Comparación de la capacidad de replicación in vitro, susceptibilidad a neutralización por anticuerpos y tipo genético entre una cepa de virus dengue serotipo tres de Colombia y una del sur de Asia

El virus dengue serotipo 3 introducido en Colombia en 2001 ha causado epidemias de dengue pero casos severos han sido infrecuentes. Al contrario, la circulación del virusen Asia se ha asociado con dengue hemorrágico. En este estudio se comparó la replicación in vitro, susceptibilidad a neutralizació...

Full description

Autores:
Torres Pimiento, Flor Angela
Tipo de recurso:
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Fecha de publicación:
2008
Institución:
Universidad Industrial de Santander
Repositorio:
Repositorio UIS
Idioma:
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OAI Identifier:
oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/20860
Acceso en línea:
https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/20860
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Palabra clave:
Dengue
Colombia
Sri. Lanka
Efecto citopático
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Tipificación molecular.
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Rights
License
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Se infectaron cultivos de células (C6/36) con preparaciones de 10.000,100, 50 or 25 TCID50 del virus a 32oC.durante 8 días. El efecto citopático (ECP) se registródiariamente y se determinó el título viral en el sobrenadante. Para neutralización, el virus fue incubado 2 h at 37°C con suero positivo o no para anticuerpos anti dengue-3 y la mezcla se adicionó a cultivos celulares. Se consideró neutralización positiva laausencia de antígeno viral o disminución de células que lo expresaban usando unensayo de inmunofluorescencia. Para tipificación genética, se utilizó un protocolo de lareacción en cadena de polimerasa (RSS-PCR). La cepa Colombiana fue menos eficiente para replicarse en cultivos C6/36 que la Asiática. La primera no produjo ECP en las células en ningún día de replicación y encultivos infectados con 100, 50 o 25 TCID50 el título viral fue menor (102.2, 101.5or 0 vs 103.5, 101.5 or 101.5 TCID50). La neutralización con suero anti dengue-3 fue más eficiente para el virus colombiano que el asiático (dilución 10-4.5 vs 10-2.0 para neutralización total), sugiriendo diferencias antigénicas. Ambos virus resultaron subtipoC y no se observaron diferencias en el número de fragmentos amplificados.PregradoBiólogoThe dengue virus serotype 3 introduced in Colombia in 2001 had caused dengue epidemics but severe cases have been infrequent. In contrast, the circulation of the virus in Asia have been associated with hemorrhagic dengue. In this study wascompared the replication in vitro, susceptibility to neutralization by dengue antibodiesand genetic subtype between one virus strain isolated in Santander and one virus from Sri-Lanka. Cell cultures (C6/36) were infected with virus preparations with 10.000,100, 50 or 25 TCID50 during 8 days at 32oC. Daily the citopatic effect (CE) was registered, and theviral titer.was determined in the supernatant. For neutralization, virus was incubated 2h at 37°C in the presence of serum positive or not to dengue-3 antibodies, and the mixture was added to C6/36 cultures. The absence of viral antigen or diminution ofcells that expressed it byimmunofluorescence assay was considered positive neutralization. For genetic subtyping a restricción site-especific-polymerase chain reaction (RSS-PCR) protocol was used. Colombian strain was less efficient to replicate in C6/36 cells than asian strain. Thefirst do not produced CP on cells any day during the replication, and the virus reachedless viral titer in culture infected with 100, 50 or 25 TCID50 (102.2; 101.2 or 0 vs 103.5, 101.5 or 101.5 TCID50). Serum positive for dengue-3 antibodies neutralizedmore efficiently colombian virus strain than asian virus strain (dilution 10-4.5 vs 10-2.0to total neutralization), suggesting antigenic differences. Both viruses resulted subtype C anddifferences in the number of amplified fragments was not observed.application/pdfspaUniversidad Industrial de SantanderFacultad de CienciasBiologíaEscuela de BiologíaDengueColombiaSri. LankaEfecto citopáticoneutralizaciónTipificación molecular.DengueColombiaSri. LankaCitopatic effectNeutralizationmolecular typingComparación de la capacidad de replicación in vitro, susceptibilidad a neutralización por anticuerpos y tipo genético entre una cepa de virus dengue serotipo tres de Colombia y una del sur de AsiaComparision of the capacity of replication in vitro, susceptibility to neutralization by dengue antibodies and genetic subtype between two dengue virus serotype 3 strains isolated in colombia and asia.Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcceORIGINALDocumento.pdfapplication/pdf336754https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/5172bc2c-7e12-4871-8560-acb995458e7e/download824c85204b7649b7d87ec36d1723ac15MD51Nota de proyecto.pdfapplication/pdf67425https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/aa1dab78-8d1c-4550-ae3a-ae49a832ac3d/downloadcd8efbccd1de57dd4644197104030afcMD5220.500.14071/20860oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/208602024-03-03 12:02:02.348http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/open.accesshttps://noesis.uis.edu.coDSpace at UISnoesis@uis.edu.co

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