelación de semen canino en presencia de isoespintanol y ergotioneína: efecto sobre la calidad espermática posdescongelación. RediCES. http://file:///D:/Descarga/348291-Article%20Text-239458-1-10-20211206.pdf
Córdova Izquierdo, A., Guerra Liera, J. E., Villa Mancera, A., Olivares Pérez, J., Cansino Arroyo, G., Juárez Mosaqueda, M. D. L., & Pérez Gutiérrez, J. F. (2015). Congelación de embriones bovinos. Revista Complutense de Ciencias Veterinarias, 9(2). https://doi.org/10.5209/rev_rccv.2015.v9.n2.51041
Rall, W. F. (1992). Cryopreservation of oocytes and embryos: methods and applications. Animal Reproduction Science, 28(1–4), 237–245. https://doi.org/10.1016/0378-4320(92)90110-y
Rodríguez, P., & Jiménez, C. (s/f). CRIOPRESERVACIÓN DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO. Org.co. http://www.scielo.org.co/pdf/rfmvz/v58n2/v58n2a05.pdf
García, J. L., Restrepo, S. J., Gómez, N., Moreno, E. R., Dubeibe, D. F. & Mogollón, E. M. (2017). Manual de procedimientos para la producción y vitrificación de embriones bovinos en laboratorio de reproducción animal. Servicio Nacional de Aprendizaje – SENA, Universidad Cooperativa de Colombia.
Vajta, G., & Kuwayama, M. (2006). Improving cryopreservation systems. Theriogenology, 65(1), 236–244. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2005.09.026
de Munck, N., & Vajta, G. (2017). Safety and efficiency of oocyte vitrification. Cryobiology, 78, 119–127. https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2017.07.009
Santa Cruz P., C., Huanca L., W., Condori P., R., & Ampuero B., A. (2014). Uso de Macromoléculas sobre la Tasa de Maduración y Desarrollo Embrionario in vitro de Ovocitos Bovinos. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 25(4). https://doi.org/10.15381/rivep.v25i4.10799
Restrepo Betancur, G., Chavarria Gutierrez, N., & Vasquez Araque, N. (2007). Effect of bovine calf serum supplementation for the in vitro maturation of bovine oocytes on their mitochondrial activity and embryo d. Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia, 2(2), 14–22. https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=321428098002
Métodos, "., Congelaci, D. E., De, C., De Embriones, B., En, N., Líquido, "., José, E., Melendres, M., Fernando, G., Samaniego, V., Rafael, I. M. C., Oleas, V., Georgina, D., Moreno, I., Guillermo, I. M. C., Villa, F., Vicente, I. M. C., & Oleas, R. (s/f). Escuela superior politécnica de chimborazo facultad de ciencias pecuarias escuela de ingeniería zootécnica. Edu.ec. http://dspace.espoch.edu.ec/bitstream/123456789/2105/1/17T1103.pdf
Zullo, G., Albero, G., Neglia, G., de Canditiis, C., Bifulco, G., Campanile, G., & Gasparrini, B. (2016). L-ergothioneine supplementation during culture improves quality of bovine in vitro–produced embryos. Theriogenology, 85(4), 688–697. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.10.008
Hartman, P. E. (1990). [32] Ergothioneine as antioxidant. Oxygen Radicals in Biological Systems Part B: Oxygen Radicals and Antioxidants, 310–318. https://doi.org/10.1016/0076-6879(90)86124-e
Palma, G. A. (2018). Biotecnología de la Reproducción. Ediciones INTA. https://www.researchgate.net/publication/329567703_Produccion_in_vitro_de_embriones_bovinos.
Peña J, M., Góngora O, A., & Estrada L, J. (2007). Factores de crecimiento en el desarrollo folicular, embionario temprano e implantación. Implicaciones en la producción de embriones bovinos. Revista MVZ Córdoba, 12(1). https://doi.org/10.21897/rmvz.439
Herradón, P., Quintela, L, A., Becerra, J.J., Ruibal, S., & Fernández, M. (2007). Fecundación in vitro: alternativa para la mejora genética en bovinos. Producción animal, 15, p. 34. https://tspace.library.utoronto.ca/bitstream/1807/53061/1/la07027.pdf.
López C, A., Olivera A, M., Ruiz C, T., & Tarazona M, A. (2007). Efecto del co-cultivo sobre el desarrollo temprano de embriones bovinos producidos in vitro. Revista MVZ Córdoba, 12(2). https://doi.org/10.21897/rmvz.428
Robledo, J.M., Herrera, J., Cajero, M., Navarro, M.C., & García, A. (2009). Evaluación de dos medios de maduración in vitro para la producción de embriones ovinos. Tropical and Subtropical Agroecosystems, 10, p. 95 - 99. https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=93911243009.
Ferré, L., & Cattaneo, L.. (2013). Biotecnologías reproductivas: producción in vitro de embriones y semen sexado. Medicina Veterinaria, 2, pp. 28 - 36. https://www.produccion-animal.com.ar/informacion_tecnica/transplante_embrionario/38-biotecnologias.pdf.
Rodríguez, P y Jiménez, C. (2011). Criopreservación de embriones bovinos producidos in vitro. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA.
Celestinos, M., & Gatica, R. (2002). Vitrificación como técnica de crioconservación de embriones bovinos. Archivos de medicina veterinaria, 34(2). https://doi.org/10.4067/s0301-732x2002000200002
Cabrera, P., & Fernández, A. (2006). Criopreservación de embriones: una herramienta básica en la Reproducción Asistida. Facultad de Ciencias Veterinarias, UCV, 47.
Guerra, R.; Solis, A., Sandoya, G., & de Armas, R. (2012). Evaluación de tres protocolos de criopreservación de embriones bovinos obtenidos in vivo e in vitro. REDVET, 13(10). https://www.redalyc.org/comocitar.oa?id=63624631005.
Sanches, B. (2015). Obtenção de prenhezes em rebanhos bovinos a partir de embriões produzidos in vitro criopreservados por vitrificação ou transferência direta. Universidad estatal de Londrina, p. 13.
Segura, J., & Montes, R. (2001). Reasons and strategies for the conservation of animal genetic resources. Rev. Biomed, 12(3), pp. 196 - 206.
B, Sanches., L, Marinho., B,. Filho., J, Pontes., A, Basso., M, Meirinhos., K, Silva-Santos., C, Ferreira., & M, Seneda. (2013). Cryosurvival and pregnancy rates after exposure of IVF-derived Bos indicus embryos to forskolin before vitrification. Elsevier, p. 373.
J. Caínzos, M. Barrio, S. Ruibal, J.J. Becerra, L.A. Quintela1 y P.G. Herradón. (2013). Efecto de la suplementación con suero fetal bovino (FCS), albúmina sérica bovina (BSA) y polivinil pirrolidona (PVP) en el medio de maduración in vitro de los ovocitos bovinos. ITEA, 109(1), pp. 25 – 32. https://www.researchgate.net/publication/265550077_Efecto_de_la_suplementacion_con_suero_fetal_bovino_FCS_albumina_serica_bovina_BSA_y_polivinil_pirrolidona_PVP_en_el_medio_de_maduracion_in_vitro_de_los_ovocitos_bovinos#fullTextFileContent.
Limache Coaquera, T. (2015). Efecto de la adición de fluido folicular al medio de maduración de ovocitos para la producción In vitro de embriones de bovino (Bos taurus). Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann.
Castrillón Martínez, Diana Carolina. (2017). Caracterización de las sericina de seda colombiana con miras a ser incorporada como ingrediente en una matriz alimentaria. Universidad Pontificia Bolivariana.
Do, L., Namula, Z., Luu, V., Sato, Y., Taniguchi, M., Isobe, T., Kikuchi, K. y Otoi, T. (2014), Efecto de la suplementación con sericina durante in vitro Maduración en la maduración, fertilización y desarrollo de ovocitos porcinos. Reprod Dom Anim, 49: e17-e20. doi: 10.1111 / rda.12274
Misa Hosoe, N. Y. (2014). La sericina acelera la producción de hialuronano y disminuye la incidencia de fertilización por poliespermia en ovocitos bovinos durante la maduración in vitro. Revisa de Reproduccion y Desarrollo.
El-Fakharany, E. M., Abu-Elreesh, G. M., Kamoun, E. A., Zaki, S., & Abd-EL-Haleem, D. A. (2020). In vitro assessment of the bioactivities of sericin protein extracted from a bacterial silk-like biopolymer. RSC Advances, 10(9), 5098–5107. https://doi.org/10.1039/c9ra09419a
Isobe, T., Ikebata, Y., Onitsuka, T., Wittayarat, M., Sato, Y., Taniguchi, M., & Otoi, T. (2012). Effect of sericin on preimplantation development of bovine embryos cultured individually. Theriogenology, 78(4), 747–752. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2012.03.021
Isobe, T., Ikebata, Y., Onitsuka, T., Do, L. T. K., Sato, Y., Taniguchi, M., & Otoi, T. (2013). Cryopreservation for bovine embryos in serum-free freezing medium containing silk protein sericin. Cryobiology, 67(2), 184–187. https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2013.06.010
Pandey, K. B., & Rizvi, S. I. (2011). Anti-oxidative action of resveratrol: Implications for human health. Arabian Journal of Chemistry, 4(3), 293–298. https://doi.org/10.1016/j.arabjc.2010.06.049
Hussein, M.A., 2011. A convenient mechanism for the free radical scavenging activity of resveratrol. International Journal of Phytomedicine, 3(4), pp.459–469.
Zullo, Gianluigi. (2015). Natural antioxidants during in vitro culture improve embryo quality in cattle. Università degli Studi di Napoli Federico II. https://doi.org/10.6092/UNINA/FEDOA/10174
Harvey, A. J., Kind, K. L., & Thompson, J. G. (2002). REDOX regulation of early embryo development. Reproduction, 123(4), 479–486. https://doi.org/10.1530/rep.0.1230479
Goto, Y., et al., Increased generation of reactive oxygen species in embryos cultured in vitro. Free Radical Biology and Medicine, 1993. 15(1): p. 69-75.
Lee, H.C. and Y.H. Wei, Oxidative stress, mitochondrial DNA mutation, and apoptosis in aging. Exp Biol Med (Maywood). 2007. 232(5). p. 592-606.
Gutteridge, J.M. and B. Halliwell, Iron toxicity and oxygen radicals. Baillieres Clin Haematol., 1989. 2(2): p. 195-256.
Khalil, W.A., W.F.A. Marei, and M. Khalid, Protective effects of antioxidants on linoleic acid-treated bovine oocytes during maturation and subsequent embryo development. Theriogenology. 80(2): p. 161-168.
Ali, A.A., J.F. Bilodeau, and M.A. Sirard, Antioxidant requirements for bovine oocytes varies during in vitro maturation, fertilization and development. Theriogenology, 2003. 59(3-4): p. 939-49.
Li, X. X., Lee, K. B., Lee, J. H., Kim, K. J., Kim, E. Y., Han, K. W., Park, K. S., Yu, J., & Kim, M. K. (2014). Glutathione and cysteine enhance porcine preimplantation embryo development in vitro after intracytoplasmic sperm injection. Theriogenology, 81(2), 309–314. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2013.09.030
Abeydeera, L.R., et al., Presence of beta-mercaptoethanol can increase the glutathione content of pig oocytes matured in vitro and the rate of blastocyst development after in vitro fertilization. Theriogenology, 1998. 50(5): p. 747-56.
Michael, A., et al., Effect of antioxidant supplementation on semen quality and reactive oxygen species of frozen-thawed canine spermatozoa. Theriogenology. 68(2): p. 204-212.
Olfati Karaji, R., Daghigh Kia, H., & Ashrafi, I. (2014). Effects of in combination antioxidant supplementation on microscopic and oxidative parameters of freeze–thaw bull sperm. Cell and Tissue Banking, 15(3), 461–470. https://doi.org/10.1007/s10561-013-9412-y
Castillo-Martín, M., Yeste, M., Soler, A., Morató, R., & Bonet, S. (2015). Addition of L-ascorbic acid to culture and vitrification media of IVF porcine blastocysts improves survival and reduces HSPA1A levels of vitrified embryos. Reproduction, Fertility and Development, 27(7), 1115. https://doi.org/10.1071/rd14078
Bormann, C. L., Ongeri, E., & Krisher, R. L. (2003). The effect of vitamins during maturation of caprine oocytes on subsequent developmental potential in vitro. Theriogenology, 59(5–6), 1373–1380. https://doi.org/10.1016/s0093-691x(02)01181-0
Guemra, S., Monzani, P., Santos, E., Zanin, R., Ohashi, O., Miranda, M., & Adona, P. (2013). Maturação in vitro de oócitos bovinos em meios suplementados com quercetina e seu efeito sobre o desenvolvimento embrionário. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, 65(6), 1616–1624. https://doi.org/10.1590/s0102-09352013000600005
Bernal, B., Tribulo, B., Mutto, H., Adrián A., & Almicar, G. (2016). Influencia de la suplementacion delmedio de maduracion y de cultivo en lasupervivencia a la criopreservacion deembriones bovinos in vitro. RedVet, 18(11), p.p 1 – 11.
Rojano, B., Gaviria, C., Gil, M., Saez, J., Schinella, G., & Tournier, H. (2008). Actividad antioxidante del isoespintanol en diferentes medios. Revista de la Facultad de Química Farmaceutica, Universidad de Antioquia, p. 173-181.
Gastaldi, B., Silvia, B., & Catalán, C. (2019). Análisis de los compuestos fenólicos y volátiles de plantas medicinales y aromáticas del noroeste de la Patagonia Argentina, estudio de las actividades antioxidante y citotóxica. Conicet.
De Wit, A., Wurth, Y., & Kruip, T. 2000. Effect of ovarian phase and follicle quality on morphology and developmental capacity of the bovine cumulus-oocyte complex. Journal of Animal Science, 78(5), pp.1277–1283.
Newcombe, R. G. (1998). Interval estimation for the difference between indpendente proportions: comparison of eleven methods. Statistics in Medicine. 17, p.p 873-890.
Lino, A. A., Chasi, B. E. (2021). Efecto de dos medios de maduración sobre la producción de embriones partenogenéticos en bovinos. Escuela Agrícola Panamericana, Zamorano.
Maturana, D., Gómez O., J., & Restrepo B., G. (2019). Efecto de la quercetina sobre la tasa de desarrollo y la viabilidad de embriones bovinos producidos in vitro. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 30(2), 775–786. https://doi.org/10.15381/rivep.v30i2.16181
Espin, P., (2018). Maduración de ovocitos bovinos con dos medios de maduración diferentes. Universidad Politécnica Salesiana.
García-Díaz, J.R., Romero-Aguirregomezcorta, J, Astiz Blanco, S, & Ruiz López, S. (2013). Adición de sustancias antioxidantes en los medios de cultivo empleados en la producción in vitro de embriones en mamíferos. Revista de Salud Animal, 35(1), p.p 10-19.
Do, L., Namula, Z., Luu, V., Sato, Y., Taniguchi, M., Isobe, T., Kikuchi, K., & Otoi, T. (2014). Effect of Sericin Supplementation DuringIn VitroMaturation on the Maturation, Fertilization and Development of Porcine Oocytes. Reproduction in Domestic Animals, 49(2), e17-e20. https://doi.org/10.1111/rda.12274
Restrepo Betancur, G., & Rojano, B. A. (2017). Efecto del isoespintanol y el timol en la actividad antioxidante de semen equino diluido con fines de congelación. Revista de Medicina Veterinaria, 35, 149–158. https://doi.org/10.19052/mv.4397
Mona Ghasemi M.Sc., Abbas Farshad Ph.D., Hadi Hajarian Ph.D., Omid Banafshi M.Sc., Vahideh Asadollahi M.Sc., Fardin Fathi Ph.D. (2018). The effects of sericin on cryopreserved sperm cells and subsequent embryo development in mice. Int J Reprod BioMed Vol. 16. No. 6. p.p 405-412.
Sasaki, M., Kato, Y., Yamada, H., & Terada, S. (2005). Development of a novel serum-free freezing medium for mammalian cells using the silk protein sericin. Biotechnology and Applied Biochemistry, 42(Pt 2), 183–188. https://doi.org/10.1042/BA20050019
Restrepo, G., Usuga, A., Montoya, J., Rojas, M., & Rojano, B. (2018). Flow cytometric analysis of stallion semen frozen with isoespintanol. CRYO 2020.
Restrepo, G., Usuga, A., Montoya, J., Rojas, M., & Rojano, B. (2020). Isoespintanol effect on freezing of stallion semen. Revista Acovez, Vol. 49, N° 3. ISSN0120-1530.
Miyamoto, Y., Oishi, K., Yukawa, H., Noguchi, H., Sasaki, M., Iwata, H., & Hayashi, S. (2012). Cryopreservation of human adipose tissue-derived stem/progenitor cells using the silk protein sericin. Cell Transplantation, 21(2–3), 617–622. https://doi.org/10.3727/096368911X605556
Madrid, S.(2016). Efecto del resveratrol sobre la criotolerancia de embriones bovinos in vitro. Universidad Nacional de Colombia.
Avendaño Arteaga, Y., Hincapié Llanos, G. A., Castrillón Martínez, D., Cardona Aristizábal, M., Barajas Gamboa, J. A., & Álvarez López, C. (2018). Propiedades de la sericina de seda colombiana. Revista Lasallista de Investigación, 15(1), 57–66. https://doi.org/10.22507/rli.v15n1a5
Correa-Rivero, H., Díaz-Casañas, E., Bernal Veitia, O., & Malvarez Fernández, Y. (2020). Determinación de la estabilidad e irritabilidad del hidrolizado de sericina. Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas, 49(2). https://doi.org/10.15446/rcciquifa.v49n2.88917
Hajarian, H., Aghaz, F., & Karami Shabankareh, H. (2017). Replacement of serum with sericin in vitro maturation and culture media: Effects on embryonic developmental competence of Sanjabi sheep embryo during breeding season. Theriogenology, 92, 144–148. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2016.12.027
Quintanilla M., L., Huanca L., W., Córdova G., A., Ampuero B., A., & Benavides I., L. (2015). Efecto de la Suplementación del Medio de Maduración con Cisteamina y de Dos Medios de Cultivo (KSOMaa y SOF) en la Fecundación in vitro de Ovocitos Bovinos. Revista de investigaciones veterinarias del Peru, 26(3), 462. https://doi.org/10.15381/rivep.v26i3.11178
Ferreira, I. (2014). La controversia en torno a los antioxidantes y los prooxidantes. Nutri-Facts.
Sudano, M. J., Paschoal, D. M., da Silva Rascado, T., Magalhães, L. C. O., Crocomo, L. F., de Lima-Neto, J. F., & da Cruz Landim-Alvarenga, F. (2011). Lipid content and apoptosis of in vitro-produced bovine embryos as determinants of susceptibility to vitrification. Theriogenology, 75(7), 1211–1220. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2010.11.033
Crosier, A. E., Farin, P. W., Dykstra, M. J., Alexander, J. E., & Farin, C. E. (2000). Ultrastructural Morphometry of Bovine Compact Morulae Produced In Vivo or In Vitro1. Biology of Reproduction, 62(5), 1459–1465. https://doi.org/10.1095/biolreprod62.5.1459
Kuzmany, A., Havlicek, V., Wrenzycki, C., Wilkening, S., Brem, G., & Besenfelder, U. (2011). Expression of mRNA, before and after freezing, in bovine blastocysts cultured under different conditions. Theriogenology, 75(3), 482–494. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2010.09.016
Garcia, S. M., Marinho, L. S. R., Lunardelli, P. A., Seneda, M. M., & Meirelles, F. V. (2015). Developmental block and programmed cell death in Bos indicus embryos: Effects of protein supplementation source and developmental kinetics. PloS One, 10(3), e0119463. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0119463
Magalhães, R., Guaitolini, C. R. de F., Tramontin, M. L. D., Sestari, D. A. O., Barros, B. A. de, Elias, A. S. de L., Araujo, A. L., Giosa, D. C., Trindade, A. B., & Maziero, R. R. D. (2021). Evaluation of in vitro production rates of bovine embryos using melatonin-supplemented culture medium. Research, Society and Development, 10(6), e19010615544. https://doi.org/10.33448/rsd-v10i6.15544
De Wit, a. a C., Wurth, Y. a. & amp; Kruip, T. a M., 2000. Effect of ovarian phase and follicle quality on morphology and developmental capacity of the bovine cumulus-oocyte complex. Journal of Animal Science, 78(5), pp.1277–1283.
Dode, M. a N. et al., 2002. The effect of sperm preparation and co-incubation time on in vitro fertilization of bos indicus oocytes. Animal Reproduction Science, 69(1–2), pp.15–23.
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spelling Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Restrepo Betancur, Giovannibd03434c72051e913ab3e03d3c37d88dBetancur Restrepo, Manuelae1d3cdfd65041db2d4b929a9a424b766Grupo de Investigación en Biotecnología Animal GIBA2022-09-20T15:32:26Z2022-09-20T15:32:26Z2022-09-19https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/82309Universidad Nacional de ColombiaRepositorio Institucional Universidad Nacional de Colombiahttps://repositorio.unal.edu.co/tablasUna de las biotecnologías que ha tenido mayor impacto en la eficiencia productiva de los hatos es la producción in vitro de embriones bovinos. Sin embargo, se han encontrado falencias en los componentes utilizados en la preparación de medios en los laboratorios como el suero fetal bovino (SFB), que aunque aumenta la producción de embriones, genera dificultades en la criopreservación de embriones debido a la acumulación de lípidos en el citoplasma. De acuerdo con lo anterior, en el presente trabajo se usó la Sericina, una proteína extraída del gusano de seda, como alternativa al SFB. Así mismo, se conoce que el estrés oxidativo genera la alteración del ovocito y las células embrionarias en condiciones in vitro, por lo tanto, en esta investigación se empleó el isoespintanol, un antioxidante natural con gran capacidad de neutralización de las especies reactivas de oxígeno, con la finalidad de mejorar el proceso de producción in vitro de embriones bovinos y su tolerancia a la criopreservación. Se aspiraron ovocitos de folículos con tamaño de 3 a 8 mm de ovarios de hembras faenadas. Se seleccionaron los ovocitos viables de calidad 1 y 2, se pusieron en gotas de 100 ul de medio de maduración y se dejaron durante 22 a 24 horas en condiciones de 38.5°C y 5% de CO2. Se hicieron tres experimentos distribuidos de la siguiente manera: Primero se realizó la maduración in vitro (MIV) de los ovocitos con cuatro concentraciones de sericina, 0.1%, 0.5%, 1.0% y 2.5%. Se incluyó un tratamiento control con SFB y luego se seleccionaron las dos concentraciones con mayores tasas de MIV. Para el isoespintanol se evaluaron tres concentraciones hasta la expulsión del primer cuerpo polar: 10 µM, 20 µM y 30 µM. Para el segundo experimento, se seleccionaron las dos concentraciones con mejores resultados, que fueron 0.5% y 1.0%, para la sericina y 10 µM y 20 µM para el isoespintanol. Se realizó la MIV bajo seis tratamientos: T1 (10 % SFB) - control 1, T2 (Sin fuente de proteína) - control 2, T3 (sericina 0,5%), T4 (sericina 1%), T5 (isoespintanol 10 µM más 10% SFB), y T6 (isoespintanol 20 uM más 10% SFB). Después de 24 horas se realizó la fecundación in vitro durante 18–20 horas, se llevó a cabo la eliminación de las células del cúmulus y finalmente, los posibles cigotos se colocaron en medio de cultivo hasta etapa de blastocistos al día 7. Se obtuvo respuesta positiva en el reemplazo completo del SFB como fuente de proteína en los medios de maduración, obteniéndose mejores resultados con sericina al 1% e isoespintanol con 20 µM. Para el tercer experimento, se utilizó la misma combinación de las dos concentraciones de sericina e isoespintanol seleccionadas hasta etapa de blastocistos al día 7. Se establecieron tres tratamientos en la MIV: T1 (10% SFB) - control 1, T2 (sin fuente de proteína) - control 2 y T3 (1% de sericina más 20 µM de isoespintanol). En este último experimento, se encontró que la combinación de ambos componentes no arrojó resultados superiores con respecto a los tratamientos controles. Este trabajo concluye que la sericina podría usarse como fuente de proteína durante la MIV de los ovocitos bovinos, en reemplazo del suero fetal bovino. Así mismo, el isoespintanol puede utilizarse como suplemento antioxidante en los medios de maduración para la producción in vitro de embriones bovinos. (Texto tomado de la fuente)One of the biotechnologies having the greatest impact on the productive efficiency of herds is the in vitro production of bovine embryos. However, shortcomings have been found in the components utilized in the preparation of media in laboratories such as bovine fetal serum (BFS), which, although it increases the production of embryos, it also generates difficulties in the cryopreservation of the embryos due to the accumulation of lipids in the cytoplasm. Considering that, this analysis uses Sericin, a protein extracted from silkworms, as an alternative to BFS. It has been known that oxidative stress generates an alteration to the oocyte and embryonic cells under in vitro conditions, therefore, this research uses isospintanol, a natural antioxidant with a the capacity to neutralize oxygen reactive species, in order to improve the in vitro production process of bovine embryos and its tolerance to cryopreservation. Oocytes from follicles with a size of 3 to 8 mm were extracted from ovaries of slaughtered females. Eligible oocytes with quality 1 and 2 were selected, placed in 100 ul drops of a maturation medium and left for 22 to 24 hours under conditions of 38.5°C and 5% CO2. Three experiments were completed as follows: First, in vitro maturation (“IVM”) of the oocytes was performed with four different concentrations of sericin, 0.1%, 0.5%, 1.0% and 2.5% and a BFS control treatment, then the two concentrations with the highest IVM rates were selected. For isospintanol, three concentrations were evaluated to the expulsion of the first polar body, 0 µM (Control), 10 µM, 20 µM and 30 µM. For the second experiment, the two concentrations with the best IVM results were selected, 0.5% and 1.0% for sericin and 10 µM and 20 µM for isospintanol. The IVM was performed under six treatments: T1 (10% BFS) – control 1, T2 (without protein source) – control 2, T3 (0.5% sericin), T4 (1% sericin), T5 (10 µM isospintanol plus 10% BFS), and T6 (20 uM isospintanol plus 10% BFS). After 24 hours of IVM, in vitro fertilization was performed for 18-20 hours, the cumulus cells were eliminated and finally, the possible zygotes were placed in a culture medium until day seven. A positive result was obtained in the complete replacement of BFS as a protein source in the maturation media, obtaining better results with 1% sericin and 20 µM isospintanol. For the third experiment, the same two concentrations of sericin and isospintanol were used to the blastocyst stage on day seven. Three IVM treatments were performed: T1 (10% FBS) – control 1, T2 (without protein source) - control 2, and T3 (1% sericin plus 20 µM isospintanol). In this last experiment, it was found that the combination of both components did not yield superior results with respect to the control treatments. This work concludes that sericin could be used as a protein source during IVM of bovine oocytes, in replacement of bovine fetal serum. It also concludes that isospintanol can be used as an antioxidant supplement in maturation media for the in vitro production of bovine embryos.Politécnico Colombiano Jaime Isaza CadavidMaestríaMagister en Ciencias - BiotecnologíaReproducción AnimalÁrea Curricular Biotecnologíaxvi, 48 páginasapplication/pdfspaUniversidad Nacional de ColombiaMedellín - Ciencias - Maestría en Ciencias - BiotecnologíaEscuela de biocienciasFacultad de CienciasMedellín, ColombiaUniversidad Nacional de Colombia - Sede Medellín630 - Agricultura y tecnologías relacionadas570 - Biología::576 - Genética y evoluciónCultivo in vitroIn vitro cultureFertilización en vitroFertilization in vitroCultivo de embrionesIn vitro cultureSeguridad alimentariaBiotecnologíasReproducción animalEmbrionesBovinosCriopreservaciónFood safetyBiotechnologiesAnimal ReproductionEmbryosBovinesEvaluación de isoespintanol y sericina como suplementos en los medios para la producción in vitro de embriones bovinosEvaluation of isospintanol and sericin as supplements in media for the in vitro production of bovine embryoTrabajo de grado - Maestríainfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionTexthttp://purl.org/redcol/resource_type/TMFahsbender, J., & Kim, N. (2018). Livestock Transfers, Food Security and Women’s Empowerment: Evidence from a Randomized Phased-in Program in Nicaragua. IDB. https://doi.org/10.18235/0001447.Muñoz, G. (2018, 2 agosto). La ganadería vacuna y la seguridad alimentaria. Banco Interamericano de Desarrollo. https://blogs.iadb.org/sostenibilidad/es/la-ganaderia-vacuna-y-la-seguridad-alimentaria/Gonella Diaza, Ángela M., Atuesta Bustos, J. E., Bernal Ulloa, S. M., & Chacón Jaramillo, L. (2013). Generalidades de la producción de embriones bovinos in vitro. Revista De Investigación Agraria Y Ambiental, 4(1), 65–80. https://doi.org/10.22490/21456453.1967Mucci, N, Aller, J F, Kaiser, G G, Hozbor, F, & Alberio, R H. (2006). In vitro production of bovine embryos: serum supplementation to the culture media. Archivos de medicina veterinaria, 38(2), 97-104. https://dx.doi.org/10.4067/S0301-732X2006000200002IETS Data Retrieval Committee. (2021). 2020 Statistics of embryo production and transfer in domestic farm animals (N°4). https://www.iets.org/Quintela Arias, L. A., Becerra, J. J., & Peña, A. (2016). Aplicaciones de los embriones bovinos producidos in vitro. https://www.researchgate.net/publication/308968839_Aplicaciones_de_los_embriones_bovinos_producidos_in_vitroLeivas FG, Brum DS, Fialho SS, Saliba WP, Alvim MTT, Bernardi Ml, et al. Fetal calf serum enhances in vitro production of Bos taurus indicus embryos. Theriogenology. 2011; 75:429–433. doi: 10.1016/j. theriogenology.2010.08.017 PMID: 20961608 10.Solis, A., Sandoya, G., & de Armas, R. (2012). Evaluación de tres protocolos de criopreservación de embriones bovinos obtenidos in vivo e in vitro. Evaluación de tres protocolos de criopreservación de embriones bovinos obtenidos in vivo e in vitro, 13(10). https://www.redalyc.org/pdf/636/63624631005.pdfSimancas-Escorcia, V, Vergara Hernández, C, & Díaz-Caballero, A. (2018). Influencia del suero fetal bovino en el cultivo de fibroblastos gingivales. Avances en Odontoestomatología, 34(6), 299-309. http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0213-12852018000600004&lng=es&tlng=esBarajas-Gamboa, J. A., Serpa-Guerra, A. M., Restrepo-Osorio, A., & Álvarez-López, C. (2016). Aplicaciones de la sericina: una proteina globular proveniente de la seda. Ingeniería y Competitividad, 18(2), 193. https://doi.org/10.25100/iyc.v18i2.2167Aghaz, F., Hajarian, H., Shabankareh, H. K., & Abdolmohammadi, A. (2015). Effect of sericin supplementation in maturation medium on cumulus cell expansion, oocyte nuclear maturation, and subsequent embryo development in Sanjabi ewes during the breeding season. Theriogenology, 84(9), 1631–1635. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.08.013Aghaz, F., Hajarian, H., & Karami Shabankareh, H. (2016). Enhanced in vitro developmental competence of sheep embryos following sericin supplementation of the in vitro maturation and in vitro culture media. Small Ruminant Research, 136, 257–260. https://doi.org/10.1016/j.smallrumres.2016.01.019Torres-Osorio, V., Urrego, R., Echeverri Zuluaga, J. J., & López-Herrera, A. (2019). Estrés oxidativo y el uso de antioxidantes en la producción in vitro de embriones mamíferos. Revisión. Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias, 10(2), 433–459. https://doi.org/10.22319/rmcp.v10i2.4652Mora Agüero, S. D. L. N., Zeledón Aguilera, A. S., & Vargas Rubio, T. (2019). Estrés oxidativo y antioxidantes: efectos en el embarazo. Revista Medica Sinergia, 4(5), 89–100. https://doi.org/10.31434/rms.v4i5.211Alfa Editores. (2018, 22 mayo). Ergotioneína y glutatión, antioxidantes benéficos de los champiñones. https://www.alfa-editores.com.mx/ergotioneina-y-glutation-antioxidantes-beneficos-de-los-champinones/Delgado Tiburcio, G. A. (2018). Efecto de tres niveles de oxígeno en la atmósfera de cultivo y la adición de un antioxidante comercial en el desarrollo de embriones bovinos producidos in vitro. Acta Universitaria, 28(2), 53–57. https://doi.org/10.15174/au.2018.1769Jaramillo Bolívar, N., Arzuaga Cedeño, J. M., Giraldo Giraldo, J. J., & Vásquez Araque, N. A. (2019). Parámetros metabólicos, antioxidantes y competencia para el desarrollo embrionario de ovocitos bovinos madurados in vitro con L-Carnitina. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 30(1), 265–275. https://doi.org/10.15381/rivep.v30i1.15703Escobar Escobar, J. (2021). Evaluación del efecto antioxidante del Resveratrol sobre la criotolerancia de embriones bovinos de la raza Hartón del Valle producidos in vitro. Universidad Nacional de Colombia.Restrepo B., G., & Rojano, B. A. (2018). Actividad antioxidante del isoespintanol y el timol en el semen equino criopreservado. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 29(1), 205–216. https://doi.org/10.15381/rivep.v29i1.14253Tejera M, I., Usuga S, A., Restrepo R, O., Restrepo B, G, & Gomez O, J. (2021). Congelación de semen canino en presencia de isoespintanol y ergotioneína: efecto sobre la calidad espermática posdescongelación. RediCES. http://file:///D:/Descarga/348291-Article%20Text-239458-1-10-20211206.pdfCórdova Izquierdo, A., Guerra Liera, J. E., Villa Mancera, A., Olivares Pérez, J., Cansino Arroyo, G., Juárez Mosaqueda, M. D. L., & Pérez Gutiérrez, J. F. (2015). Congelación de embriones bovinos. Revista Complutense de Ciencias Veterinarias, 9(2). https://doi.org/10.5209/rev_rccv.2015.v9.n2.51041Rall, W. F. (1992). Cryopreservation of oocytes and embryos: methods and applications. Animal Reproduction Science, 28(1–4), 237–245. https://doi.org/10.1016/0378-4320(92)90110-yRodríguez, P., & Jiménez, C. (s/f). CRIOPRESERVACIÓN DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO. Org.co. http://www.scielo.org.co/pdf/rfmvz/v58n2/v58n2a05.pdfGarcía, J. L., Restrepo, S. J., Gómez, N., Moreno, E. R., Dubeibe, D. F. & Mogollón, E. M. (2017). Manual de procedimientos para la producción y vitrificación de embriones bovinos en laboratorio de reproducción animal. Servicio Nacional de Aprendizaje – SENA, Universidad Cooperativa de Colombia.Vajta, G., & Kuwayama, M. (2006). Improving cryopreservation systems. Theriogenology, 65(1), 236–244. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2005.09.026de Munck, N., & Vajta, G. (2017). Safety and efficiency of oocyte vitrification. Cryobiology, 78, 119–127. https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2017.07.009Santa Cruz P., C., Huanca L., W., Condori P., R., & Ampuero B., A. (2014). Uso de Macromoléculas sobre la Tasa de Maduración y Desarrollo Embrionario in vitro de Ovocitos Bovinos. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 25(4). https://doi.org/10.15381/rivep.v25i4.10799Restrepo Betancur, G., Chavarria Gutierrez, N., & Vasquez Araque, N. (2007). Effect of bovine calf serum supplementation for the in vitro maturation of bovine oocytes on their mitochondrial activity and embryo d. Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia, 2(2), 14–22. https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=321428098002Métodos, "., Congelaci, D. E., De, C., De Embriones, B., En, N., Líquido, "., José, E., Melendres, M., Fernando, G., Samaniego, V., Rafael, I. M. C., Oleas, V., Georgina, D., Moreno, I., Guillermo, I. M. C., Villa, F., Vicente, I. M. C., & Oleas, R. (s/f). Escuela superior politécnica de chimborazo facultad de ciencias pecuarias escuela de ingeniería zootécnica. Edu.ec. http://dspace.espoch.edu.ec/bitstream/123456789/2105/1/17T1103.pdfZullo, G., Albero, G., Neglia, G., de Canditiis, C., Bifulco, G., Campanile, G., & Gasparrini, B. (2016). L-ergothioneine supplementation during culture improves quality of bovine in vitro–produced embryos. Theriogenology, 85(4), 688–697. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.10.008Hartman, P. E. (1990). [32] Ergothioneine as antioxidant. Oxygen Radicals in Biological Systems Part B: Oxygen Radicals and Antioxidants, 310–318. https://doi.org/10.1016/0076-6879(90)86124-ePalma, G. A. (2018). Biotecnología de la Reproducción. Ediciones INTA. https://www.researchgate.net/publication/329567703_Produccion_in_vitro_de_embriones_bovinos.Peña J, M., Góngora O, A., & Estrada L, J. (2007). Factores de crecimiento en el desarrollo folicular, embionario temprano e implantación. Implicaciones en la producción de embriones bovinos. Revista MVZ Córdoba, 12(1). https://doi.org/10.21897/rmvz.439Herradón, P., Quintela, L, A., Becerra, J.J., Ruibal, S., & Fernández, M. (2007). Fecundación in vitro: alternativa para la mejora genética en bovinos. Producción animal, 15, p. 34. https://tspace.library.utoronto.ca/bitstream/1807/53061/1/la07027.pdf.López C, A., Olivera A, M., Ruiz C, T., & Tarazona M, A. (2007). Efecto del co-cultivo sobre el desarrollo temprano de embriones bovinos producidos in vitro. Revista MVZ Córdoba, 12(2). https://doi.org/10.21897/rmvz.428Robledo, J.M., Herrera, J., Cajero, M., Navarro, M.C., & García, A. (2009). Evaluación de dos medios de maduración in vitro para la producción de embriones ovinos. Tropical and Subtropical Agroecosystems, 10, p. 95 - 99. https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=93911243009.Ferré, L., & Cattaneo, L.. (2013). Biotecnologías reproductivas: producción in vitro de embriones y semen sexado. Medicina Veterinaria, 2, pp. 28 - 36. https://www.produccion-animal.com.ar/informacion_tecnica/transplante_embrionario/38-biotecnologias.pdf.Rodríguez, P y Jiménez, C. (2011). Criopreservación de embriones bovinos producidos in vitro. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA.Celestinos, M., & Gatica, R. (2002). Vitrificación como técnica de crioconservación de embriones bovinos. Archivos de medicina veterinaria, 34(2). https://doi.org/10.4067/s0301-732x2002000200002Cabrera, P., & Fernández, A. (2006). Criopreservación de embriones: una herramienta básica en la Reproducción Asistida. Facultad de Ciencias Veterinarias, UCV, 47.Guerra, R.; Solis, A., Sandoya, G., & de Armas, R. (2012). Evaluación de tres protocolos de criopreservación de embriones bovinos obtenidos in vivo e in vitro. REDVET, 13(10). https://www.redalyc.org/comocitar.oa?id=63624631005.Sanches, B. (2015). Obtenção de prenhezes em rebanhos bovinos a partir de embriões produzidos in vitro criopreservados por vitrificação ou transferência direta. Universidad estatal de Londrina, p. 13.Segura, J., & Montes, R. (2001). Reasons and strategies for the conservation of animal genetic resources. Rev. Biomed, 12(3), pp. 196 - 206.B, Sanches., L, Marinho., B,. Filho., J, Pontes., A, Basso., M, Meirinhos., K, Silva-Santos., C, Ferreira., & M, Seneda. (2013). Cryosurvival and pregnancy rates after exposure of IVF-derived Bos indicus embryos to forskolin before vitrification. Elsevier, p. 373.J. Caínzos, M. Barrio, S. Ruibal, J.J. Becerra, L.A. Quintela1 y P.G. Herradón. (2013). Efecto de la suplementación con suero fetal bovino (FCS), albúmina sérica bovina (BSA) y polivinil pirrolidona (PVP) en el medio de maduración in vitro de los ovocitos bovinos. ITEA, 109(1), pp. 25 – 32. https://www.researchgate.net/publication/265550077_Efecto_de_la_suplementacion_con_suero_fetal_bovino_FCS_albumina_serica_bovina_BSA_y_polivinil_pirrolidona_PVP_en_el_medio_de_maduracion_in_vitro_de_los_ovocitos_bovinos#fullTextFileContent.Limache Coaquera, T. (2015). Efecto de la adición de fluido folicular al medio de maduración de ovocitos para la producción In vitro de embriones de bovino (Bos taurus). Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann.Castrillón Martínez, Diana Carolina. (2017). Caracterización de las sericina de seda colombiana con miras a ser incorporada como ingrediente en una matriz alimentaria. Universidad Pontificia Bolivariana.Do, L., Namula, Z., Luu, V., Sato, Y., Taniguchi, M., Isobe, T., Kikuchi, K. y Otoi, T. (2014), Efecto de la suplementación con sericina durante in vitro Maduración en la maduración, fertilización y desarrollo de ovocitos porcinos. Reprod Dom Anim, 49: e17-e20. doi: 10.1111 / rda.12274Misa Hosoe, N. Y. (2014). La sericina acelera la producción de hialuronano y disminuye la incidencia de fertilización por poliespermia en ovocitos bovinos durante la maduración in vitro. Revisa de Reproduccion y Desarrollo.El-Fakharany, E. M., Abu-Elreesh, G. M., Kamoun, E. A., Zaki, S., & Abd-EL-Haleem, D. A. (2020). In vitro assessment of the bioactivities of sericin protein extracted from a bacterial silk-like biopolymer. RSC Advances, 10(9), 5098–5107. https://doi.org/10.1039/c9ra09419aIsobe, T., Ikebata, Y., Onitsuka, T., Wittayarat, M., Sato, Y., Taniguchi, M., & Otoi, T. (2012). Effect of sericin on preimplantation development of bovine embryos cultured individually. Theriogenology, 78(4), 747–752. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2012.03.021Isobe, T., Ikebata, Y., Onitsuka, T., Do, L. T. K., Sato, Y., Taniguchi, M., & Otoi, T. (2013). Cryopreservation for bovine embryos in serum-free freezing medium containing silk protein sericin. Cryobiology, 67(2), 184–187. https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2013.06.010Pandey, K. B., & Rizvi, S. I. (2011). Anti-oxidative action of resveratrol: Implications for human health. Arabian Journal of Chemistry, 4(3), 293–298. https://doi.org/10.1016/j.arabjc.2010.06.049Hussein, M.A., 2011. A convenient mechanism for the free radical scavenging activity of resveratrol. International Journal of Phytomedicine, 3(4), pp.459–469.Zullo, Gianluigi. (2015). Natural antioxidants during in vitro culture improve embryo quality in cattle. Università degli Studi di Napoli Federico II. https://doi.org/10.6092/UNINA/FEDOA/10174Harvey, A. J., Kind, K. L., & Thompson, J. G. (2002). REDOX regulation of early embryo development. Reproduction, 123(4), 479–486. https://doi.org/10.1530/rep.0.1230479Goto, Y., et al., Increased generation of reactive oxygen species in embryos cultured in vitro. Free Radical Biology and Medicine, 1993. 15(1): p. 69-75.Lee, H.C. and Y.H. Wei, Oxidative stress, mitochondrial DNA mutation, and apoptosis in aging. Exp Biol Med (Maywood). 2007. 232(5). p. 592-606.Gutteridge, J.M. and B. Halliwell, Iron toxicity and oxygen radicals. Baillieres Clin Haematol., 1989. 2(2): p. 195-256.Khalil, W.A., W.F.A. Marei, and M. Khalid, Protective effects of antioxidants on linoleic acid-treated bovine oocytes during maturation and subsequent embryo development. Theriogenology. 80(2): p. 161-168.Ali, A.A., J.F. Bilodeau, and M.A. Sirard, Antioxidant requirements for bovine oocytes varies during in vitro maturation, fertilization and development. Theriogenology, 2003. 59(3-4): p. 939-49.Li, X. X., Lee, K. B., Lee, J. H., Kim, K. J., Kim, E. Y., Han, K. W., Park, K. S., Yu, J., & Kim, M. K. (2014). Glutathione and cysteine enhance porcine preimplantation embryo development in vitro after intracytoplasmic sperm injection. Theriogenology, 81(2), 309–314. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2013.09.030Abeydeera, L.R., et al., Presence of beta-mercaptoethanol can increase the glutathione content of pig oocytes matured in vitro and the rate of blastocyst development after in vitro fertilization. Theriogenology, 1998. 50(5): p. 747-56.Michael, A., et al., Effect of antioxidant supplementation on semen quality and reactive oxygen species of frozen-thawed canine spermatozoa. Theriogenology. 68(2): p. 204-212.Olfati Karaji, R., Daghigh Kia, H., & Ashrafi, I. (2014). Effects of in combination antioxidant supplementation on microscopic and oxidative parameters of freeze–thaw bull sperm. Cell and Tissue Banking, 15(3), 461–470. https://doi.org/10.1007/s10561-013-9412-yCastillo-Martín, M., Yeste, M., Soler, A., Morató, R., & Bonet, S. (2015). Addition of L-ascorbic acid to culture and vitrification media of IVF porcine blastocysts improves survival and reduces HSPA1A levels of vitrified embryos. Reproduction, Fertility and Development, 27(7), 1115. https://doi.org/10.1071/rd14078Bormann, C. L., Ongeri, E., & Krisher, R. L. (2003). The effect of vitamins during maturation of caprine oocytes on subsequent developmental potential in vitro. Theriogenology, 59(5–6), 1373–1380. https://doi.org/10.1016/s0093-691x(02)01181-0Guemra, S., Monzani, P., Santos, E., Zanin, R., Ohashi, O., Miranda, M., & Adona, P. (2013). Maturação in vitro de oócitos bovinos em meios suplementados com quercetina e seu efeito sobre o desenvolvimento embrionário. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, 65(6), 1616–1624. https://doi.org/10.1590/s0102-09352013000600005Bernal, B., Tribulo, B., Mutto, H., Adrián A., & Almicar, G. (2016). Influencia de la suplementacion delmedio de maduracion y de cultivo en lasupervivencia a la criopreservacion deembriones bovinos in vitro. RedVet, 18(11), p.p 1 – 11.Rojano, B., Gaviria, C., Gil, M., Saez, J., Schinella, G., & Tournier, H. (2008). Actividad antioxidante del isoespintanol en diferentes medios. Revista de la Facultad de Química Farmaceutica, Universidad de Antioquia, p. 173-181.Gastaldi, B., Silvia, B., & Catalán, C. (2019). Análisis de los compuestos fenólicos y volátiles de plantas medicinales y aromáticas del noroeste de la Patagonia Argentina, estudio de las actividades antioxidante y citotóxica. Conicet.De Wit, A., Wurth, Y., & Kruip, T. 2000. Effect of ovarian phase and follicle quality on morphology and developmental capacity of the bovine cumulus-oocyte complex. Journal of Animal Science, 78(5), pp.1277–1283.Newcombe, R. G. (1998). Interval estimation for the difference between indpendente proportions: comparison of eleven methods. Statistics in Medicine. 17, p.p 873-890.Lino, A. A., Chasi, B. E. (2021). Efecto de dos medios de maduración sobre la producción de embriones partenogenéticos en bovinos. Escuela Agrícola Panamericana, Zamorano.Maturana, D., Gómez O., J., & Restrepo B., G. (2019). Efecto de la quercetina sobre la tasa de desarrollo y la viabilidad de embriones bovinos producidos in vitro. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 30(2), 775–786. https://doi.org/10.15381/rivep.v30i2.16181Espin, P., (2018). Maduración de ovocitos bovinos con dos medios de maduración diferentes. Universidad Politécnica Salesiana.García-Díaz, J.R., Romero-Aguirregomezcorta, J, Astiz Blanco, S, & Ruiz López, S. (2013). Adición de sustancias antioxidantes en los medios de cultivo empleados en la producción in vitro de embriones en mamíferos. Revista de Salud Animal, 35(1), p.p 10-19.Do, L., Namula, Z., Luu, V., Sato, Y., Taniguchi, M., Isobe, T., Kikuchi, K., & Otoi, T. (2014). Effect of Sericin Supplementation DuringIn VitroMaturation on the Maturation, Fertilization and Development of Porcine Oocytes. Reproduction in Domestic Animals, 49(2), e17-e20. https://doi.org/10.1111/rda.12274Restrepo Betancur, G., & Rojano, B. A. (2017). Efecto del isoespintanol y el timol en la actividad antioxidante de semen equino diluido con fines de congelación. Revista de Medicina Veterinaria, 35, 149–158. https://doi.org/10.19052/mv.4397Mona Ghasemi M.Sc., Abbas Farshad Ph.D., Hadi Hajarian Ph.D., Omid Banafshi M.Sc., Vahideh Asadollahi M.Sc., Fardin Fathi Ph.D. (2018). The effects of sericin on cryopreserved sperm cells and subsequent embryo development in mice. Int J Reprod BioMed Vol. 16. No. 6. p.p 405-412.Sasaki, M., Kato, Y., Yamada, H., & Terada, S. (2005). Development of a novel serum-free freezing medium for mammalian cells using the silk protein sericin. Biotechnology and Applied Biochemistry, 42(Pt 2), 183–188. https://doi.org/10.1042/BA20050019Restrepo, G., Usuga, A., Montoya, J., Rojas, M., & Rojano, B. (2018). Flow cytometric analysis of stallion semen frozen with isoespintanol. CRYO 2020.Restrepo, G., Usuga, A., Montoya, J., Rojas, M., & Rojano, B. (2020). Isoespintanol effect on freezing of stallion semen. Revista Acovez, Vol. 49, N° 3. ISSN0120-1530.Miyamoto, Y., Oishi, K., Yukawa, H., Noguchi, H., Sasaki, M., Iwata, H., & Hayashi, S. (2012). Cryopreservation of human adipose tissue-derived stem/progenitor cells using the silk protein sericin. Cell Transplantation, 21(2–3), 617–622. https://doi.org/10.3727/096368911X605556Madrid, S.(2016). Efecto del resveratrol sobre la criotolerancia de embriones bovinos in vitro. Universidad Nacional de Colombia.Avendaño Arteaga, Y., Hincapié Llanos, G. A., Castrillón Martínez, D., Cardona Aristizábal, M., Barajas Gamboa, J. A., & Álvarez López, C. (2018). Propiedades de la sericina de seda colombiana. Revista Lasallista de Investigación, 15(1), 57–66. https://doi.org/10.22507/rli.v15n1a5Correa-Rivero, H., Díaz-Casañas, E., Bernal Veitia, O., & Malvarez Fernández, Y. (2020). Determinación de la estabilidad e irritabilidad del hidrolizado de sericina. Revista Colombiana de Ciencias Químico-Farmacéuticas, 49(2). https://doi.org/10.15446/rcciquifa.v49n2.88917Hajarian, H., Aghaz, F., & Karami Shabankareh, H. (2017). Replacement of serum with sericin in vitro maturation and culture media: Effects on embryonic developmental competence of Sanjabi sheep embryo during breeding season. Theriogenology, 92, 144–148. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2016.12.027Quintanilla M., L., Huanca L., W., Córdova G., A., Ampuero B., A., & Benavides I., L. (2015). Efecto de la Suplementación del Medio de Maduración con Cisteamina y de Dos Medios de Cultivo (KSOMaa y SOF) en la Fecundación in vitro de Ovocitos Bovinos. Revista de investigaciones veterinarias del Peru, 26(3), 462. https://doi.org/10.15381/rivep.v26i3.11178Ferreira, I. (2014). La controversia en torno a los antioxidantes y los prooxidantes. Nutri-Facts.Sudano, M. J., Paschoal, D. M., da Silva Rascado, T., Magalhães, L. C. O., Crocomo, L. F., de Lima-Neto, J. F., & da Cruz Landim-Alvarenga, F. (2011). Lipid content and apoptosis of in vitro-produced bovine embryos as determinants of susceptibility to vitrification. Theriogenology, 75(7), 1211–1220. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2010.11.033Crosier, A. E., Farin, P. W., Dykstra, M. J., Alexander, J. E., & Farin, C. E. (2000). Ultrastructural Morphometry of Bovine Compact Morulae Produced In Vivo or In Vitro1. Biology of Reproduction, 62(5), 1459–1465. https://doi.org/10.1095/biolreprod62.5.1459Kuzmany, A., Havlicek, V., Wrenzycki, C., Wilkening, S., Brem, G., & Besenfelder, U. (2011). Expression of mRNA, before and after freezing, in bovine blastocysts cultured under different conditions. Theriogenology, 75(3), 482–494. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2010.09.016Garcia, S. M., Marinho, L. S. R., Lunardelli, P. A., Seneda, M. M., & Meirelles, F. V. (2015). Developmental block and programmed cell death in Bos indicus embryos: Effects of protein supplementation source and developmental kinetics. PloS One, 10(3), e0119463. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0119463Magalhães, R., Guaitolini, C. R. de F., Tramontin, M. L. D., Sestari, D. A. O., Barros, B. A. de, Elias, A. S. de L., Araujo, A. L., Giosa, D. C., Trindade, A. B., & Maziero, R. R. D. (2021). Evaluation of in vitro production rates of bovine embryos using melatonin-supplemented culture medium. Research, Society and Development, 10(6), e19010615544. https://doi.org/10.33448/rsd-v10i6.15544De Wit, a. a C., Wurth, Y. a. & amp; Kruip, T. a M., 2000. Effect of ovarian phase and follicle quality on morphology and developmental capacity of the bovine cumulus-oocyte complex. Journal of Animal Science, 78(5), pp.1277–1283.Dode, M. a N. et al., 2002. The effect of sperm preparation and co-incubation time on in vitro fertilization of bos indicus oocytes. Animal Reproduction Science, 69(1–2), pp.15–23.EstudiantesInvestigadoresMaestrosLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-85879https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/82309/1/license.txteb34b1cf90b7e1103fc9dfd26be24b4aMD51ORIGINAL1152196822.2022.pdf1152196822.2022.pdfTesis de Maestría en Ciencias - Biotecnologíaapplication/pdf901271https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/82309/3/1152196822.2022.pdf2d121aac9268741b8f84b0745cbf14d0MD53THUMBNAIL1152196822.2022.pdf.jpg1152196822.2022.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4951https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/82309/4/1152196822.2022.pdf.jpgfd7c66f3d0591959d6876402284ab013MD54unal/82309oai:repositorio.unal.edu.co:unal/823092023-08-09 23:04:21.377Repositorio Institucional Universidad Nacional de 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