Estudio de la nicotinamida/nicotinato mononucleótido adenililtransferasa de giardia lamblia (gnmnat): determinación de la localización subcelular y aproximación estructural

Giardia lamblia es un organismo divergente, causante de una enfermedad denominada Giardiasis. Este parásito reviste especial interés biológico por su posición evolutiva basal y metabolismo simplificado; por esta razón es importante estudiar el metabolismo del NAD+ en este organismo y así conocer sus...

Full description

Autores:
Moreno González, Paula Andrea
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2013
Institución:
Universidad Nacional de Colombia
Repositorio:
Universidad Nacional de Colombia
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unal.edu.co:unal/60028
Acceso en línea:
https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/60028
http://bdigital.unal.edu.co/57937/
Palabra clave:
5 Ciencias naturales y matemáticas / Science
54 Química y ciencias afines / Chemistry
Giardia lamblia
Dinucleótido de Adenina y Nicotinamida (NAD+)
Nicotinamida/Nicotinato Mononucleotido
Adenililtransferasa (NMNAT)
anticuerpos
Nicotinamide Adenine Dinucleotide (NAD+)(NMNAT),
Nicotinamide/Nicotinate Mononucleotide
Adenylyltransferasa
antibodies
Rights
openAccess
License
Atribución-NoComercial 4.0 Internacional
Description
Summary:Giardia lamblia es un organismo divergente, causante de una enfermedad denominada Giardiasis. Este parásito reviste especial interés biológico por su posición evolutiva basal y metabolismo simplificado; por esta razón es importante estudiar el metabolismo del NAD+ en este organismo y así conocer sus diferencias con otros modelos de estudio. El Dinucleótido de Adenina y Nicotinamida (NAD+) es una molécula de relevancia metabólica y celular que actúa como cofactor, sustrato y participa en procesos de transducción de señales intracelulares. Las distintas rutas de síntesis de este metabolito convergen en la enzima Nicotinamida/Nicotinato Mononucleotido Adenililtransferasa (NMNAT) (EC: 2.7.7.1/18). En estudios previos se identificaron por herramientas bioinformáticas dos candidatos para la NMNAT de G. lamblia (GlNMNAT-A y GlNMNAT-B); los cuales se clonaron, expresaron y evaluaron enzimáticamente. En el presente trabajo se continuó el estudio de la GlNMNAT-A, mediante aproximaciones bioinformáticas y experimentales. Específicamente, se generó un modelo estructural in sillico y se evaluó la expresión de esta proteína, mediante retro-transcripción. Adicionalmente, se realizaron estudios de inmunodetección; para lo cual se produjeron anticuerpos policlonales en modelos murinos y aviares (IgG e IgY). De igual manera, se estudió la localización intracelular de la GlNMNAT-A, mediante el empleo de transgenes. El modelo bioinformático generado presentó características representativas de las NMNAT, fundamentales para la función biosintética de estas enzimas. El análisis transcripcional mostró una baja expresión de las isoenzimas en trofozoitos de G lamblia. Finalmente, los análisis de localización mostraron patrones de ubicación citoplasmática de la GlNMNAT-A en trofozoítos y quistes del parásito.