Expresión del cotransportador sodio/yodo (nis) en células derivadas de cáncer de colon: análisis de su efecto en el metabolismo glucolítico celular

La proteína NIS es una glicoproteína localizada en la membrana basal de los tirocitos, que cataliza un transporte activo de yodo al interior de la célula. En los humanos dicha proteína se expresa, además de la tiroides, en las glándulas mamarias en periodos de lactancia y gestación, en glándulas sal...

Full description

Autores:
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2015
Institución:
Universidad Distrital Francisco José de Caldas
Repositorio:
RIUD: repositorio U. Distrital
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.udistrital.edu.co:11349/15115
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/11349/15115
Palabra clave:
Licenciatura en Química - Tesis y disertaciones académicas
Colon (Anatomía) - Cáncer
Proteínas
Glicolisis
Rights
License
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
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description La proteína NIS es una glicoproteína localizada en la membrana basal de los tirocitos, que cataliza un transporte activo de yodo al interior de la célula. En los humanos dicha proteína se expresa, además de la tiroides, en las glándulas mamarias en periodos de lactancia y gestación, en glándulas salivales, en la mucosa gástrica, estómago, en cáncer de mama y en los ovarios. Estudios anteriores han demostrado que la transfección de NIS en células derivadas de diferentes tipos de cáncer permite la utilización de radioisótopos de yodo como una herramienta efectiva para el diagnóstico y tratamiento de este tipo de patologías, de forma similar a como se utiliza actualmente para el diagnóstico y tratamiento de patologías tiroideas. Sin embargo, para una óptima utilización de este nuevo tipo de tratamientos es importante comprender cómo la introducción de esta proteína puede afectar el metabolismo de las células cancerosas. En la Unidad TIRO-MATOs (Facultad de Medicina, Universidad de Niza, Francia), se desarrolló una línea de células de carcinoma de colon (HT29) que expresan de forma estable el gen nis, (HT29-NIS). A partir de esta línea celular, en el presente trabajo se evaluó el efecto de la transfección de la proteína NIS sobre el metabolismo glucolítico de las células HT29 sometidas a condiciones de hipoxia y normoxia, comparando la viabilidad y proliferación, y la captación de glucosa entre las células HT29 y HT29-NIS por medio de la sonda de glucosa 2-NBDG. También en este estudio se analizó la expresión de algunos genes implicados en la vía glucolítica celular como: GLUT-1, HK-1 y PK-M2 mediante RT-PCR. Los resultados determinaron que la viabilidad de las dos líneas celulares no se ve afectada significativamente por el tiempo de cultivo. Respecto a la captación de glucosa se encontró que el metabolismo de las células es heterogéneo, pero que al exponer las células a 24 horas de hipoxia este metabolismo tiende a homogenizarse ya que la mayor proporción de las células tiende a captar la misma concentración de glucosa, por otro lado se encontró que la línea celular HT29-NIS capta una mayor concentración de glucosa que la línea celular HT29-WT tanto en hipoxia como en normoxia. En cuanto a la transcripción de los genes analizados se observó un aumento en la expresión de cada uno de ellos en ambas líneas celulares luego del tratamiento con hipoxia, además que las células transfectadas con NIS presentan un aumento mayor de transcripción de los genes respecto a las células silvestres.
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Sin embargo, para una óptima utilización de este nuevo tipo de tratamientos es importante comprender cómo la introducción de esta proteína puede afectar el metabolismo de las células cancerosas. En la Unidad TIRO-MATOs (Facultad de Medicina, Universidad de Niza, Francia), se desarrolló una línea de células de carcinoma de colon (HT29) que expresan de forma estable el gen nis, (HT29-NIS). A partir de esta línea celular, en el presente trabajo se evaluó el efecto de la transfección de la proteína NIS sobre el metabolismo glucolítico de las células HT29 sometidas a condiciones de hipoxia y normoxia, comparando la viabilidad y proliferación, y la captación de glucosa entre las células HT29 y HT29-NIS por medio de la sonda de glucosa 2-NBDG. También en este estudio se analizó la expresión de algunos genes implicados en la vía glucolítica celular como: GLUT-1, HK-1 y PK-M2 mediante RT-PCR. Los resultados determinaron que la viabilidad de las dos líneas celulares no se ve afectada significativamente por el tiempo de cultivo. Respecto a la captación de glucosa se encontró que el metabolismo de las células es heterogéneo, pero que al exponer las células a 24 horas de hipoxia este metabolismo tiende a homogenizarse ya que la mayor proporción de las células tiende a captar la misma concentración de glucosa, por otro lado se encontró que la línea celular HT29-NIS capta una mayor concentración de glucosa que la línea celular HT29-WT tanto en hipoxia como en normoxia. En cuanto a la transcripción de los genes analizados se observó un aumento en la expresión de cada uno de ellos en ambas líneas celulares luego del tratamiento con hipoxia, además que las células transfectadas con NIS presentan un aumento mayor de transcripción de los genes respecto a las células silvestres.NIS protein is a glycoprotein located in the basement membrane of thyrocytes, which catalyzes an active iodide transport into the cell. In humans this protein is also thyroid, mammary gland in pregnancy and lactation periods in salivary glands in the gastric mucosa, stomach, breast and ovarian expressed. Previous studies have shown that transfection of NIS in cells derived from different cancers allows the use of radioisotopes of iodine as an effective tool for diagnosis and treatment of such diseases, similar to as is currently used for diagnosis and treatment of thyroid diseases. However, for optimal use of this new type of treatment it is important to understand how the introduction of this protein may affect the metabolism of cancer cells. In the SHOT-Matos (Faculty of Medicine, University of Nice, France) unit, a cell line of colon carcinoma (HT29) stably expressing the nis gene was developed (HT29-NIS). From this cell line, in this study the effect of transfection of the NIS protein on the glycolytic metabolism of HT29 cells under normoxic and hypoxic conditions was assessed by comparing the viability and proliferation, and glucose uptake between HT29 and HT29-cells using NIS probe 2-NBDG glucose. Also in this study the expression of some genes involved was analyzed in cell glycolytic pathway as GLUT-1, HK-1 and PK-M2 by RT-PCR. The results determined that the viability of the two cell lines is not significantly affected by the culture time. Regarding glucose uptake was found that the metabolism of cells is heterogeneous, but at 24 hours after exposing cells hypoxia this metabolism tends to be homogenized as the larger proportion of the cells tend to capture the same glucose concentration, on the other hand it was found that the cell line HT29-NIS captures a greater glucose concentration that the cell line HT29-WT both normoxia and hypoxia. As for the transcription of the genes analyzed increased expression of each in both cell lines after treatment with hypoxia it was observed, with cells transfected with NIS exhibiting a greater increase transcription of genes relative to the silvestres.Expresión cells sodium / iodide symporter (NIS) in cells derived from colon cancer: analysis of their effect on cell glycolytic metabolismpdfspaAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/Restringido (Solo Referencia)http://purl.org/coar/access_right/c_16ecExpresión del cotransportador sodio/yodo (nis) en células derivadas de cáncer de colon: análisis de su efecto en el metabolismo glucolítico celularExpression of sodium / iodine symporter (NIS) in cells derived from colon cancer: analysis of their effect on cellular glycolytic metabolismLicenciatura en Química - Tesis y disertaciones académicasColon (Anatomía) - CáncerProteínasGlicolisisinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fTHUMBNAILRomeroRodríguezAndrésFelipe2015.pdf.jpgRomeroRodríguezAndrésFelipe2015.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg5265http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/15115/4/RomeroRodr%c3%adguezAndr%c3%a9sFelipe2015.pdf.jpgb42f968b5ebffb73971e9fb88c435ee6MD54open accessCC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-89http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/15115/2/license_rdf42dd12a06de379d3ffa39b67dc9c7affMD52open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-85896http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/15115/3/license.txtb204d61d4cc8bf0ee3a2b0e84c5755ddMD53open accessORIGINALRomeroRodríguezAndrésFelipe2015.pdfRomeroRodríguezAndrésFelipe2015.pdfTrabajo de Gradoapplication/pdf1102170http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/15115/1/RomeroRodr%c3%adguezAndr%c3%a9sFelipe2015.pdf837ba38258f43873dbf88dd5a6ff5692MD51metadata 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