Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia

En este trabajo, se diseñaron con ayuda de herramientas bioinformáticas cuatro secuencias análogas a la catelicidina humana LL-37, (LL37-1, LL37-2, LL37-3 y LL37-4) con el fin de probar su actividad anti-biopelícula en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp, caracterizadas genotípica (identific...

Full description

Autores:
Guevara Agudelo, Fredy Alexander
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2017
Institución:
Universidad Nacional de Colombia
Repositorio:
Universidad Nacional de Colombia
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unal.edu.co:unal/59583
Acceso en línea:
https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/59583
http://bdigital.unal.edu.co/57143/
Palabra clave:
6 Tecnología (ciencias aplicadas) / Technology
61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and health
Péptidos antimicrobianos
Catelicidina Humana LL-37
Biopelículas
Staphylococcus
Diseño bioinformático
Antimicrobial peptides
Biofilm
Bioinformatic design
Rights
openAccess
License
Atribución-NoComercial 4.0 Internacional
id UNACIONAL2_8ae4c65dd7f3f0fe01242f0d756904a9
oai_identifier_str oai:repositorio.unal.edu.co:unal/59583
network_acronym_str UNACIONAL2
network_name_str Universidad Nacional de Colombia
repository_id_str
dc.title.spa.fl_str_mv Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia
title Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia
spellingShingle Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia
6 Tecnología (ciencias aplicadas) / Technology
61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and health
Péptidos antimicrobianos
Catelicidina Humana LL-37
Biopelículas
Staphylococcus
Diseño bioinformático
Antimicrobial peptides
Biofilm
Bioinformatic design
title_short Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia
title_full Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia
title_fullStr Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia
title_full_unstemmed Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia
title_sort Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia
dc.creator.fl_str_mv Guevara Agudelo, Fredy Alexander
dc.contributor.advisor.spa.fl_str_mv Muñoz Molina, Liliana (Thesis advisor)
dc.contributor.author.spa.fl_str_mv Guevara Agudelo, Fredy Alexander
dc.contributor.spa.fl_str_mv Salazar Pulido, Luz Mary
dc.subject.ddc.spa.fl_str_mv 6 Tecnología (ciencias aplicadas) / Technology
61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and health
topic 6 Tecnología (ciencias aplicadas) / Technology
61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and health
Péptidos antimicrobianos
Catelicidina Humana LL-37
Biopelículas
Staphylococcus
Diseño bioinformático
Antimicrobial peptides
Biofilm
Bioinformatic design
dc.subject.proposal.spa.fl_str_mv Péptidos antimicrobianos
Catelicidina Humana LL-37
Biopelículas
Staphylococcus
Diseño bioinformático
Antimicrobial peptides
Biofilm
Bioinformatic design
description En este trabajo, se diseñaron con ayuda de herramientas bioinformáticas cuatro secuencias análogas a la catelicidina humana LL-37, (LL37-1, LL37-2, LL37-3 y LL37-4) con el fin de probar su actividad anti-biopelícula en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp, caracterizadas genotípica (identificación de los genes operón IcaRADBC) y fenotípicamente (formación de biopelícula y perfil de resistencia). Los péptidos fueron sintetizados usando la estrategia de Fmoc, se purificaron por RP-HPLC y se caracterizaron por espectrometría de masas MALDI-TOF MS. Los ensayos in vitro de la actividad antibiopelícula por cabina de flujo continuo celular muestran que una concentración de 5 µM fue suficiente para inhibir la formación de biopelícula de Staphylococcus spp; mientras que, en ensayos estáticos por cristal violeta se necesitó una concentración entre 25-50 µM. Además se evaluó el posible efecto deletreo de las secuencias peptídicas mediante la liberación de la enzima Lactato Deshidrogenasa (LDH) en células humanas y su actividad hemolítica. Según los resultados de citotoxicidad, a una concentración de 6,125 µM se presentó un nulo efecto hemolítico, incluso a concentraciones elevadas de (100 µM) y un bajo porcentaje de citotoxicidad (menor al 10%) en PBMCs. Por lo anterior, el uso de péptidos análogos de la catelicidina representa una alternativa promisoria para tratar infecciones asociadas a la biopelícula.
publishDate 2017
dc.date.issued.spa.fl_str_mv 2017
dc.date.accessioned.spa.fl_str_mv 2019-07-02T16:22:58Z
dc.date.available.spa.fl_str_mv 2019-07-02T16:22:58Z
dc.type.spa.fl_str_mv Trabajo de grado - Maestría
dc.type.driver.spa.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
dc.type.version.spa.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
dc.type.content.spa.fl_str_mv Text
dc.type.redcol.spa.fl_str_mv http://purl.org/redcol/resource_type/TM
status_str acceptedVersion
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/59583
dc.identifier.eprints.spa.fl_str_mv http://bdigital.unal.edu.co/57143/
url https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/59583
http://bdigital.unal.edu.co/57143/
dc.language.iso.spa.fl_str_mv spa
language spa
dc.relation.ispartof.spa.fl_str_mv Universidad Nacional de Colombia Sede Bogotá Institutos Interfacultades Instituto de Genética
Instituto de Genética
dc.relation.references.spa.fl_str_mv Guevara Agudelo, Fredy Alexander (2017) Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia-Sede Bogotá.
dc.rights.spa.fl_str_mv Derechos reservados - Universidad Nacional de Colombia
dc.rights.coar.fl_str_mv http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.rights.license.spa.fl_str_mv Atribución-NoComercial 4.0 Internacional
dc.rights.uri.spa.fl_str_mv http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
dc.rights.accessrights.spa.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Atribución-NoComercial 4.0 Internacional
Derechos reservados - Universidad Nacional de Colombia
http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv application/pdf
institution Universidad Nacional de Colombia
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/59583/1/FredyA.GuevaraAgudelo.2017.pdf
https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/59583/2/FredyA.GuevaraAgudelo.2017.pdf.jpg
bitstream.checksum.fl_str_mv 8cd7d2b06b1d00679df9670fdeb6ca85
63c5de346d5c2f0f6f42c9d7ed0db1ae
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositorio Institucional Universidad Nacional de Colombia
repository.mail.fl_str_mv repositorio_nal@unal.edu.co
_version_ 1814090203823865856
spelling Atribución-NoComercial 4.0 InternacionalDerechos reservados - Universidad Nacional de Colombiahttp://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Salazar Pulido, Luz MaryMuñoz Molina, Liliana (Thesis advisor)3747e904-4063-4418-9fdc-1ac8b8e8dc26-1Guevara Agudelo, Fredy Alexander95bfa663-7c76-496d-a189-a25a97c36b153002019-07-02T16:22:58Z2019-07-02T16:22:58Z2017https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/59583http://bdigital.unal.edu.co/57143/En este trabajo, se diseñaron con ayuda de herramientas bioinformáticas cuatro secuencias análogas a la catelicidina humana LL-37, (LL37-1, LL37-2, LL37-3 y LL37-4) con el fin de probar su actividad anti-biopelícula en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp, caracterizadas genotípica (identificación de los genes operón IcaRADBC) y fenotípicamente (formación de biopelícula y perfil de resistencia). Los péptidos fueron sintetizados usando la estrategia de Fmoc, se purificaron por RP-HPLC y se caracterizaron por espectrometría de masas MALDI-TOF MS. Los ensayos in vitro de la actividad antibiopelícula por cabina de flujo continuo celular muestran que una concentración de 5 µM fue suficiente para inhibir la formación de biopelícula de Staphylococcus spp; mientras que, en ensayos estáticos por cristal violeta se necesitó una concentración entre 25-50 µM. Además se evaluó el posible efecto deletreo de las secuencias peptídicas mediante la liberación de la enzima Lactato Deshidrogenasa (LDH) en células humanas y su actividad hemolítica. Según los resultados de citotoxicidad, a una concentración de 6,125 µM se presentó un nulo efecto hemolítico, incluso a concentraciones elevadas de (100 µM) y un bajo porcentaje de citotoxicidad (menor al 10%) en PBMCs. Por lo anterior, el uso de péptidos análogos de la catelicidina representa una alternativa promisoria para tratar infecciones asociadas a la biopelícula.Abstract. In this work, four sequences analogous to human cathelicidin LL-37 (LL37-1, LL37- 2, LL37-3 and LL37-4) were designed with the help of bioinformatic tools in order to test their anti-biofilm activity in Clinical isolates of Staphylococcus spp, characterized genotypic (identification of genes operon IcaRADBC) and phenotypically (biofilm formation and resistance profile). Peptides were synthesized using the Fmoc strategy, purified by RP-HPLC and characterized by MALDI-TOF MS mass spectrometry. In vitro assays of the antibiotic activity by continuous cell flow showed that a concentration of 5 μM was sufficient to inhibit the biofilm formation of Staphylococcus spp; while in static crystal violet tests a concentration between 25-50 μM was required. In addition, the possible spelling effect of the peptide sequences was evaluated by the release of the enzyme Lactate Dehydrogenase (LDH) in human cells and their hemolytic activity. According to the cytotoxicity results, at a concentration of 6,125 μM there was no hemolytic effect, even at high concentrations of (100 μM) and a low percentage of cytotoxicity (less than 10%) in PBMCs. Therefore, the use of analogous peptides of cathelicidine represents a promising alternative to treat infections associated with the biofilm.Maestríaapplication/pdfspaUniversidad Nacional de Colombia Sede Bogotá Institutos Interfacultades Instituto de GenéticaInstituto de GenéticaGuevara Agudelo, Fredy Alexander (2017) Evaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá Colombia. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia-Sede Bogotá.6 Tecnología (ciencias aplicadas) / Technology61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and healthPéptidos antimicrobianosCatelicidina Humana LL-37BiopelículasStaphylococcusDiseño bioinformáticoAntimicrobial peptidesBiofilmBioinformatic designEvaluación de la actividad antibiopelícula de péptidos sintéticos análogos a catelicidina humana LL-37 en aislamientos clínicos de Staphylococcus spp. en Bogotá ColombiaTrabajo de grado - Maestríainfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionTexthttp://purl.org/redcol/resource_type/TMORIGINALFredyA.GuevaraAgudelo.2017.pdfapplication/pdf2826026https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/59583/1/FredyA.GuevaraAgudelo.2017.pdf8cd7d2b06b1d00679df9670fdeb6ca85MD51THUMBNAILFredyA.GuevaraAgudelo.2017.pdf.jpgFredyA.GuevaraAgudelo.2017.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4432https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/59583/2/FredyA.GuevaraAgudelo.2017.pdf.jpg63c5de346d5c2f0f6f42c9d7ed0db1aeMD52unal/59583oai:repositorio.unal.edu.co:unal/595832023-04-02 23:06:29.919Repositorio Institucional Universidad Nacional de Colombiarepositorio_nal@unal.edu.co