Estudio inmunohistoquímico y ultraestructural del efecto de la infección con virus de la rabia sobre los astrocitos de la corteza cerebral en ratones

Los astrocitos están involucrados en la homeostasis del tejido nervioso y en la función neuronal; sin embargo, la investigación publicada en rabia hace poca referencia al efecto de la infección viral en estas células gliales. El objetivo de este trabajo fue describir la inmunorreactividad de la prot...

Full description

Autores:
Hurtado Cruz, Andrea del Pilar
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2018
Institución:
Universidad Nacional de Colombia
Repositorio:
Universidad Nacional de Colombia
Idioma:
spa
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/69741
http://bdigital.unal.edu.co/71926/
Palabra clave:
57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology
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Rabia
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description Los astrocitos están involucrados en la homeostasis del tejido nervioso y en la función neuronal; sin embargo, la investigación publicada en rabia hace poca referencia al efecto de la infección viral en estas células gliales. El objetivo de este trabajo fue describir la inmunorreactividad de la proteína ácida fibrilar de la glía (GFAP) y de las proteínas vimentina y S100B, así como la ultraestructura celular de los astrocitos en la corteza cerebral de ratones en respuesta a la infección con el virus de la rabia. Ratones ICR de 28 días de edad fueron inoculados intramuscularmente (IM) o intracerebralmente (IC) con virus fijo CVS. Además, se evaluó el efecto de la infección secuencial primero por vía IM y luego de 48 h por la ruta IC. Los animales en fase terminal de la enfermedad se anestesiaron y se fijaron mediante perfusión intracardíaca con paraformaldehído o glutaraldehído. Se extrajeron los encéfalos y se procesaron para inmunohistoquímica y microscopía electrónica. La infección generó efectos diferenciales sobre la inmunorreactividad a GFAP dependiendo de la ruta de inoculación IM o IC. La expresión de GFAP se incrementó en los cerebros inoculados por vía IC y en los doblemente inoculados (IM-IC). La sola inoculación IM apenas generó una leve inmunorreacción. La infección produjo un notable aumento de la inmunotinción y el número de células inmunorreactivas a la proteína reguladora del calcio S100B. Además, los cerebros infectados con este virus reactivaron la expresión de vimentina, un marcador de neurodesarrollo. Este efecto fue más evidente en la corteza cerebral y el hipocampo. Por otro lado, en el ME no se encontraron partículas virales dentro de los astrocitos ni efecto sobre su ultraestructura. Estos resultados sugieren que los astrocitos pueden estar involucrados en la patogénesis de la rabia.
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Ratones ICR de 28 días de edad fueron inoculados intramuscularmente (IM) o intracerebralmente (IC) con virus fijo CVS. Además, se evaluó el efecto de la infección secuencial primero por vía IM y luego de 48 h por la ruta IC. Los animales en fase terminal de la enfermedad se anestesiaron y se fijaron mediante perfusión intracardíaca con paraformaldehído o glutaraldehído. Se extrajeron los encéfalos y se procesaron para inmunohistoquímica y microscopía electrónica. La infección generó efectos diferenciales sobre la inmunorreactividad a GFAP dependiendo de la ruta de inoculación IM o IC. La expresión de GFAP se incrementó en los cerebros inoculados por vía IC y en los doblemente inoculados (IM-IC). La sola inoculación IM apenas generó una leve inmunorreacción. La infección produjo un notable aumento de la inmunotinción y el número de células inmunorreactivas a la proteína reguladora del calcio S100B. Además, los cerebros infectados con este virus reactivaron la expresión de vimentina, un marcador de neurodesarrollo. Este efecto fue más evidente en la corteza cerebral y el hipocampo. Por otro lado, en el ME no se encontraron partículas virales dentro de los astrocitos ni efecto sobre su ultraestructura. Estos resultados sugieren que los astrocitos pueden estar involucrados en la patogénesis de la rabia.Abstract: Astrocytes are involved in neuronal function and brain tissue homeostasis; however, research published in rabies makes little reference to the effect of this viral infection on astrocytes. The aim of this work was to describe the immunoreactivity of glial fibrillary acidic protein (GFAP), vimentin and S100B proteins, as well as the cellular ultrastructure of astrocytes in the mice cortex brain in response to infection with the rabies virus. ICR mice of 28 days of age were intramuscularly (IM) or intracerebrally (IC) inoculated with CVS fixed virus. In addition, the effect of IM an IC sequential infections was tested. The animals in terminal phase of the disease were anesthetized and brains fixed by intracardiac perfusion with paraformaldehyde or glutaraldehyde. The brain tissue were extracted and processed for immunohistochemistry and electron microscopy. The infection generated differential effects on the immunoreactivity to GFAP depending on the route of inoculation IM or IC. The expression of GFAP was increased in brains from both IC and double inoculatated (IMIC). The virus infection was associated with remarkable increase in immunostaining and the number of immunoreactive cells to calcium-regulating protein S100B. Furthermore, the brains infected with this virus reactivate the expression of vimentin, a neurodevelopment marker. This effect was more evident in the cerebral cortex and the hippocampus. On the other hand, no viral particles or ultrastructural changes were found inside the astrocytes. These results suggest that astrocytes are involved in the pathogenesis of rabies.Maestríaapplication/pdfspaUniversidad Nacional de Colombia Sede Bogotá Facultad de MedicinaFacultad de MedicinaHurtado Cruz, Andrea del Pilar (2018) Estudio inmunohistoquímico y ultraestructural del efecto de la infección con virus de la rabia sobre los astrocitos de la corteza cerebral en ratones. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia - Sede Bogotá.57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology59 Animales / Animals6 Tecnología (ciencias aplicadas) / TechnologyRabiaCorteza cerebralAstrocitosGFAPVimentinaS100BRabiescerebral cortexAstrocytesVimentinEstudio inmunohistoquímico y ultraestructural del efecto de la infección con virus de la rabia sobre los astrocitos de la corteza cerebral en ratonesTrabajo de grado - Maestríainfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionTexthttp://purl.org/redcol/resource_type/TMORIGINALAndreaHurtado.2018.pdfapplication/pdf4969420https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/69741/1/AndreaHurtado.2018.pdfb1aa0ce79e7b12a28d5edea537262091MD51THUMBNAILAndreaHurtado.2018.pdf.jpgAndreaHurtado.2018.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4211https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/69741/2/AndreaHurtado.2018.pdf.jpg56449362f796e782168fa0494b4597f4MD52unal/69741oai:repositorio.unal.edu.co:unal/697412024-06-02 23:12:24.018Repositorio Institucional Universidad Nacional de Colombiarepositorio_nal@unal.edu.co