Inmunodetección de anticuerpos anti-insulina libres en suero y unidos a la molécula de insulina en pacientes insulino-dependientes

El uso de la terapia insulínica como tratamiento para la Diabetes, basado en la administración de Insulina Exógena (IE) de origen animal –con alta homología a la insulina humana, a nivel de la secuencia proteica, se asoció en sus inicios con la prevalencia de Anticuerpos Anti-Insulina (AAI) [1, 2],...

Full description

Autores:
Domínguez Romero, Leidy Yohana
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2014
Institución:
Universidad Nacional de Colombia
Repositorio:
Universidad Nacional de Colombia
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unal.edu.co:unal/21666
Acceso en línea:
https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/21666
http://bdigital.unal.edu.co/12635/
Palabra clave:
61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and health
Anticuerpos anti-insulina
Insulina exógena
Diabetes y ELISA
Anti-insulin antibodies
Exogenous insulin
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openAccess
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Atribución-NoComercial 4.0 Internacional
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description El uso de la terapia insulínica como tratamiento para la Diabetes, basado en la administración de Insulina Exógena (IE) de origen animal –con alta homología a la insulina humana, a nivel de la secuencia proteica, se asoció en sus inicios con la prevalencia de Anticuerpos Anti-Insulina (AAI) [1, 2], relacionados a su vez con alteraciones en la seguridad y eficacia de estas formulaciones [3-6]. Con la aparición de insulinas de origen recombinante –bajo la premisa de la identidad con la secuencia humana, aunque se redujo la presencia de AAI no se eliminó plenamente su generación [7-9]. Con el objetivo de evaluar el perfil inmunogénico de tres formulaciones comerciales de IE (Insulina Regular, NPH y Glargina), en este trabajo, se estandarizó la técnica de ELISA indirecta y de captura para la detección de AAI libres y Complejos Inmunes (CI), respectivamente. Con las técnicas ya estandarizadas, se logró su aplicación en la valoración de 29 sueros de voluntarios con terapia insulínica para luego correlacionar la presencia de AAI con parámetros bioquímicos como glicemia, insulinemia y porcentaje de Hemoglobina glicosilada (HbAc1). Con el desarrollo de este trabajo se logró evidenciar que: i) Cada formulación de insulina es reconocida de manera diferencial por los AAI sugiriendo una mayor potencial inmunogénico de NPH y menor de Glargina, ii) El perfil de isotipo IgG de los AAI en humanos es diferencial para cada formulación, siendo predominante el isotipo IgG3 para la insulina NPH, en voluntarios bajo tratamiento con Insulinas Regular-NPH, iii) La presencia de AAI no se asocia con alteraciones de los parámetros metabólicos analizados en este estudio, y iv) Los CI constituidos por AAI-IE no se detectaron en los sueros de los voluntarios diabéticos.
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Con la aparición de insulinas de origen recombinante –bajo la premisa de la identidad con la secuencia humana, aunque se redujo la presencia de AAI no se eliminó plenamente su generación [7-9]. Con el objetivo de evaluar el perfil inmunogénico de tres formulaciones comerciales de IE (Insulina Regular, NPH y Glargina), en este trabajo, se estandarizó la técnica de ELISA indirecta y de captura para la detección de AAI libres y Complejos Inmunes (CI), respectivamente. Con las técnicas ya estandarizadas, se logró su aplicación en la valoración de 29 sueros de voluntarios con terapia insulínica para luego correlacionar la presencia de AAI con parámetros bioquímicos como glicemia, insulinemia y porcentaje de Hemoglobina glicosilada (HbAc1). Con el desarrollo de este trabajo se logró evidenciar que: i) Cada formulación de insulina es reconocida de manera diferencial por los AAI sugiriendo una mayor potencial inmunogénico de NPH y menor de Glargina, ii) El perfil de isotipo IgG de los AAI en humanos es diferencial para cada formulación, siendo predominante el isotipo IgG3 para la insulina NPH, en voluntarios bajo tratamiento con Insulinas Regular-NPH, iii) La presencia de AAI no se asocia con alteraciones de los parámetros metabólicos analizados en este estudio, y iv) Los CI constituidos por AAI-IE no se detectaron en los sueros de los voluntarios diabéticos.Abstract. The administration of Exogenous Insulin (EI) from animal source –based in the high homology with the human protein sequence, in the Insulin-therapy for Diabetes treatment, it was associated in its beginnings with the prevalence of Anti-Insulin antibodies (AAI) [1, 2], which was regarded to some changes in the safety and efficacy of these formulations [3-6]. The discovering of the human recombinant insulins –under the base of the identity with the human sequence, decreased the presence of IAA, however, these antibodies were not eliminated completely [7-9]. In order to evaluate the immunogenic profiles of three commercial EI formulations (Regular, NPH and Glargina Insulins), in this work, we standardized both ELISA assays, the indirect and the capture, for the detection of free IAA and Immune Complexes (IC), respectively. Using these standardized techniques, 29 sera samples from volunteers under insulin-therapy were evaluated, analyzing the presence of AIAs, subsequently the data was correlated with the biochemical parameters such as blood glucose, insulin and glycosylated hemoglobin percentage (HbAc1). With this study we have evidenced: i) Each formulation of insulin is recognized differentially by AAI, suggesting a higher immunogenic potential of NPH Insulin compared with Glargine Insulin –lower level of AAI, ii ) The IgG isotype profile of IAAs in humans, is differential towards each formulation, the IgG3 isotype is predominant for the NPH formulation in volunteers treated with Regular- NPH insulins, iii ) The presence of AAI is not associated with alterations in the metabolic parameters analyzed here, and iv) The IC constituted by AAI-EI were not detected in sera of diabetic volunteers.Maestríaapplication/pdfspaUniversidad Nacional de Colombia Sede Bogotá Facultad de MedicinaFacultad de MedicinaDomínguez Romero, Leidy Yohana (2014) Inmunodetección de anticuerpos anti-insulina libres en suero y unidos a la molécula de insulina en pacientes insulino-dependientes. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia.61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and healthAnticuerpos anti-insulinaInsulina exógenaDiabetes y ELISAAnti-insulin antibodiesExogenous insulinInmunodetección de anticuerpos anti-insulina libres en suero y unidos a la molécula de insulina en pacientes insulino-dependientesTrabajo de grado - Maestríainfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionTexthttp://purl.org/redcol/resource_type/TMORIGINALLeidyyohanadominguez .2014.pdfapplication/pdf3467860https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/21666/1/Leidyyohanadominguez%20.2014.pdff48ec99a2794ecfb98b558d422c6c0c9MD51THUMBNAILLeidyyohanadominguez .2014.pdf.jpgLeidyyohanadominguez .2014.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3956https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/21666/2/Leidyyohanadominguez%20.2014.pdf.jpg5533c0db513a178d413087c3e99a5d37MD52unal/21666oai:repositorio.unal.edu.co:unal/216662022-11-30 17:44:00.71Repositorio Institucional Universidad Nacional de Colombiarepositorio_nal@unal.edu.co