Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia

La recolección de tejidos para la extracción de ADN se ha convertido en una práctica común cuando se hacen colecciones botánicas. Sin embargo, poco se conoce de la posible degradación que sufre el ADN desde el momento de la colección del espécimen botánico, hasta la toma del tejido para someterlo a...

Full description

Autores:
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2022
Institución:
Universidad Distrital Francisco José de Caldas
Repositorio:
RIUD: repositorio U. Distrital
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.udistrital.edu.co:11349/31563
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/11349/31563
Palabra clave:
Altitud
Precipitación
Temperatura
Extracción de ADN
Silica gel
Parcelas
Ingeniería forestal -- Tesis y disertaciones académicas
Células y tejidos vegetales
ADN -- Genética
Material vegetal
Altitude
Precipitation
Temperature
DNA extraction
Silica gel
Plots
Rights
License
Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional
id UDISTRITA2_2807eea028f9b67e8cef081dd722eb4c
oai_identifier_str oai:repository.udistrital.edu.co:11349/31563
network_acronym_str UDISTRITA2
network_name_str RIUD: repositorio U. Distrital
repository_id_str
dc.title.spa.fl_str_mv Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia
dc.title.titleenglish.spa.fl_str_mv Evaluation and comparison of DNA extracted from plant specimens from different life zones of Colombia
title Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia
spellingShingle Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia
Altitud
Precipitación
Temperatura
Extracción de ADN
Silica gel
Parcelas
Ingeniería forestal -- Tesis y disertaciones académicas
Células y tejidos vegetales
ADN -- Genética
Material vegetal
Altitude
Precipitation
Temperature
DNA extraction
Silica gel
Plots
title_short Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia
title_full Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia
title_fullStr Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia
title_full_unstemmed Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia
title_sort Evaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de Colombia
dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv Cortés Ballen, Rocío
dc.subject.spa.fl_str_mv Altitud
Precipitación
Temperatura
Extracción de ADN
Silica gel
Parcelas
topic Altitud
Precipitación
Temperatura
Extracción de ADN
Silica gel
Parcelas
Ingeniería forestal -- Tesis y disertaciones académicas
Células y tejidos vegetales
ADN -- Genética
Material vegetal
Altitude
Precipitation
Temperature
DNA extraction
Silica gel
Plots
dc.subject.lemb.none.fl_str_mv Ingeniería forestal -- Tesis y disertaciones académicas
Células y tejidos vegetales
ADN -- Genética
Material vegetal
dc.subject.keyword.spa.fl_str_mv Altitude
Precipitation
Temperature
DNA extraction
Silica gel
Plots
description La recolección de tejidos para la extracción de ADN se ha convertido en una práctica común cuando se hacen colecciones botánicas. Sin embargo, poco se conoce de la posible degradación que sufre el ADN desde el momento de la colección del espécimen botánico, hasta la toma del tejido para someterlo a un proceso de deshidratación rápida, tiempo que puede variar desde unos pocos minutos, si se hace de manera inmediata, hasta alrededor de 12 horas, cuando se monta el espécimen en papel periódico. Teniendo en cuenta que los bancos de tejidos para la extracción de ADN deben preservarlos a perpetuidad, es importante que las prácticas que usemos actualmente sean adecuadas para garantizar ADN de calidad y pureza óptimas. Con el objeto de evaluar si la concentración y pureza del ADN extraído de los tejidos varía con la altitud, precipitación y temperatura de la zona de colección, se evaluó el ADN extraído de 3.356 especímenes vegetales provenientes de 18 parcelas permanentes ubicadas en siete zonas de vida, en diez departamentos de Colombia. El estudio correlacionó factores climáticos tales como la precipitación, temperatura y altitud, con la concentración y pureza del ADN obtenido. Al comparar la concentración del ADN proveniente de diferentes zonas de vida se evidenció que las mayores concentraciones se obtuvieron en muestras de las parcelas ubicadas en las zonas de vida Bosque húmedo montano y Bosque húmedo premontano. Del mismo modo, la concentración obtenida de tejidos provenientes de las zonas de vida Bosque húmedo montano, Bosque húmedo premontano y Bosque seco Tropical, presentaron diferencias significativas con aquellas del Bosque húmedo y Bosque muy húmedo Tropical. Del mismo modo, se encontró que a mayor altitud (msnm), se logró obtener una mayor concentración de ADN, mientras que, en aquellas zonas con mayores valores de precipitación y temperatura, se obtuvieron menores concentraciones. En cuanto a la pureza, en la mayoría de las extracciones realizadas se obtuvo ADN de muy baja pureza, y aunque se encontró una tendencia a encontrar mayor pureza del ADN en muestras provenientes del Bosque húmedo montano y Bosque húmedo premontano, así como una correlación positiva con la altitud, los estadísticos usados no descartan el azar como la principal causa de las diferencias de valores de pureza en las muestras estudiadas. Con base en los resultados podemos concluir que la práctica de colectar los tejidos para la extracción de ADN horas después de colectado el espécimen, se puede realizar en zonas de Bosque húmedo montano y premontano sin afectar la calidad del ADN, pero que en las otras zonas de vida estudiadas (bmh-MB, bh-T, bmh-T, bs-PM y bs-T), se debe colectar el tejido en el campo, de manera simultánea con la colección del espécimen botánico
publishDate 2022
dc.date.created.none.fl_str_mv 2022-10-20
dc.date.accessioned.none.fl_str_mv 2023-06-15T17:33:11Z
dc.date.available.none.fl_str_mv 2023-06-15T17:33:11Z
dc.type.spa.fl_str_mv bachelorThesis
dc.type.degree.spa.fl_str_mv Investigación-Innovación
dc.type.driver.spa.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
dc.type.coar.spa.fl_str_mv http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
format http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv http://hdl.handle.net/11349/31563
url http://hdl.handle.net/11349/31563
dc.language.iso.spa.fl_str_mv spa
language spa
dc.rights.*.fl_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional
Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional
dc.rights.coar.fl_str_mv http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.rights.uri.*.fl_str_mv http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.rights.acceso.spa.fl_str_mv Abierto (Texto Completo)
rights_invalid_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
Abierto (Texto Completo)
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv pdf
institution Universidad Distrital Francisco José de Caldas
bitstream.url.fl_str_mv http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/5/PabonSarmientoMariaCamila2022.pdf.pdf
http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/2/Licencia%20de%20uso%20y%20publicacion.pdf
http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/6/license_rdf
http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/7/license.txt
http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/8/PabonSarmientoMariaCamila2022.pdf.pdf.jpg
http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/9/Licencia%20de%20uso%20y%20publicacion.pdf.jpg
bitstream.checksum.fl_str_mv 29cf21d0efa0c1b436c3ecbbc1b109ca
bba0142a6213883135867c736649db01
4460e5956bc1d1639be9ae6146a50347
997daf6c648c962d566d7b082dac908d
e5f9229f5de93e3db000a9542e129cf4
c760896af7e1949f5c40d0279a6a9135
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositorio Institucional Universidad Distrital - RIUD
repository.mail.fl_str_mv repositorio@udistrital.edu.co
_version_ 1803712700769894400
spelling Cortés Ballen, RocíoPabón Sarmiento, María Camila2023-06-15T17:33:11Z2023-06-15T17:33:11Z2022-10-20http://hdl.handle.net/11349/31563La recolección de tejidos para la extracción de ADN se ha convertido en una práctica común cuando se hacen colecciones botánicas. Sin embargo, poco se conoce de la posible degradación que sufre el ADN desde el momento de la colección del espécimen botánico, hasta la toma del tejido para someterlo a un proceso de deshidratación rápida, tiempo que puede variar desde unos pocos minutos, si se hace de manera inmediata, hasta alrededor de 12 horas, cuando se monta el espécimen en papel periódico. Teniendo en cuenta que los bancos de tejidos para la extracción de ADN deben preservarlos a perpetuidad, es importante que las prácticas que usemos actualmente sean adecuadas para garantizar ADN de calidad y pureza óptimas. Con el objeto de evaluar si la concentración y pureza del ADN extraído de los tejidos varía con la altitud, precipitación y temperatura de la zona de colección, se evaluó el ADN extraído de 3.356 especímenes vegetales provenientes de 18 parcelas permanentes ubicadas en siete zonas de vida, en diez departamentos de Colombia. El estudio correlacionó factores climáticos tales como la precipitación, temperatura y altitud, con la concentración y pureza del ADN obtenido. Al comparar la concentración del ADN proveniente de diferentes zonas de vida se evidenció que las mayores concentraciones se obtuvieron en muestras de las parcelas ubicadas en las zonas de vida Bosque húmedo montano y Bosque húmedo premontano. Del mismo modo, la concentración obtenida de tejidos provenientes de las zonas de vida Bosque húmedo montano, Bosque húmedo premontano y Bosque seco Tropical, presentaron diferencias significativas con aquellas del Bosque húmedo y Bosque muy húmedo Tropical. Del mismo modo, se encontró que a mayor altitud (msnm), se logró obtener una mayor concentración de ADN, mientras que, en aquellas zonas con mayores valores de precipitación y temperatura, se obtuvieron menores concentraciones. En cuanto a la pureza, en la mayoría de las extracciones realizadas se obtuvo ADN de muy baja pureza, y aunque se encontró una tendencia a encontrar mayor pureza del ADN en muestras provenientes del Bosque húmedo montano y Bosque húmedo premontano, así como una correlación positiva con la altitud, los estadísticos usados no descartan el azar como la principal causa de las diferencias de valores de pureza en las muestras estudiadas. Con base en los resultados podemos concluir que la práctica de colectar los tejidos para la extracción de ADN horas después de colectado el espécimen, se puede realizar en zonas de Bosque húmedo montano y premontano sin afectar la calidad del ADN, pero que en las otras zonas de vida estudiadas (bmh-MB, bh-T, bmh-T, bs-PM y bs-T), se debe colectar el tejido en el campo, de manera simultánea con la colección del espécimen botánicoTissue collection for DNA extraction has become a common practice when making botanical collections. However, little is known about the possible degradation that DNA undergoes from the moment of collection of the botanical specimen until the tissue is taken to subject it to a rapid dehydration process, a time that can vary from a few minutes, if done immediately, up to about 12 hours, when the specimen is mounted on newsprint. Considering that tissue banks for DNA extraction must preserve them in perpetuity, it is important that the practices we use today are adequate to ensure DNA of optimal quality and purity. In order to evaluate whether the concentration and purity of the DNA extracted from the tissues vary with the altitude, precipitation, and temperature of the collection area, the DNA extracted from 3,356 plant specimens from 18 permanent plots located in seven life zones was evaluated. , in ten departments of Colombia. The study correlated climatic factors such as precipitation, temperature, and altitude, with the concentration and purity of the DNA obtained. When comparing the concentration of DNA from different life zones, it was shown that the highest concentrations were obtained in samples from the plots located in the Humid Montane Forest and Humid Premontane Forest life zones. Likewise, the concentration obtained from tissues from the Moist Montane Forest, Premontane Moist Forest, and Tropical Dry Forest life zones showed significant differences from those of the Moist Forest and Very Humid Tropical Forest. In the same way, it was found that at higher altitudes (masl), a higher concentration of DNA was obtained, while in those areas with higher values ​​of precipitation and temperature, lower concentrations were obtained. Regarding purity, in most of the extractions carried out DNA of very low purity was obtained, and although a tendency was found to find higher DNA purity in samples from the Humid Montane Forest and Premontane Humid Forest, as well as a positive correlation with altitude, the statistics used do not rule out chance as the main cause of the differences in purity values ​​in the samples studied. Based on the results, we can conclude that the practice of collecting tissues for DNA extraction hours after the specimen has been collected can be carried out in areas of the montane and premontane humid forests without affecting the quality of the DNA, but in the other areas of life studied (bmh-MB, bh-T, bmh-T, bs-PM, and bs-T), the tissue must be collected in the field, simultaneously with the collection of the botanical specimen.Proyecto BRAVOpdfspaAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 InternacionalAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/Abierto (Texto Completo)http://purl.org/coar/access_right/c_abf2AltitudPrecipitaciónTemperaturaExtracción de ADNSilica gelParcelasIngeniería forestal -- Tesis y disertaciones académicasCélulas y tejidos vegetalesADN -- GenéticaMaterial vegetalAltitudePrecipitationTemperatureDNA extractionSilica gelPlotsEvaluación y comparación del ADN extraído de especímenes vegetales provenientes de diferentes zonas de vida de ColombiaEvaluation and comparison of DNA extracted from plant specimens from different life zones of ColombiabachelorThesisInvestigación-Innovacióninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fORIGINALPabonSarmientoMariaCamila2022.pdf.pdfPabonSarmientoMariaCamila2022.pdf.pdfTrabajo de gradoapplication/pdf839583http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/5/PabonSarmientoMariaCamila2022.pdf.pdf29cf21d0efa0c1b436c3ecbbc1b109caMD55open accessLicencia de uso y publicacion.pdfLicencia de uso y publicacion.pdfLicencia de uso y publicaciónapplication/pdf686631http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/2/Licencia%20de%20uso%20y%20publicacion.pdfbba0142a6213883135867c736649db01MD52metadata only accessCC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8805http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/6/license_rdf4460e5956bc1d1639be9ae6146a50347MD56open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-87167http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/7/license.txt997daf6c648c962d566d7b082dac908dMD57open accessTHUMBNAILPabonSarmientoMariaCamila2022.pdf.pdf.jpgPabonSarmientoMariaCamila2022.pdf.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg5119http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/8/PabonSarmientoMariaCamila2022.pdf.pdf.jpge5f9229f5de93e3db000a9542e129cf4MD58open accessLicencia de uso y publicacion.pdf.jpgLicencia de uso y publicacion.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg13041http://repository.udistrital.edu.co/bitstream/11349/31563/9/Licencia%20de%20uso%20y%20publicacion.pdf.jpgc760896af7e1949f5c40d0279a6a9135MD59open access11349/31563oai:repository.udistrital.edu.co:11349/315632023-08-14 12:30:04.959open accessRepositorio Institucional Universidad Distrital - RIUDrepositorio@udistrital.edu.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