Determinación de los efectos de la temperatura de almacenamiento sobre el título de anticuerpos y capacidad neutralizante en las diferentes presentaciones comerciales de antivenenos polivalentes producidos en Colombia
Antecedentes: En la literatura se encuentra escasa información sobre la termoestabilidad de Suero Antiofídico Polivalente (SAP) producido en Colombia, por lo cual se diseñó un estudio que respondiera a estas necesidades y que permitiera sugerir modificaciones sobre la distribución y fortalecimiento...
- Autores:
-
Acero Triana, Paola Andrea
- Tipo de recurso:
- Fecha de publicación:
- 2017
- Institución:
- Universidad Nacional de Colombia
- Repositorio:
- Universidad Nacional de Colombia
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.unal.edu.co:unal/62952
- Acceso en línea:
- https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/62952
http://bdigital.unal.edu.co/62307/
- Palabra clave:
- 61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and health
Accidente ofídico
Suero antiofídico
Pruebas de neutralización
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Test neutralization
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Antecedentes: En la literatura se encuentra escasa información sobre la termoestabilidad de Suero Antiofídico Polivalente (SAP) producido en Colombia, por lo cual se diseñó un estudio que respondiera a estas necesidades y que permitiera sugerir modificaciones sobre la distribución y fortalecimiento de la cadena de frío. Métodos: Se realizó un estudio exploratorio-experimental-prospectivo en el cual se adquirieron 6 ampolletas comerciales de los SAP producidos en Colombia (Instituto Nacional de Salud o INS y Laboratorios Probiol®). Con el fin de homogenizar la comparación entre productos, se liofilizaron 3 ampolletas del SAP producido por el INS (INS_L), posteriormente todas las ampolletas se almacenaron a 3 temperaturas diferentes (4, 22 y 45°C) por períodos de 3 y 6 meses. Al concluir cada período de almacenamiento, se evaluó el bandeo electroforético de cada producto, así como su capacidad de neutralización in vitro para las actividades proteolítica, coagulante y hemolítica indirecta del veneno de Bothrops asper. También se determinó el título frente a este veneno. Resultados: La forma de preservación que mostró un mejor comportamiento al evaluar la neutralización para las actividades proteolítica, coagulante y hemolítica indirecta contra el veneno de B. asper fue la presentación comercial de INS, seguida por INS_L y Probiol; se observó que la mejor temperatura de almacenamiento fue de 4°C independientemente de la forma de preservación, sin embargo no se hallaron diferencias significativas entre las temperaturas de 4 y 22°C a los 6 meses de almacenamiento. En la determinación de títulos de anticuerpos INS mostró una mejor unión antígeno-anticuerpo para temperaturas entre 4 y 22°C seguido por INS_L y Probiol. Los hallazgos cualitativos de la electroforesis en gel de poliacrilamida evidenciaron que realizada a los 3 vs. 6 meses de almacenamiento, se observa una banda proteica a 150KDa correspondiente a la IgG para todos los SAP independiente del tiempo y la temperatura de almacenamiento. Conclusiones: a pesar de las modificaciones de temperatura, la forma de preservación comercial de INS mostró un mejor comportamiento al neutralizar las actividades proteolítica, coagulante y hemolítica indirecta contra el veneno de B. asper. Sin embargo, en el análisis estadístico de la unión antígeno-anticuerpo se evidenció que la temperatura y el tiempo de almacenamiento sí influyen en esta. Por tal motivo es importante realizar estudios in vivo para corroborar estos hallazgos y así, promover estrategias que favorezcan el acceso de este medicamento a áreas rurales de difícil acceso y garantizar una cadena de frío estable, cuya población suele ser la más afectada por ser el hábitat de las serpientes. |
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Métodos: Se realizó un estudio exploratorio-experimental-prospectivo en el cual se adquirieron 6 ampolletas comerciales de los SAP producidos en Colombia (Instituto Nacional de Salud o INS y Laboratorios Probiol®). Con el fin de homogenizar la comparación entre productos, se liofilizaron 3 ampolletas del SAP producido por el INS (INS_L), posteriormente todas las ampolletas se almacenaron a 3 temperaturas diferentes (4, 22 y 45°C) por períodos de 3 y 6 meses. Al concluir cada período de almacenamiento, se evaluó el bandeo electroforético de cada producto, así como su capacidad de neutralización in vitro para las actividades proteolítica, coagulante y hemolítica indirecta del veneno de Bothrops asper. También se determinó el título frente a este veneno. Resultados: La forma de preservación que mostró un mejor comportamiento al evaluar la neutralización para las actividades proteolítica, coagulante y hemolítica indirecta contra el veneno de B. asper fue la presentación comercial de INS, seguida por INS_L y Probiol; se observó que la mejor temperatura de almacenamiento fue de 4°C independientemente de la forma de preservación, sin embargo no se hallaron diferencias significativas entre las temperaturas de 4 y 22°C a los 6 meses de almacenamiento. En la determinación de títulos de anticuerpos INS mostró una mejor unión antígeno-anticuerpo para temperaturas entre 4 y 22°C seguido por INS_L y Probiol. Los hallazgos cualitativos de la electroforesis en gel de poliacrilamida evidenciaron que realizada a los 3 vs. 6 meses de almacenamiento, se observa una banda proteica a 150KDa correspondiente a la IgG para todos los SAP independiente del tiempo y la temperatura de almacenamiento. Conclusiones: a pesar de las modificaciones de temperatura, la forma de preservación comercial de INS mostró un mejor comportamiento al neutralizar las actividades proteolítica, coagulante y hemolítica indirecta contra el veneno de B. asper. Sin embargo, en el análisis estadístico de la unión antígeno-anticuerpo se evidenció que la temperatura y el tiempo de almacenamiento sí influyen en esta. Por tal motivo es importante realizar estudios in vivo para corroborar estos hallazgos y así, promover estrategias que favorezcan el acceso de este medicamento a áreas rurales de difícil acceso y garantizar una cadena de frío estable, cuya población suele ser la más afectada por ser el hábitat de las serpientes.Abstract: BACKGROUND: There is little information in the literature about the thermostability of Polyvalent Snake Antivenom (PSA) produced in Colombia. Therefore, this study was designed to respond to these needs and to suggest changes in the distribution and strengthening of the cold chain. Methods: An exploratory-prospective-experimental study was carried out in which 6 commercial ampoules of PSA’s produced in Colombia (Instituto Nacional de Salud or INS and Laboratorios Probiol®) were acquired. In order to homogenize the comparison between products, 3 ampoules of the PSA produced by the INS (INS_L) were lyophilized, after which all vials were stored at 3 different temperatures (4, 22 and 45 °C) for periods of 3 and 6 months. At the end of each storage period, the electrophoretic profile of each product was evaluated, as well as their in vitro neutralization capacity for the proteolytic, coagulant and indirect haemolytic activities of the . Bothrops asper venom. The title was also determined against this venom. RESULTS: The preservation form showed a better performance when we were evaluating neutralization for the proteolytic, coagulant and indirect hemolytic activities against B. asper venom was the commercial presentation of INS, followed by INS_L and Probiol; It was observed that the best storage temperature was 4°C, regardless of the form of preservation, however, no significant differences were found between temperatures of 4 and 22°C after 6 months of storage. In the determination of INS antibody titers showed a better antigen-antibody binding at temperatures between 4 and 22°C, followed by INS_L and Probiol. The findings in the polyacrylamide gel electrophoresis showed that, obtained at 3 vs. 6 months of storage, a protein band at 150 KDa corresponding to the IgG for all SAP's is observed independent of time and storage temperature. CONCLUSIONS: Despite the changes in temperature, the commercial preservation form of INS showed a better performance by neutralizing the proteolytic, coagulant and hemolytic activities against B. asper venom. But in the statistical analysis of antigen-antibody binding it was evidenced that temperature and storage time don’t influence this, therefore it is important to perform in vivo studies to corroborate these findings and thus, promote strategies that favor the access of this drug to rural areas of difficult access and ensure a stable chain cold, whose population usually be the most affected by the activity of snakes.Maestríaapplication/pdfspaUniversidad Nacional de Colombia Sede Bogotá Facultad de Medicina Departamento de ToxicologíaDepartamento de ToxicologíaAcero Triana, Paola Andrea (2017) Determinación de los efectos de la temperatura de almacenamiento sobre el título de anticuerpos y capacidad neutralizante en las diferentes presentaciones comerciales de antivenenos polivalentes producidos en Colombia. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia – Sede Bogotá.61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine and healthAccidente ofídicoSuero antiofídicoPruebas de neutralizaciónSnake bitesAntiveninsTest neutralizationDeterminación de los efectos de la temperatura de almacenamiento sobre el título de anticuerpos y capacidad neutralizante en las diferentes presentaciones comerciales de antivenenos polivalentes producidos en ColombiaTrabajo de grado - Maestríainfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionTexthttp://purl.org/redcol/resource_type/TMORIGINAL52996364.2017.pdfapplication/pdf4439079https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/62952/1/52996364.2017.pdfb606511bbb0a32c10dc0adda923837b7MD51THUMBNAIL52996364.2017.pdf.jpg52996364.2017.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4949https://repositorio.unal.edu.co/bitstream/unal/62952/2/52996364.2017.pdf.jpgf1a88ed77d903c34a3b1c32063d71122MD52unal/62952oai:repositorio.unal.edu.co:unal/629522024-04-26 23:39:55.076Repositorio Institucional Universidad Nacional de Colombiarepositorio_nal@unal.edu.co |