Diseño de un Marcador Molecular para Identificar el Segmento VS4 el Gen omp1 de Chlamydia Trachomatis en Mujeres Embarazadas con Presión Arterial Alta Asociada a Preeclampsia

Chlamydia trachomatis es una bacteria gram negativa intracelular obligada que causa grandes afecciones a la salud (ITS) de mujeres, hombres y niños y que en la mayoría de los casos no presenta síntomas dificultando su detección. Adicionalmente, causa diferentes patologías dependiendo del hospedero y el lugar de infección. Ante esta problemática se planteó diseñar un marcador molecular eficaz, especifico, sensible y económico para identificar el segmento VS4 del gen omp1 de la proteína MOMP de Chlamydia trachomatis en mujeres embarazadas con preeclampsia de un sector de Bogotá e identificar las serovariantes presentes en este segmento que causan enfermedades o infecciones genitales. Para lograrlo se recurrió a programas y herramientas bioinformáticas como, por un lado GenBank, PickPrimer y Blast de NCBI, por otro lado NetPrimer y Primer3 para el diseño y comprobación teórica de estos marcadores moleculares; mientras que para la amplificación del segmento se realizaron Reacciones en Cadena de Polimerasa (PCR) convencional, en caliente y en tiempo real para, finalmente, dar lectura en electroforesis con gel de agarosa. Posteriormente, se obtuvo como resultado tres pares de marcadores moleculares llamados SV2, SV4 y SV3 que amplificaron segmentos de 128 pb (región VS3), 277 pb (región VS4) y 282 pb (región VS3-VS4) respectivamente, en mujeres y hombres por medio de la técnica HotStartPCR; adicionalmente, el par de marcadores moleculares SV3 mostró una alta sensibilidad y especificidad ya que pudo identificar la presencia de C. trachomitis en muestras de ADN de tan solo 3ng/µl al realizarse la prueba con qPCR y en cuanto a las seroviariantes, se reconocieron diez derivadas de las variantes B, D, E, F, G y L, causantes de enfermedades genitourinarias y oculares. Se puede concluir que los marcadores moleculares diseñados en este trabajo cumplen con los requisitos deseados pero necesitan ser aplicados con la técnica de HotStartPCR o qPCR y permite detectar esta ITS tanto en hombre como mujeres, sin embargo se recomienda realizar un estudio enfocado a mujeres embarazadas con preeclampsia porque esta parte del estudio no pudo ser completada.

• Tipo de recurso: Trabajo de grado de pregrado
• Fecha de publicación: 2015
• Institución: Universidad Distrital Francisco José de Caldas
• Repositorio: RIUD: repositorio U. Distrital
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repository.udistrital.edu.co:11349/2925
• Acceso en línea: http://hdl.handle.net/11349/2925
• Palabra clave: Chlamydia trachomatis; Gen omp1; ITS; Marcador molecular; Bioinformática; HotStartPCR; Serovariante; Segmento VS4; Proteína MOMP; Chlamydia trachomatis; Gene omp1; STD; Molecular marker; Bioinformatic; HotStartPCR; Serovar; VS4 segment; MOMP protein
• License: Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional