Desarrollo de una tinta de biomaterial a base de alginato, ácido hialurónico y plasma pobre en plaquetas como posible tratamiento para las úlceras crónicas de pie diabético
La diabetes se ha convertido en un problema de salud pública a nivel mundial y junto a esta se han incrementado el desarrollo de derivaciones patológicas como es el caso de las úlceras crónicas de pie diabético. Las úlceras crónicas se caracterizan por su difícil cicatrización, llegando a necesitar...
- Autores:
-
Fuentes Ramírez, Angie Daniela
García Márquez, Cristian David
Hormiga Ribero, Diego Andrés
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2022
- Institución:
- Universidad Autónoma de Bucaramanga - UNAB
- Repositorio:
- Repositorio UNAB
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repository.unab.edu.co:20.500.12749/19044
- Acceso en línea:
- http://hdl.handle.net/20.500.12749/19044
- Palabra clave:
- Biomedical engineering
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Medical electronics
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Bioengineering
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Biofísica
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Bioimpresión
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Development of a biomaterial ink based on alginate, hyaluronic acid and Platelet-poor plasma as a possible treatment for chronic foot ulcers diabetic |
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La diabetes se ha convertido en un problema de salud pública a nivel mundial y junto a esta se han incrementado el desarrollo de derivaciones patológicas como es el caso de las úlceras crónicas de pie diabético. Las úlceras crónicas se caracterizan por su difícil cicatrización, llegando a necesitar meses e incluso años para cicatrizar. Debido a esto se buscan alternativas terapéuticas que permitan a la herida una correcta cicatrización y que además cumpla con la morfología específica de cada úlcera. Con este preámbulo nace el desarrollo de la tecnología de bioimpresión 3D y con ella las tintas de biomaterial, mediante las cuales se pueden imprimir apósitos personalizados y funcionalizados para cada úlcera, brindando una alternativa terapéutica para las úlceras crónicas de pie diabético. Con base a lo anterior, el proyecto se centró en el desarrollo de una tinta de biomaterial que presentará una correcta fidelidad de impresión utilizando biopolímeros como el Alginato (Alg), ácido hialurónico (AH) y Plasma pobre en plaquetas (PPP), biomateriales utilizados en el ámbito de la ingeniería de tejidos y la impresión 3D por sus propiedades regenerativas y mecánicas. Para lograr el objetivo de este proyecto, se realizaron pruebas que permitieron determinar los parámetros de impresión que permiten una correcta fidelidad de impresión, así como pruebas mecánicas y de degradación de la tinta de biomaterial evaluada. Los parámetros seleccionados para la impresión de la tinta de biomaterial son 0.25 mm en Load Before Printing, 4°C temperatura del dispensador, 30% en Fill Density y 0.7 mm en Retraction Distance, todos estos parámetros de la Bioimpresora Dr. Invivo 3D2. Estos parámetros junto a las concentraciones de 6.5% p/v de Alginato (Alg) para la tinta control (TC), de 6.5% p/v de Alg junto a 5% p/v de ácido hialurónico (AH) para la tinta seleccionada (TS) y el tiempo de reticulación en 1 h evidenciaron una correcta fidelidad de impresión. Seguido de esto, se caracterizaron mecánicamente las TC y TS. Se obtuvo un módulo de Young a compresión entre 175.59 kPa – 268.78 kPa para la TC sin hinchamiento en PBS, cuando se realizó el proceso de hinchamiento en PBS se obtuvieron valores entre 19.128 kPa – 33.834 kPa. Para la TS se obtuvo un módulo de compresión entre 1.3667 kPa – 2.7136 kPa sin hinchamiento. Respecto al módulo de tensión se obtuvo para la TC valores entre 577,35 kPa – 679,3 kPa sin hinchamiento y con hinchamiento entre 174,44 kPa – 229,28 kPa. Las pruebas de compresión después del hinchamiento y tensión de la TS no fueron realizadas debido a que no fue posible posicionar las impresiones en el banco de carga debido a su baja resistencia mecánica. Se realizaron las pruebas de colapso, las cuales arrojaron que la TC colapsaba al llegar a la capa 82 a comparación de las impresas con las TS que colapsaron en la capa 30. Para terminar, se realizó la cuantificación de proteínas presentes en la TS la cual aumentó con el paso de los días, en donde las primeras 48 h se logró una liberación inferior a los 10 mg/ml, pasadas 110 llegó a liberar entre 23,550 mg/ml y 30.747 mg/ml durante las primeras 158 h. En conclusión, la combinación de biomateriales planteados en la TS permitió realizar impresiones con una correcta fidelidad de impresión, sin embargo, el AH, aunque mejoró la fidelidad de impresión respecto a la TC, empeoró las propiedades mecánicas de la TS. La tinta de biomaterial desarrollada podría funcionar como tratamiento para úlceras crónicas de pie diabético debido a que permite imprimir estructuras de hasta 9 mm de altura con una correcta fidelidad de impresión, sin embargo, sería necesario evaluar la capacidad de la TS para la proliferación y migración celular. |
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Solarte David, Víctor Alfonso54590e96-eda3-4b43-9ffa-14bd35ed7d08Becerra Bayona, Silvia Milenaf59fde3b-924f-4fcc-96e9-5fd6250b2daeFuentes Ramírez, Angie Daniela6880b6a9-3f2e-4119-b982-33c2447fbd42García Márquez, Cristian David70650bad-79b4-4d70-9669-b11180f69335Hormiga Ribero, Diego Andrés5795efc4-e929-4265-954c-053960116eeeSolarte David, Víctor Alfonso [0001329391]Becerra Bayona, Silvia Milena [0001568861]Becerra Bayona, Silvia Milena [5wr21EQAAAAJ]Solarte David, Víctor Alfonso [0000-0002-9856-1484]Becerra Bayona, Silvia Milena [0000-0002-4499-5885]Becerra Bayona, Silvia Milena [36522328100]Solarte David, Víctor Alfonso [Victor-Solarte-David]Becerra Bayona, Silvia Milena [Silvia-Becerra-Bayona]Solarte David, Víctor Alfonso [víctor-alfonso-solarte-david]Becerra Bayona, Silvia Milena [silvia-milena-becerra-bayona]Becerra Bayona, Silvia Milena [silvia-becerra-3174455a]Bucaramanga (Santander, Colombia)2022UNAB Campus Bucaramanga2023-02-17T15:13:43Z2023-02-17T15:13:43Z2022http://hdl.handle.net/20.500.12749/19044instname:Universidad Autónoma de Bucaramanga - UNABreponame:Repositorio Institucional UNABrepourl:https://repository.unab.edu.coLa diabetes se ha convertido en un problema de salud pública a nivel mundial y junto a esta se han incrementado el desarrollo de derivaciones patológicas como es el caso de las úlceras crónicas de pie diabético. Las úlceras crónicas se caracterizan por su difícil cicatrización, llegando a necesitar meses e incluso años para cicatrizar. Debido a esto se buscan alternativas terapéuticas que permitan a la herida una correcta cicatrización y que además cumpla con la morfología específica de cada úlcera. Con este preámbulo nace el desarrollo de la tecnología de bioimpresión 3D y con ella las tintas de biomaterial, mediante las cuales se pueden imprimir apósitos personalizados y funcionalizados para cada úlcera, brindando una alternativa terapéutica para las úlceras crónicas de pie diabético. Con base a lo anterior, el proyecto se centró en el desarrollo de una tinta de biomaterial que presentará una correcta fidelidad de impresión utilizando biopolímeros como el Alginato (Alg), ácido hialurónico (AH) y Plasma pobre en plaquetas (PPP), biomateriales utilizados en el ámbito de la ingeniería de tejidos y la impresión 3D por sus propiedades regenerativas y mecánicas. Para lograr el objetivo de este proyecto, se realizaron pruebas que permitieron determinar los parámetros de impresión que permiten una correcta fidelidad de impresión, así como pruebas mecánicas y de degradación de la tinta de biomaterial evaluada. Los parámetros seleccionados para la impresión de la tinta de biomaterial son 0.25 mm en Load Before Printing, 4°C temperatura del dispensador, 30% en Fill Density y 0.7 mm en Retraction Distance, todos estos parámetros de la Bioimpresora Dr. Invivo 3D2. Estos parámetros junto a las concentraciones de 6.5% p/v de Alginato (Alg) para la tinta control (TC), de 6.5% p/v de Alg junto a 5% p/v de ácido hialurónico (AH) para la tinta seleccionada (TS) y el tiempo de reticulación en 1 h evidenciaron una correcta fidelidad de impresión. Seguido de esto, se caracterizaron mecánicamente las TC y TS. Se obtuvo un módulo de Young a compresión entre 175.59 kPa – 268.78 kPa para la TC sin hinchamiento en PBS, cuando se realizó el proceso de hinchamiento en PBS se obtuvieron valores entre 19.128 kPa – 33.834 kPa. Para la TS se obtuvo un módulo de compresión entre 1.3667 kPa – 2.7136 kPa sin hinchamiento. Respecto al módulo de tensión se obtuvo para la TC valores entre 577,35 kPa – 679,3 kPa sin hinchamiento y con hinchamiento entre 174,44 kPa – 229,28 kPa. Las pruebas de compresión después del hinchamiento y tensión de la TS no fueron realizadas debido a que no fue posible posicionar las impresiones en el banco de carga debido a su baja resistencia mecánica. Se realizaron las pruebas de colapso, las cuales arrojaron que la TC colapsaba al llegar a la capa 82 a comparación de las impresas con las TS que colapsaron en la capa 30. Para terminar, se realizó la cuantificación de proteínas presentes en la TS la cual aumentó con el paso de los días, en donde las primeras 48 h se logró una liberación inferior a los 10 mg/ml, pasadas 110 llegó a liberar entre 23,550 mg/ml y 30.747 mg/ml durante las primeras 158 h. En conclusión, la combinación de biomateriales planteados en la TS permitió realizar impresiones con una correcta fidelidad de impresión, sin embargo, el AH, aunque mejoró la fidelidad de impresión respecto a la TC, empeoró las propiedades mecánicas de la TS. La tinta de biomaterial desarrollada podría funcionar como tratamiento para úlceras crónicas de pie diabético debido a que permite imprimir estructuras de hasta 9 mm de altura con una correcta fidelidad de impresión, sin embargo, sería necesario evaluar la capacidad de la TS para la proliferación y migración celular.1. Problema U Oportunidad 12 Planteamiento Del Problema 12 Justificación 13 Pregunta Problema 14 Objetivo General 14 Objetivos Específicos 14 2. Marco Teórico 15 Diabetes Mellitus y Úlceras de Pie Diabético 15 Tratamientos 15 Hidrogel 16 Biotinta y su distinción de una tinta de biomaterial. 16 Alginato (Alg) 17 Ácido Hialurónico (AH) 18 Plasma pobre en plaquetas (PPP) 18 Bioimpresión 3D por extrusión. 19 Imprimibilidad 20 Evaluación de imprimibilidad 20 Prueba de filamento 20 Prueba de apilamiento de capas 21 Evaluación de fidelidad de impresión 21 3. Estado Del Arte 23 4. Metodología 26 Preparación de las alícuotas de PPP. 26 Formulación y preparación de tinta de biomaterial con Ácido Hialurónico 28 Prueba de extrusión del filamento 28 Prueba de fusión de filamento. 29 Obtención de los parámetros de impresión que permitan obtener un filamento imprimible 30 Evaluación de la fidelidad de impresión pre y post reticulación. 31 Post-reticulación de la tinta de biomaterial. 33 Prueba de colapso de estructura 33 Caracterización mecánica 34 Pruebas de degradación 35 Análisis estadístico. 36 5. Resultados 37 Prueba de extrusión de filamento para la tinta control. 37 Prueba de fusión de filamento 41 Obtención de los parámetros de impresión que permitan obtener un filamento imprimible. 44 Parámetro Fill Density 50 Parámetro Retraction Distance. 52 Parámetro concentración de alginato. 54 Tinta con ácido hialurónico. 56 Post-reticulación de la tinta control. 57 Post-reticulación de la tinta con ácido hialurónico. 59 Prueba de colapso 61 Prueba de degradación 67 Pruebas mecánicas 71 6. Análisis de resultados 78 Prueba de extrusión de filamento 78 Prueba de fusión de filamento 79 Prueba de extrusión de filamento 79 Obtención de los parámetros de impresión que permitan tener un filamento imprimible.80 Concentración de alginato. 81 Tinta con Ácido Hialurónico. 81 Post-reticulación de la Tinta control y Tinta con AH 82 Prueba de colapso. 82 Prueba de degradación 83 Pruebas mecánicas 84 7. Conclusiones y Recomendaciones 85 8. Referencias 90 9. Anexos 100PregradoDiabetes has become a public health problem worldwide, the development of pathologies derived from diabetes has increased, such as chronic diabetic foot ulcers. Chronic ulcers are characterized by their difficult healing, taking months and even years to heal. Due to this, therapeutic alternatives are sought that allow the wound to heal correctly and comply with the specific morphology of each ulcer. With this introduction, the development of 3D bioprinting technology was born, and withit biomaterial inks, through which personalized and functionalized dressings can be printed for each ulcer, providing a therapeutic alternative for chronic diabetic foot ulcers. Based on the above, the project focused on the development of a biomaterial ink that will present a correct printing fidelity using biopolymers such as Alginate (Alg), hyaluronic acid (HA) and Platelet Poor Plasma (PPP), biomaterials used in the field of tissue engineering and 3D printing for its regenerative and mechanical properties. To achieve the objective of this project, tests were carried out to determine the printing parameters that allow correct printing fidelity, as well as mechanical and degradation tests of the evaluated biomaterial ink. The parameters selected for printing the biomaterial ink are 0.25 mm in Load Before Printing, 4°C dispenser temperature, 30% in fill density and 0.7 mm in Retraction Distance, all these parameters of the Dr. Invivo 3D2 Bioprinter. These parameters together with the concentrations of 6.5% w/v of Alginate (Alg) for the control biomaterial ink (TC), of 6.5% w/v of Alg together with 5% w/v of hyaluronic acid (HA) for the selected biomaterial ink (TS) and the crosslinking time in 1 h showed a correct printing fidelity. Following this, the CT and TS were mechanically characterized. A compression Young's modulus between 175.59 kPa - 268.78 kPa was obtained for the CT without swelling in PBS, when the swelling process was carried out in PBS, values between 19.128 kPa - 33.834 kPa were obtained. For the TS a compression modulus was obtained between 1.3667 kPa - 2.7136 kPa without swelling. Regarding the tensile modulus, values between 577.35 kPa - 679.3 kPa without swelling and with swelling between 174.44 kPa - 229.28 kPa were obtained for CT. Compression tests after swelling and tension of the TS were not performed because it was not possible to position the impressions on the load bench due to their low mechanical resistance. The collapse tests were performed, which showed that the TC collapsed when it reached layer 82 compared to those printed with the TS that collapsed at layer 30. Finally, the quantification of proteins present in the TS was performed, which increased with the passage of days, where the first 48 h a release of less than 10 mg/ml was achieved, after 110 h the 10 mg/ml was exceeded, releasing between 23,550 mg/ml and 30,747 mg/ml during the first 158 h. In conclusion, the combination of biomaterials proposed in the TS allowed prints with a correct print fidelity with the possibility, however, the HA, although it improved the print fidelity with respect to the TC, worsened the mechanical properties of the TS. The developed biomaterial ink could work as a treatment for chronic diabetic foot ulcers because it allows to print structures up to 9 mm in height with a correct printing fidelity, however, it would be necessary to evaluate the capacity of the TS for cell proliferation and migration.Modalidad Presencialapplication/pdfspahttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/co/Abierto (Texto Completo)Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Colombiahttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Desarrollo de una tinta de biomaterial a base de alginato, ácido hialurónico y plasma pobre en plaquetas como posible tratamiento para las úlceras crónicas de pie diabéticoDevelopment of a biomaterial ink based on alginate, hyaluronic acid and Platelet-poor plasma as a possible treatment for chronic foot ulcers diabeticIngeniero BiomédicoUniversidad Autónoma de Bucaramanga UNABFacultad IngenieríaPregrado Ingeniería Biomédicainfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisTrabajo de Gradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionhttp://purl.org/redcol/resource_type/TPBiomedical engineeringEngineeringMedical electronicsBiological physicsBioengineeringMedical instruments and apparatusMedicineBiomedicalClinical engineeringBiomaterial inkPlatelet poor plasmaHyaluronic acidAlginateBioprintingFoot diseasesPublic healthBlood plasmaIngeniería biomédicaIngenieríaBiofísicaBioingenieríaMedicinaBiomédicaEnfermedades de lo piesSalud públicaPlasma sanguíneoIngeniería clínicaElectrónica médicaInstrumentos y aparatos médicosTinta de biomaterialPlasma pobre en plaquetasÁcido hialurónicoAlginatoBioimpresiónAbatangelo, G., Vindigni, V., Avruscio, G., Pandis, L., & Brun, P. 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