Efecto angiogénico de los medios condicionados por células madre, en el trasplante de aloinjerto óseo diafisario (Modelo Animal)

INTRODUCCION: Actualmente el manejo de los defectos óseos continua siendo un reto para el cirujano ortopedista quien a pesar de la introducción de nuevas técnicas quirúrgicas para el manejo de la patología de origen multifactorial, aun se ve limitado en los resultados postoperatorios y funcionales....

Full description

Autores:: Castro Gaona, Ricardo Alfonso

Tipo de recurso:: Trabajo de grado de pregrado

Fecha de publicación:: 2016

Institución:: Universidad Nacional de Colombia

Repositorio:: Universidad Nacional de Colombia

Idioma:: spa

Description
Summary:	INTRODUCCION: Actualmente el manejo de los defectos óseos continua siendo un reto para el cirujano ortopedista quien a pesar de la introducción de nuevas técnicas quirúrgicas para el manejo de la patología de origen multifactorial, aun se ve limitado en los resultados postoperatorios y funcionales. Con el progreso en el conocimiento de las células madre y el mejor entendimiento de la función y los efectos de la célula mesenquimal , sus capacidades de diferenciación y paracrinas, planteamos la posibilidad de la utilización de éstas dentro del arsenal terapéutico para el manejo de defectos óseos segmentarios. Evaluamos el potencial de los medios condicionados CM por células madre mesenquimales derivadas del tejido adiposo Ad-MCS, como facilitador en el proceso de integración de aloinjertos estructurales diafisarios no vascularizados mediante la promoción de la angiogénesis y consideramos la posibilidad de su utilización dentro del arsenal terapéutico para el manejo de defectos óseos segmentarios. METODOS: Ocho conejos blancos de raza Nueva Zelanda fueron intervenidos quirúrgicamente para realizar la reconstrucción de un defecto óseo diafisario intercalar de 1.5 cm. El primer grupo utilizamos aloinjertos congelados (n=4) y en el segundo aloinjertos congelados + medios condicionados (MC) por células madre mesenquimales (MSC) obtenidas de tejido adiposo humano (Ad-MCS) (n=4) ; fueron observados por 12 semanas. Dos conejos fueron sacrificados al inicio del estudio para utilizar los fémures como aloinjertos donantes. Un segmento cortical diafisario de 1.5 cm fue osteotomizado y luego fijado con ayuda de un tutor externo (diseñado por los autores) compuesto por 4 clavos roscados al hueso. Los aloinjertos fueron despojados del periostio, tejidos blandos adyacentes y del contenido medular, y luego almacenados en bolsas estériles al vacío a -4 °C durante cuatro semanas antes del trasplante. 12 ml de Hidrogel fueron preparados a partir de plasma fresco humano como andamio biodegradable del implante para contener los Medios Condicionados (MC) por Células madre mesenquimales (MCS) de tejido adiposo (Ad-MCS). El Hidrogel con los MC es implantado en el canal medular del aloinjerto y en la superficie cortical en el momento de la reconstrucción femoral del grupo correspondiente. Los conejos fueron sacrificados a la semana 12 y los especímenes analizados macroscópicamente para valorar la integración entre huésped – injerto y la estabilidad de las uniones, también se analizó la formación de callo mediante radiografías control y finalmente practicó un estudio histológico mediante coloración básica H-E y con inmunohistoquimica CD34 y CD31 para evaluar la vitalidad del tejido óseo del huésped y el aloinjerto , la presencia de resorción ósea, neoformación de hueso y tejido fibrovascular además de la densidad de los vasos en el injerto comparándola con hueso no intervenido. RESULTADOS. Se valoraron los 4 especímenes de cada grupo a las 12 semanas. Se encontró formación de callo óseo redundante macroscópica y radiológicamente en la mayoría de especímenes del Grupo B (Aloinjerto + Medios Condicionados) al compararlos con las características de consolidación del Grupo A. Sin embargo, se presentó un caso de aflojamiento del material de fijación asociado a infección en un espécimen de cada grupo. Todos los índices de vitalidad del injerto (formación de osteoide, encapsulamiento del callo y osteocitos vitales en el aloinjerto) fueron significativamente mayores en el grupo de aloinjerto con MC de Ad-MCS en la valoración histológica con H-E. La densidad de los vasos en el aloinjerto y en las zonas de consolidación no fue cuantificable, sin embargo la densidad de tejido positivo para la inmunohistoquímica con CD31 – CD34, fue significativamente mayor en el Grupo B. CONCLUSION. Los aloinjertos con MC de Ad-MCS aumentaron el potencial de integración con el hueso nativo y los índices de vitalidad del aloinjerto. Los marcadores de inmunohistoquimica CD31 y CD34 no permiten cuantificar la densidad vascular por falta de especificidad tisular, sin embargo la mayor captación de contraste en los casos del grupo con MC de Ad-MCS (Grupo B) indica un ambiente enriquecido por una respuesta celular mayor en el sitio de consolidación.

Efecto angiogénico de los medios condicionados por células madre, en el trasplante de aloinjerto óseo diafisario (Modelo Animal)

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