Diseño de un Marcador Molecular para Identificar el Segmento VS4 el Gen omp1 de Chlamydia Trachomatis en Mujeres Embarazadas con Presión Arterial Alta Asociada a Preeclampsia
Chlamydia trachomatis es una bacteria gram negativa intracelular obligada que causa grandes afecciones a la salud (ITS) de mujeres, hombres y niños y que en la mayoría de los casos no presenta síntomas dificultando su detección. Adicionalmente, causa diferentes patologías dependiendo del hospedero y...
- Autores:
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2015
- Institución:
- Universidad Distrital Francisco José de Caldas
- Repositorio:
- RIUD: repositorio U. Distrital
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repository.udistrital.edu.co:11349/2925
- Acceso en línea:
- http://hdl.handle.net/11349/2925
- Palabra clave:
- Chlamydia trachomatis
Gen omp1
ITS
Marcador molecular
Bioinformática
HotStartPCR
Serovariante
Segmento VS4
Proteína MOMP
Chlamydia trachomatis
Gene omp1
STD
Molecular marker
Bioinformatic
HotStartPCR
Serovar
VS4 segment
MOMP protein
- Rights
- License
- Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
Summary: | Chlamydia trachomatis es una bacteria gram negativa intracelular obligada que causa grandes afecciones a la salud (ITS) de mujeres, hombres y niños y que en la mayoría de los casos no presenta síntomas dificultando su detección. Adicionalmente, causa diferentes patologías dependiendo del hospedero y el lugar de infección. Ante esta problemática se planteó diseñar un marcador molecular eficaz, especifico, sensible y económico para identificar el segmento VS4 del gen omp1 de la proteína MOMP de Chlamydia trachomatis en mujeres embarazadas con preeclampsia de un sector de Bogotá e identificar las serovariantes presentes en este segmento que causan enfermedades o infecciones genitales. Para lograrlo se recurrió a programas y herramientas bioinformáticas como, por un lado GenBank, PickPrimer y Blast de NCBI, por otro lado NetPrimer y Primer3 para el diseño y comprobación teórica de estos marcadores moleculares; mientras que para la amplificación del segmento se realizaron Reacciones en Cadena de Polimerasa (PCR) convencional, en caliente y en tiempo real para, finalmente, dar lectura en electroforesis con gel de agarosa. Posteriormente, se obtuvo como resultado tres pares de marcadores moleculares llamados SV2, SV4 y SV3 que amplificaron segmentos de 128 pb (región VS3), 277 pb (región VS4) y 282 pb (región VS3-VS4) respectivamente, en mujeres y hombres por medio de la técnica HotStartPCR; adicionalmente, el par de marcadores moleculares SV3 mostró una alta sensibilidad y especificidad ya que pudo identificar la presencia de C. trachomitis en muestras de ADN de tan solo 3ng/µl al realizarse la prueba con qPCR y en cuanto a las seroviariantes, se reconocieron diez derivadas de las variantes B, D, E, F, G y L, causantes de enfermedades genitourinarias y oculares. Se puede concluir que los marcadores moleculares diseñados en este trabajo cumplen con los requisitos deseados pero necesitan ser aplicados con la técnica de HotStartPCR o qPCR y permite detectar esta ITS tanto en hombre como mujeres, sin embargo se recomienda realizar un estudio enfocado a mujeres embarazadas con preeclampsia porque esta parte del estudio no pudo ser completada. |
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