Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)

El biodiésel es un combustible funcional que podría remplazar parcial o totalmente al petrodiésel. Usualmente, es sintetizado mediante transesterificación básica. Se obtiene de fuentes renovables como el aceite de palma y puede utilizarse en motores diesel convencionales. Sin embargo, la catálisis b...

Full description

Autores:: Luque Diaz, Andres Arturo

Tipo de recurso:: http://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce

Fecha de publicación:: 2018

Institución:: Universidad Industrial de Santander

Repositorio:: Repositorio UIS

Idioma:: spa

id	UISANTADR2_3ec913858ca5c886970772e0f9ae650c
oai_identifier_str	oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/37887
network_acronym_str	UISANTADR2
network_name_str	Repositorio UIS
repository_id_str
dc.title.none.fl_str_mv	Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)
dc.title.english.none.fl_str_mv	Heterologous expression of bacillus subtilis lipase lipa (bsla) (pdb: 2qxu) in escherichia coli: use of a soluble variant for enzymatic transesterification of african palm oil with methanol (biodiesel)*
title	Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)
spellingShingle	Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel) Lipa Bacillus Subtilis Solubilidad Diseño Racional De Proteínas Acoplamiento Molecular Dinámica Molecular Transesterificación Aceite De Palma Biodiésel (Fame) 1H-Rmn. Lipa Bacillus Subtilis Solubility Rational Protein Design Molecular Docking Molecular Dynamics Transesterification Palm Oil Biodiesel (Fame) 1H-Rmn.
title_short	Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)
title_full	Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)
title_fullStr	Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)
title_full_unstemmed	Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)
title_sort	Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)
dc.creator.fl_str_mv	Luque Diaz, Andres Arturo
dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv	Hernandez Torres, Jorge Serna Daza, Oriana Danuta Barraza Gomez, Jefferson Yadir
dc.contributor.author.none.fl_str_mv	Luque Diaz, Andres Arturo
dc.subject.none.fl_str_mv	Lipa Bacillus Subtilis Solubilidad Diseño Racional De Proteínas Acoplamiento Molecular Dinámica Molecular Transesterificación Aceite De Palma Biodiésel (Fame) 1H-Rmn.
topic	Lipa Bacillus Subtilis Solubilidad Diseño Racional De Proteínas Acoplamiento Molecular Dinámica Molecular Transesterificación Aceite De Palma Biodiésel (Fame) 1H-Rmn. Lipa Bacillus Subtilis Solubility Rational Protein Design Molecular Docking Molecular Dynamics Transesterification Palm Oil Biodiesel (Fame) 1H-Rmn.
dc.subject.keyword.none.fl_str_mv	Lipa Bacillus Subtilis Solubility Rational Protein Design Molecular Docking Molecular Dynamics Transesterification Palm Oil Biodiesel (Fame) 1H-Rmn.
description	El biodiésel es un combustible funcional que podría remplazar parcial o totalmente al petrodiésel. Usualmente, es sintetizado mediante transesterificación básica. Se obtiene de fuentes renovables como el aceite de palma y puede utilizarse en motores diesel convencionales. Sin embargo, la catálisis básica genera productos no deseados que elevan los costos de operación. Una alternativa para la producción de biodiésel es el uso de catalizadores biológicos como las lipasas. En nuestro laboratorio logramos demostrar que la lipasa A de Bacillus subtilis (BSLA) tiene potencial en la producción enzimática de biodiésel. No obstante, esta enzima se expresa de forma insoluble en E. coli formando cuerpos de inclusión, lo que obliga a reconstituir la enzima y elevar los costos de producción. Este trabajo de investigación se propuso desarrollar versiones solubles de BSLA, concebidas mediante diseño racional. Inicialmente, se llevaron a cabo análisis de acoplamiento y dinámica molecular que demostraron la viabilidad in silico de dos versiones solubles, bajo condiciones de reacción específicas. Posteriormente, ambas lipasas fueron clonadas en el vector pET-22b, se sobreexpresaron en E. coli y se comprobó la actividad hidrolasa de extractos crudos frente al p-NPB. Los mutantes presentaron máxima actividad a 40 °C y pH 9. Finalmente, se evaluó la producción de biodiésel. Los rendimientos fueron bajos (1-3%), lo cual puede atribuirse a la baja carga enzimática (1 U) y a las condiciones de reacción.
publishDate	2018
dc.date.available.none.fl_str_mv	2018 2024-03-03T23:57:38Z
dc.date.created.none.fl_str_mv	2018
dc.date.issued.none.fl_str_mv	2018
dc.date.accessioned.none.fl_str_mv	2024-03-03T23:57:38Z
dc.type.local.none.fl_str_mv	Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado
dc.type.hasversion.none.fl_str_mv	http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.coar.none.fl_str_mv	http://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
format	http://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv	https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/37887
dc.identifier.instname.none.fl_str_mv	Universidad Industrial de Santander
dc.identifier.reponame.none.fl_str_mv	Universidad Industrial de Santander
dc.identifier.repourl.none.fl_str_mv	https://noesis.uis.edu.co
url	https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/37887 https://noesis.uis.edu.co
identifier_str_mv	Universidad Industrial de Santander
dc.language.iso.none.fl_str_mv	spa
language	spa
dc.rights.none.fl_str_mv	http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.rights.coar.fl_str_mv	http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.rights.license.none.fl_str_mv	Attribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)
dc.rights.uri.none.fl_str_mv	http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0
dc.rights.creativecommons.none.fl_str_mv	Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)
rights_invalid_str_mv	Attribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0) http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0 Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0) http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.format.mimetype.none.fl_str_mv	application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv	Universidad Industrial de Santander
dc.publisher.faculty.none.fl_str_mv	Facultad de Ciencias
dc.publisher.program.none.fl_str_mv	Biología
dc.publisher.school.none.fl_str_mv	Escuela de Biología
publisher.none.fl_str_mv	Universidad Industrial de Santander
institution	Universidad Industrial de Santander
bitstream.url.fl_str_mv	https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/4102c1ba-a489-451a-a961-be662109042f/download https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/03ba601f-22fd-4eed-b6ef-6f7e8f299c46/download https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/9301d1ee-7dfb-4f0f-a2a6-81d5aeddcffa/download
bitstream.checksum.fl_str_mv	e96d6dd8060e4cd49e0084d76bf5bfc7 b4e46cf14b61c9baf2797a31636c53cc 847cb88e6fc0a2677a406fe875c971e1
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv	MD5 MD5 MD5
repository.name.fl_str_mv	DSpace at UIS
repository.mail.fl_str_mv	noesis@uis.edu.co
_version_	1808402343782252544
spelling	Attribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Hernandez Torres, JorgeSerna Daza, Oriana DanutaBarraza Gomez, Jefferson YadirLuque Diaz, Andres Arturo2024-03-03T23:57:38Z20182024-03-03T23:57:38Z20182018https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/37887Universidad Industrial de SantanderUniversidad Industrial de Santanderhttps://noesis.uis.edu.coEl biodiésel es un combustible funcional que podría remplazar parcial o totalmente al petrodiésel. Usualmente, es sintetizado mediante transesterificación básica. Se obtiene de fuentes renovables como el aceite de palma y puede utilizarse en motores diesel convencionales. Sin embargo, la catálisis básica genera productos no deseados que elevan los costos de operación. Una alternativa para la producción de biodiésel es el uso de catalizadores biológicos como las lipasas. En nuestro laboratorio logramos demostrar que la lipasa A de Bacillus subtilis (BSLA) tiene potencial en la producción enzimática de biodiésel. No obstante, esta enzima se expresa de forma insoluble en E. coli formando cuerpos de inclusión, lo que obliga a reconstituir la enzima y elevar los costos de producción. Este trabajo de investigación se propuso desarrollar versiones solubles de BSLA, concebidas mediante diseño racional. Inicialmente, se llevaron a cabo análisis de acoplamiento y dinámica molecular que demostraron la viabilidad in silico de dos versiones solubles, bajo condiciones de reacción específicas. Posteriormente, ambas lipasas fueron clonadas en el vector pET-22b, se sobreexpresaron en E. coli y se comprobó la actividad hidrolasa de extractos crudos frente al p-NPB. Los mutantes presentaron máxima actividad a 40 °C y pH 9. Finalmente, se evaluó la producción de biodiésel. Los rendimientos fueron bajos (1-3%), lo cual puede atribuirse a la baja carga enzimática (1 U) y a las condiciones de reacción.PregradoBiólogoBiodiesel is a functional fuel that could partially or entirely replace petrodiesel. It is obtained from renewable sources such as palm oil and can be used in conventional diesel engines. Typically, it is synthesized by basic transesterification. However, basic catalysis generates unwanted products that raise operating costs. An alternative for producing biodiesel is to use biological catalysts such as lipases. In our laboratory we were able to demonstrate that Bacillus subtilis lipase A (BSLA) has potential in the enzymatic production of biodiesel. However, this enzyme forms insoluble inclusion bodies when expressed in E. coli, which forces to reconstitute the enzyme and raises production costs. This research work aimed to develop soluble versions of BSLA, conceived by rational design. Firstly, docking and molecular dynamics analyzes were carried out to demonstrate the viability in silico of two soluble versions, under specific reaction conditions. Subsequently, they were were cloned into the pET-22b and overexpressed in E. coli and the hydrolase activity of crude extracts was monitored against p-Nitrophenyl butyrate. Both mutants showed maximum activity at 40 °C and pH 9. Finally, biodiesel production was evaluated. Yields were low (1-3%), which can be attributed to the low enzymatic load (1 U) and to the reaction conditions.application/pdfspaUniversidad Industrial de SantanderFacultad de CienciasBiologíaEscuela de BiologíaLipaBacillus SubtilisSolubilidadDiseño Racional De ProteínasAcoplamiento MolecularDinámica MolecularTransesterificaciónAceite De PalmaBiodiésel (Fame)1H-Rmn.LipaBacillus SubtilisSolubilityRational Protein DesignMolecular DockingMolecular DynamicsTransesterificationPalm OilBiodiesel (Fame)1H-Rmn.Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)Heterologous expression of bacillus subtilis lipase lipa (bsla) (pdb: 2qxu) in escherichia coli: use of a soluble variant for enzymatic transesterification of african palm oil with methanol (biodiesel)*Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcceORIGINALCarta de autorización.pdfapplication/pdf484975https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/4102c1ba-a489-451a-a961-be662109042f/downloade96d6dd8060e4cd49e0084d76bf5bfc7MD51Documento.pdfapplication/pdf2350356https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/03ba601f-22fd-4eed-b6ef-6f7e8f299c46/downloadb4e46cf14b61c9baf2797a31636c53ccMD52Nota de proyecto.pdfapplication/pdf91822https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/9301d1ee-7dfb-4f0f-a2a6-81d5aeddcffa/download847cb88e6fc0a2677a406fe875c971e1MD5320.500.14071/37887oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/378872024-03-03 18:57:38.312http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/open.accesshttps://noesis.uis.edu.coDSpace at UISnoesis@uis.edu.co

Expresión heteoróloga de la lipasa lipa de bacillus subtilis (bsla)(pdb: 2qxu) en escherichia coli: uso de una variante soluble para la transesterificación enzimática del aceite de palma africana con metanol (biodiesel)

Publicaciones similares