Estudio del proceso de salida del parásito Leishmania amazonensis de su célula hospedera

Los parásitos del género Leishmania, son protozoarios intracelulares obligados que en su ciclo de vida incluyen un estadío en un hospedero vertebrado, dentro del cual se establece principalmente en macrófagos. Allí, la infección es sostenida por amastigotes, para lo cual es necesario que se dé un evento de liberación de éstos; dicho modelo de liberación no ha sido establecido, y se han planteado dos mecanismos básicos: (1) la salida por ruptura de la membrana de la vacuola parasitófora (MVP) y la membrana plasmática del macrófago (MPM) o (2) la salida se da por un proceso de fusión entre la MVP y la MPM. Las evidencias experimentales que apoyan los dos mecanismos no son concluyentes, por lo que es necesario proporcionar evidencias adicionales que conduzcan a la comprensión de dicho proceso. Seguimiento de la infección por microscopía de luz indica que la salida se da entre las 72 y las 78 horas post-infección (hpi) periodo en el que se encontró un aumento en el diámetro de los macrófagos y en la capacitancia (medida indirecta del área del macrófago), lo que sugiere una incorporación de membrana, que podría provenir de la fusión de la MVP a la MPM. La salida inicia con el movimiento de los parásitos al interior de la VP para después salir de forma rápida observándose claramente en el espacio extracelular. Seguimiento por la liberación de la sonda fluorescente Calceína AM y de la enzima citoplasmática DHL durante tiempos de infección alrededor de 73 hpi, evidenció liberación de contenido citoplasmático. Los resultados no permiten concluir cuál es el mecanismo que el parásito utiliza para salir de su célula hospedera, pero sugieren que podría usar los dos mecanismos previamente sugeridos, de la misma forma descrita recientemente para la bacteria Chlamydia trachomatis. / Abstract: Leishmania parasites are obligated intracellular protozoa that includes a stage in a vertebrate host, within which is localized mainly in macrophages. Infection in these cells is sustained by amastigotes and in order to accomplish this is necessary the release of the parasites, the egress model has not been established yet, but two basic mechanisms have been proposed: (1) egress by lysis of the parasitophorous vacuole membrane (PVM) and the macrophage plasma membrane (MPM) or (2) egress by fusion of the PVM and the MPM. Experimental evidence supporting two mechanisms is inconclusive, which is why it is necessary to provide additional evidence leading to the understanding of the process. Monitoring of infection by light microscopy indicates that the egress occurs between 72 and 78 hours post-infection (hpi) period in which was observed an increase in macrophage’s diameter and capacitance (indirect measure of macrophage’s area), suggesting an incorporation of membrane, which could come from the fusion of the PVM with the MPM. The egress begins with the movement of the parasites inside the VP, then quickly leave the cell being clearly observed in the extracellular space. Monitoring the release of the fluorescent probe Calcein AM and the cytoplasmic enzyme LDH during times of infection around the 73 hpi, showed that during the egress occurs a release of cytoplasmic content.

• Autores: Quintana Varón, María del Pilar
• Fecha de publicación: 2010
• Institución: Universidad Nacional de Colombia
• Repositorio: Universidad Nacional de Colombia
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repositorio.unal.edu.co:unal/11251
• Acceso en línea: https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/11251; http://bdigital.unal.edu.co/8659/
• Palabra clave: 57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology; Salida; Leishmania; Macrófago; Fusión de membranas; Lisis de membranas / Egress; Leishmania; Macrophage; Membrane fusión; Membrane lysis
• Rights: openAccess
• License: Atribución-NoComercial 4.0 Internacional