Identificación del Cambio de Marco Ribosómico Programado en la pérdida de regiones en el genoma de variantes genéticas de SARS-CoV-2 del departamento de Santander, Colombia

Durante la pandemia de COVID-19, generada por el Betacoronavirus SARS-CoV-2, para mejorar el diagnóstico por RT-PCR y la secuenciación de los genomas virales de pacientes, se realizó la inclusión de un reactivo diseñado en función del genoma de SARS-CoV-2, que contiene una solución coadyuvante para...

Full description

Autores:
Navarro Corredor, María Alejandra
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2023
Institución:
Universidad Industrial de Santander
Repositorio:
Repositorio UIS
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/14250
Acceso en línea:
https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/14250
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Palabra clave:
SARS-CoV-2
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Rights
openAccess
License
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description Durante la pandemia de COVID-19, generada por el Betacoronavirus SARS-CoV-2, para mejorar el diagnóstico por RT-PCR y la secuenciación de los genomas virales de pacientes, se realizó la inclusión de un reactivo diseñado en función del genoma de SARS-CoV-2, que contiene una solución coadyuvante para desenredar el ARN y permitir la amplificación de la región seleccionada de SARS-CoV-2. Los resultados mostraron una mejora en el sistema de diagnóstico y en la secuenciación genómica. Su aplicación permitió la caracterización de 14 genomas de pacientes diagnosticados con COVID-19 en Santander. Asimismo, de otros genomas con pérdida de codones que presentaron cambios en los Marcos Abiertos de Lectura (ORF), exhibiendo, en algunos codones de paro similitud con el modelo de Cambio de Marco Ribosómico Programado (PRF). Debido a la posibilidad de que los codones de paro pudieran haberse generado durante el ensamble computacional y no tuvieran relevancia biológica, se realizó una validación in silico de estos genomas, identificando una posible explicación a la existencia de genomas con estas características, haciendo una identificación del modelo PRF en algunas de las regiones con pérdidas, así como el desarrollo de una base de datos con secuencias de algunas variantes reportadas en la base de datos de GISAID para identificar patrones de similitud entre las secuencias y los genomas aquí obtenidos. La comparación de los genomas secuenciados con respecto a los genomas obtenidos de las variantes reportadas en GISAID evidenció un patrón de pérdida de nucleótidos, regulado por el modelo de PRF.
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Los resultados mostraron una mejora en el sistema de diagnóstico y en la secuenciación genómica. Su aplicación permitió la caracterización de 14 genomas de pacientes diagnosticados con COVID-19 en Santander. Asimismo, de otros genomas con pérdida de codones que presentaron cambios en los Marcos Abiertos de Lectura (ORF), exhibiendo, en algunos codones de paro similitud con el modelo de Cambio de Marco Ribosómico Programado (PRF). Debido a la posibilidad de que los codones de paro pudieran haberse generado durante el ensamble computacional y no tuvieran relevancia biológica, se realizó una validación in silico de estos genomas, identificando una posible explicación a la existencia de genomas con estas características, haciendo una identificación del modelo PRF en algunas de las regiones con pérdidas, así como el desarrollo de una base de datos con secuencias de algunas variantes reportadas en la base de datos de GISAID para identificar patrones de similitud entre las secuencias y los genomas aquí obtenidos. La comparación de los genomas secuenciados con respecto a los genomas obtenidos de las variantes reportadas en GISAID evidenció un patrón de pérdida de nucleótidos, regulado por el modelo de PRF.PregradoBiólogoDuring the COVID-19 pandemic, generated by the SARS-CoV-2 Betacoronavirus, to improve RT-PCR diagnosis and sequencing of patient viral genomes, the inclusion of a reagent designed based on the SARS-CoV-2 genome, containing a coadjuvant solution to unravel the RNA and allow amplification of the targeted region of SARS-CoV-2, was performed. The results showed an improvement in the diagnostic system and genomic sequencing. Its application allowed the characterization of 14 genomes of patients diagnosed with COVID-19 in Santander. Likewise, other genomes with codon loss presented changes in the Open Reading Frames (ORF), exhibiting, in some stop codons, similarity with the Programmed Ribosomal Frameshift (PRF) model. Due to the possibility that the stop codons could have been generated during computational assembly and had no biological relevance, an in silico validation of these genomes was performed, identifying a possible explanation for the existence of genomes with these characteristics, determining the PRF model in some of the regions with losses, as well as developing a database with sequences of some variants reported in the GISAID database to identify patterns of similarity between the sequences and the genomes obtained here. Comparing the sequenced genomes with the genomes obtained from the variants reported in GISAID showed a nucleotide loss pattern regulated by the PRF model.https://orcid.org/0000-0002-6640-8282application/pdfspaUniversidad Industrial de SantanderFacultad de CienciasBiologíaEscuela de BiologíaSARS-CoV-2ADNcCambio de Marco Ribosómico Programadoidentificación de variantes viralesgenoma viralSARS-CoV-2cDNAProgrammed Ribosomal Frameshiftidentification of viral variantsviral genomeIdentificación del Cambio de Marco Ribosómico Programado en la pérdida de regiones en el genoma de variantes genéticas de SARS-CoV-2 del departamento de Santander, ColombiaIdentification of Programmed Ribosomal Frameshift in the loss of regions in the genome of genetic variants of SARS-CoV-2 from the department of Santander, ColombiaTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bccehttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fORIGINALDocumento.pdfDocumento.pdfapplication/pdf2276968https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/acfd986a-2326-488a-959d-1f8f55e7139e/downloadfc8684741fcc8a54d16bbc3fa70d540dMD51Carta de autorización de uso.pdfCarta de autorización de uso.pdfapplication/pdf65344https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/34f05d05-3c20-456c-8f7f-b65831303de8/download48b44ac6b461442439e4f0a43cd2df55MD52Nota del proyecto.pdfNota del proyecto.pdfapplication/pdf270239https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/940b5ae6-984e-481a-8795-0ffb35281d02/downloadee935120bf6d227ffdcb22db930ec72aMD54Carta confidencialidad.pdfCarta confidencialidad.pdfapplication/pdf278470https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/5b296d1b-7e27-407a-b38e-5f2797558c5e/download584dc15ec741b6e24d67d101f40a3e90MD55Apéndice A. Control de calidad de las lecturas, FastQC.rarApéndice A. Control de calidad de las lecturas, FastQC.rarapplication/octet-stream19908831https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/995c1e28-937e-46fa-a880-fba4eb541b7b/download8136e5fd44777209c5ed55e5bce09645MD56Apéndice B. Ensamblajes con IRMA y con Bowtie2.rarApéndice B. Ensamblajes con IRMA y con Bowtie2.rarapplication/octet-stream560677https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/e5ca4c42-4281-4e75-a262-c358d9ec86e9/download5e4d21256ccf06ec5e0f76e22131aa5cMD57Apéndice C. Alineamientos BLAST de genomas SARS-CoV-2 ensamblados.rarApéndice C. Alineamientos BLAST de genomas SARS-CoV-2 ensamblados.rarapplication/octet-stream5575035https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/4a55ea21-7b32-45e5-b4b9-644cba36a3c8/downloadffd18593122beb8a3aeda174c86a5773MD58Apéndice D. Linajes Pangolin y Nextclade para genomas de SARS-CoV-2.rarApéndice D. Linajes Pangolin y Nextclade para genomas de SARS-CoV-2.rarapplication/octet-stream759997https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/4ed4a5a2-750b-4150-abe0-ccf0fe2da184/download3ae937200b4218a31ab8c8ce6b530307MD59Apéndice E. Alineamientos de los genomas ensamblados con el genoma de referencia.rarApéndice E. Alineamientos de los genomas ensamblados con el genoma de referencia.rarapplication/octet-stream2024050https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/bee22b09-b5c9-44ac-8887-370f7ee5ed1e/download250df00bccec3bc11535084701ed01bfMD510Apéndice F. Estructuras secundarias generadas con el modelo PRF.rarApéndice F. Estructuras secundarias generadas con el modelo PRF.rarapplication/octet-stream1665838https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/e1c55648-2afb-411b-8aee-ac38020384c0/download899df5278a0789d192d47be0a1337119MD511Apéndice G. Base de datos de SARS-CoV-2.rarApéndice G. 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