Implementación de un método de análisis de péptidos de cadena corta (5-30 aminoácidos) por espectroscopia de fluorescencia

Este trabajo presenta la fluorescencia de PLB y PG de secuencias WKLLSKAQEKFGKNKSR, AGDDADYFCQVWASRDDH, respectivamente. Los péptidos PLB y PG tienen triptófano, el péptido PLB presenta una actividad biológica antibacteriana contra Bacillus Subtilis, Escherichia Coli O157:H7, el péptido PG posee cua...

Full description

Autores:
Perez Bautista, Rubiela
Tipo de recurso:
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Fecha de publicación:
2014
Institución:
Universidad Industrial de Santander
Repositorio:
Repositorio UIS
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/29961
Acceso en línea:
https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/29961
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Palabra clave:
Fluorescencia
Péptidos
Espectro De Fluorescencia
Marcador Fluorescente.
Fluorescence
Spectroscopic
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Rights
License
Attribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)
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description Este trabajo presenta la fluorescencia de PLB y PG de secuencias WKLLSKAQEKFGKNKSR, AGDDADYFCQVWASRDDH, respectivamente. Los péptidos PLB y PG tienen triptófano, el péptido PLB presenta una actividad biológica antibacteriana contra Bacillus Subtilis, Escherichia Coli O157:H7, el péptido PG posee cualidades antigénicas, podría generar anticuerpos específicos que brindarían información de los procesos predominantes implicados en la fisiopatología que sirve en el diagnóstico o pronóstico del Síndrome Coronario Agudo, razón por la cual se hace interesante el estudio de fluorescencia de las secuencias mencionadas. La interacción entre PLB y el Buffer Britton Robinson, PG y el Buffer Tris-HCl, se realizó bajo condiciones controladas de pH, para evitar desnaturalización de PG y PLB, de esta forma, la muestra no se degrada con el tiempo y permanece estable al ser analizada por espectroscopia de fluorescencia. Los experimentos comprobaron la fluorescencia intrínseca del triptófano y por ello no se realiza marcaje en Rodamina B, la cantidad de emisión Fluorescente aumentó considerablemente en la intensidad de fluorescencia al aumentar la concentración, propio efecto de la fluorescencia intrínseca de las muestras PLB y PG. Para caracterizar las muestras inicialmente se tomaron espectros de absorción U.V-Vis y Maldi Toff Ms , posteriormente se evalúa por espectroscopia de emisión (fluorescencia) cada muestra PLB y PG. Los coeficientes de correlación para PLB (0.93) y PG (0.98), con desviaciones se encuentran por debajo del 1% y 5%, son evaluadas en diluciones que involucraron el rango de trabajo de la curva estándar. Las curvas de calibración para PG y PLB, el método aplicado a las muestras PLB Y PG donde los límites de detección obtenidos fueron: 7.95x10- 6 [mol/L] y 2.12 x10-7 [mol/L], los límites de cuantificación 2.65 x10-5 [mol/L] y 7.06x10-5 [mol/L] respectivamente. De acuerdo a los resultados obtenidos en el presente trabajo la fluorescencia es un método altamente sensible, haciendo disoluciones mínimas e incluso trazas.
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Los péptidos PLB y PG tienen triptófano, el péptido PLB presenta una actividad biológica antibacteriana contra Bacillus Subtilis, Escherichia Coli O157:H7, el péptido PG posee cualidades antigénicas, podría generar anticuerpos específicos que brindarían información de los procesos predominantes implicados en la fisiopatología que sirve en el diagnóstico o pronóstico del Síndrome Coronario Agudo, razón por la cual se hace interesante el estudio de fluorescencia de las secuencias mencionadas. La interacción entre PLB y el Buffer Britton Robinson, PG y el Buffer Tris-HCl, se realizó bajo condiciones controladas de pH, para evitar desnaturalización de PG y PLB, de esta forma, la muestra no se degrada con el tiempo y permanece estable al ser analizada por espectroscopia de fluorescencia. Los experimentos comprobaron la fluorescencia intrínseca del triptófano y por ello no se realiza marcaje en Rodamina B, la cantidad de emisión Fluorescente aumentó considerablemente en la intensidad de fluorescencia al aumentar la concentración, propio efecto de la fluorescencia intrínseca de las muestras PLB y PG. Para caracterizar las muestras inicialmente se tomaron espectros de absorción U.V-Vis y Maldi Toff Ms , posteriormente se evalúa por espectroscopia de emisión (fluorescencia) cada muestra PLB y PG. Los coeficientes de correlación para PLB (0.93) y PG (0.98), con desviaciones se encuentran por debajo del 1% y 5%, son evaluadas en diluciones que involucraron el rango de trabajo de la curva estándar. Las curvas de calibración para PG y PLB, el método aplicado a las muestras PLB Y PG donde los límites de detección obtenidos fueron: 7.95x10- 6 [mol/L] y 2.12 x10-7 [mol/L], los límites de cuantificación 2.65 x10-5 [mol/L] y 7.06x10-5 [mol/L] respectivamente. De acuerdo a los resultados obtenidos en el presente trabajo la fluorescencia es un método altamente sensible, haciendo disoluciones mínimas e incluso trazas.PregradoQuímicoThis paper presents the fluorescence of PLB and PG WKLLSKAQEKFGKNKSR sequence, AGDDADYFCQVWASRDDH respectively. The PLB and PG tryptophan peptides have the PLB peptide presents an antibacterial biological activity against Bacillus subtilis, Escherichia coli O157: H7, the peptide has antigenic qualities PG could generate specific antibodies that would provide information to the predominant processes involved in the pathophysiology serving in the diagnosis or prognosis of acute coronary syndrome, which is why the study of fluorescence of the sequences mentioned is interesting. The interaction between PLB and Britton Robinson buffer, PG and Tris-HCl Buffer, was held under controlled conditions of pH, to avoid denaturation of PG and PLB, in this way, the sample does not degrade over time and remains stable be analyzed by fluorescence spectroscopy. The experiments proved the intrinsic fluorescence of tryptophan and thus no Rhodamine B-labeling is performed, the amount of fluorescent emission intensity increased significantly in fluorescence as the concentration increases, the effect itself of intrinsic fluorescence of the PLB and PG samples. To initially characterize the samples UV-Vis spectra and absorption Maldi Ms Toff taken subsequently evaluated by emission spectroscopy (fluorescence) and PG each sample PLB. The correlation coefficients for PLB (0.93) and PG (0.98), with deviations are below 1% and 5% dilutions are evaluated involving the working range of the standard curve. Calibration curves for PG and PLB, the method applied to the PLB and PG samples where obtained detection limits were: 7.95x10-6 [mol / L] and 2.12 x10-7 [mol / L], the limits of quantification 2.65 x10-5 [mol / L] and 7.06x10-5 [mol / L] respectively. According to the results obtained in this work the fluorescence is a highly sensitive method, with minimal and even trace solutions.application/pdfspaUniversidad Industrial de SantanderFacultad de CienciasQuímicaEscuela de QuímicaFluorescenciaPéptidosEspectro De FluorescenciaMarcador Fluorescente.FluorescenceSpectroscopicPeptidesSpectrum Of FluorescenceScoreboard Fluorescent.Implementación de un método de análisis de péptidos de cadena corta (5-30 aminoácidos) por espectroscopia de fluorescenciaImplementation of a method of analysis of peptides decadena cuts (5 - 30 amino acids) for espectroscopia of fluorescenceTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcceORIGINALCarta de autorización.pdfapplication/pdf25222https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/6b122361-1471-4ea4-85a6-e51e6d151761/download84775ede6fe2aec8bca77d5f80748412MD51Documento.pdfapplication/pdf6058272https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/e6e03260-d2ba-4709-b2f2-648a3d3a8263/downloadd7a5cb730b3dd179ca86b66d91b7f9f4MD52Nota de proyecto.pdfapplication/pdf77622https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/786d71aa-3514-4577-ab5f-8f178162f395/downloadce7aa0345c2b0bfc784c56a52ab7d8a5MD5320.500.14071/29961oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/299612024-03-03 15:36:51.229http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/open.accesshttps://noesis.uis.edu.coDSpace at UISnoesis@uis.edu.co