Producción de Astaxantina usando las condiciones de estrés acetato de sodio y alta intensidad de luz utilizando la biomasa de la microalga Haematococcus Pluvialis obtenida en el biorreactor Biostat a plus de 5 L

La astaxantina es un carotenoide al que se le considera útil en diversas industrias, además se le reconoce por su potente capacidad antiinflamatoria, anticancerígena y antioxidante. La microalga Haematococcus pluvialis es considerada como la mejor productora natural de astaxantina. En la actualidad,...

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Autores:
Torres Cadavid, Laura
Ubaque Ramírez, Jeimy Lizeth
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2021
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/2829
Acceso en línea:
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/2829
Palabra clave:
Astaxantina
Haematococcus pluvialis
Biostat
Microalga
Biomasa
Biorreactor
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Alta irradiancia
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closedAccess
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Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2021
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description La astaxantina es un carotenoide al que se le considera útil en diversas industrias, además se le reconoce por su potente capacidad antiinflamatoria, anticancerígena y antioxidante. La microalga Haematococcus pluvialis es considerada como la mejor productora natural de astaxantina. En la actualidad, la mayor cantidad de astaxantina se produce de forma sintética, y se comercializa a costos elevados, por esto se ha incrementado el interés por producir este compuesto de forma natural. En este estudio se propone la determinación de la producción de astaxantina usando la biomasa de H. pluvialis obtenida en el Biorreactor BIOSTAT A PLUS de 5 litros, sometiéndose a los factores de estrés acetato de sodio (0,375 mg/L y 0, 750 mg/L) y una irradiancia de 360 lux con luz blanca, en medios BBM y RM, pH 6,8, temperatura 20°C, agitación diaria, aire filtrado, cajas de cultivo celular. Se determinó el cambio morfológico, la concentración de clorofila y astaxantina. Estableciendo que el tratamiento que uso medio RM con 0.375 mg/L de acetato de sodio produjo 6.088 ug/mL de astaxantina. El Anova (95%) realizado no estableció diferencias significativas entre tratamientos para la producción del carotenoide (P>0,05), pero sí para el crecimiento celular (P<0.05), y según el test Tukey HSD este tratamiento tiene significativamente mayor crecimiento celular (3.01 x 108 cel./mL). Esta investigación permite concluir que el uso de la biomasa obtenida de H. pluvialis en el Biorreactor BIOSTAT A PLUS de 5 litros, para someterla a factores de estrés como el acetato de sodio, combinado con alta irradiancia, permite obtener concentraciones óptimas de astaxantina, aplicables en la producción industrial.
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dc.relation.references.spa.fl_str_mv Ramírez Landínez DM. Evaluación del crecimiento y producción de astaxantina por haematococcus pluvialis en un fotobiorreactor tipo airlift. 2013 Jan 1.
Sipaúba-Tavares LH, Millan RN, Berchielli-Morais FA. Effects of some parameters in upscale culture of Haematococcus pluvialis Flotow. Brazilian journal of biology 2013 Aug;73(3):585-591.
Wang B, Zhang Z, Hu Q, Sommerfeld M, Lu Y, Han D. Cellular Capacities for High- Light Acclimation and Changing Lipid Profiles across Life Cycle Stages of the Green Alga Haematococcus pluvialis. PloS one 2014;9(9):e106679.
Tokarz D, Cisek R, El-Ansari O, Espie GS, Fekl U, Barzda V. Organization of astaxanthin within oil bodies of Haematococcus pluvialis studied with polarization- dependent harmonic generation microscopy. PLoS ONE 2014 September;9(9).
Chekanov K, Lobakova E, Selyakh I, Semenova L, Sidorov R, Solovchenko A. Accumulation of Astaxanthin by a New Haematococcus pluvialis Strain BM1 from the White Sea Coastal Rocks (Russia). Marine drugs 2014 Aug 15,;12(8):4504-4520.
Dong S, Huang Y, Zhang R, Wang S, Liu Y. Four Different Methods Comparison for Extraction of Astaxanthin from Green Alga Haematococcus pluvialis. TheScientificWorld 2014 Jan 19,;2014:694305.
Córdoba-Castro, NM., Acero-Reyes, N.L., Duque-Buitrago, L.F., Jiménez-Aguilar, L.J., Serna-Jiménez, J.A. (2015) Obtención y caracterización de astaxantina de la microalga Haematococcus Pluvialis. UGCiencia 21, 73-82.
Granda Jara Gabriela Patricia. PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA A PARTIR DE LA MICROALGA HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS; 2015.Granda Jara Gabriela Patricia. PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA A PARTIR DE LA MICROALGA HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS; 2015.
Régnier P, Bastias J, Rodriguez-Ruiz V, Caballero-Casero N, Caballo C, Sicilia D, et al. Astaxanthin from Haematococcus pluvialis Prevents Oxidative Stress on Human Endothelial Cells without Toxicity. Marine Drugs 2015 May;13(5):2857-2874
Sathasivam R, Radhakrishnan R, Hashem A, Abd Allah EF. Microalgae metabolites: A rich source for food and medicine [Internet]. Vol. 26, Saudi Journal of Biological Sciences. Elsevier B.V.; 2019 [cited 2020 May 5]. p. 709–22.
Niño Castillo CM, Rodríguez Rivera FC, Díaz LE, Lancheros Díaz AG. Evaluación de las condiciones de crecimiento celular para la producción de astaxantina a partir de la microalga Haematococcus pluvialis. Nova [Internet]. 2017 [cited 2020 Apr 11];15(28):19.
Zhang L, Su F, Zhang C, Gong F, Liu J. Changes of Photosynthetic Behaviors and Photoprotection during Cell Transformation and Astaxanthin Accumulation in Haematococcus pluvialis Grown Outdoors in Tubular Photobioreactors. International journal of molecular sciences 2016 Dec 26,;18(1):33.
García Martín Laura. Producción biotecnológica de astaxantina a partir H. pluvialis”. 2018. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. 86p
Reis DF, Machado Junior, Francisco Roberto da Silva, Ores JDC, Lemes AC, Burkert CAV, Burkert, Janaina Fernandes de Medeiros. Influência do CO2 no Crescimento de Haematococcus Pluvialis e na Produção de Carotenoides. Uniciências 2019 Jan 24,;22(3Esp):25.
Zhang C, Zhang L, Liu J. Exogenous sodium acetate enhances astaxanthin accumulation and photoprotection in Haematococcus pluvialis at the non-motile stage. J Appl Phycol [Internet]. 2019 Apr 15 [cited 2020 May 5];31(2):1001–8.
Doria, E. Inuence of Light Stress on the Accumulation of Xantho-phylls and Lipids in Haematococcus Plu-vialis CCALA 1081 Grown under Auto-trophic or Mixotrophic Conditions. (2018) J Marine Biol Aquacult 4(1): 30- 35.
He B, Hou L, Dong M, Shi J, Huang X, Ding Y, et al. Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis: Astaxanthin Induction by High Light with Acetate and Fe 2. International journal of molecular sciences 2018 Jan 7,;19(1):175.
Luo Q, Bian C, Tao M, Huang Y, Zheng Y, Lv Y, et al. Genome and Transcriptome Sequencing of the Astaxanthin-Producing Green Microalga, Haematococcus pluvialis. Genome biology and evolution 2019;11(1):166-173.
Huang L, Gao B, Wu M, Wang F, Zhang C. Comparative transcriptome analysis of a long-time span two-step culture process reveals a potential mechanism for astaxanthin and biomass hyper-accumulation in Haematococcus pluvialis JNU35. Biotechnology for biofuels 2019;12(1):18.
Li F, Cai M, Lin M, Huang X, Wang J, Ke H, et al. Differences between Motile and Nonmotile Cells of Haematococcus pluvialis in the Production of Astaxanthin at Different Light Intensities. Marine Drugs 2019 January;17(1):39.
Miranda AM, Ossa EA, Vargas GJ, Sáez AA. Efecto de las Bajas Concentraciones de Nitratos y Fosfatos sobre la Acumulación de Astaxantina en Haematococcus pluvialis UTEX 2505. Información tecnológica 2019 Feb;30(1):23-32.
Galarza JI, Arredondo Vega BO, Villón J, Henríquez V. Deesterification of astaxanthin and intermediate esters from Haematococcus pluvialis subjected to stress. Biotechnol Reports [Internet]. 2019 Sep;23.
RODRIGUEZ ROMERO LAURA JOHANNA. PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA EN Haematococcus pluvialis BAJO EFECTO DE FACTORES DE ESTRÉS COMO ACETATO DE SODIO Y CLORURO DE SODIO. 2019. Trabajo de grado. Unicolmayor. 103 p.
MANRIQUE PINZÓN Mónica Alejandra y MARÍN CORREDOR DAVID LEONARDO . PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA EN Haematococcus pluvialis BAJO EL EFECTO DE LA DEFICIENCIA DE NITRÓGENO Y ALTA IRRADIANCIA EN EL BIORREACTOR BIOSTAT ® A PLUS. 2019. Trabajo de grado. Unicolmayor 89 p.
Li F, Cai M, Lin M, Huang X, Wang J, Zheng X, et al. Accumulation of Astaxanthin Was Improved by the Nonmotile Cells of Haematococcus pluvialis. BioMed research international 2019;2019:1-7
Ding W, Cui J, Zhao Y, Han B, Li T, Zhao P, et al. Enhancing Haematococcus pluvialis biomass and γ-aminobutyric acid accumulation by two-step cultivation and salt supplementation. Bioresource technology [Internet]. 2019 August [cited 2020 Apr 11]];285.
Liu Yu, Yildiz I. Biorremediación de aguas residuales de minería y producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis. International Journal of Global Warming [Internet]. 2019 August [cited 2020 Apr 15]; 19.
Camacho J, González G, Klotz B. Producción de Astaxantina en Haematococcus pluvialis bajo diferentes condiciones de estrés. Nova [Internet]. 2013 Jun [cited 2020 Apr 11]15;11(19):93.
Abalde J, Orosa M, Torres E, Cid A. LA MICROALGA Haematococcus COMO FUENTE DE ASTAXANTINA [Internet]. 1999 [cited 2020 Apr 14].
Shah M, Liang Y, Cheng J, Daroch M. Astaxanthin-producing green microalga Haematococcus pluvialis: From single cell to high value commercial products. Frontiers [Internet]. 2016 Apr [cited 2020 Apr 14].
Solari S, Vílchez J, Vivar J, Hermosilla N. Astaxantina : antioxidante de origen natural con variadas aplicaciones en cosmética Astaxanthin : natural antioxidants with various applications in cosmetics. Biofarbo [Internet]. 2011 [cited 2020 Apr 14];19(2):6–12.
Roldán P, Mach N. Effect of consumption of astaxanthin in health. Rev Esp Nutr Comunitaria [Internet]. 2012 [cited 2020 Apr 15];18(3):164–77.
Reinoso H, Tordable M, Grosso M. DESDE LA CÉLULA A LA FOTOSÍNTESIS EN PLANTAS SUPERIORES [Internet]. [cited 2020 Apr 15].
Rojas Loria Cesar. Microbiologia General [Internet]. [cited 2021 Feb 13].
Chojnacka K, Marquez F. Kinetic and Stoichiometric Relationships of the Energy and Carbon Metabolism in the Culture of Microalgae. Biotechnol [Internet]. 2004 [cited 2019 March 22];3(1):21-34.
Hoys C. Análisis de metabolitos de Haematococcus pluvialis en cultivo continuo durante la acumulación de astaxantina [Internet]. 2019 [cited 2020 May 7].
Gómez B. Optimización del crecimiento y producción del carotenoide astaxantina por la microalga Haematococcus sp. en diferentes condiciones de cultivo [Internet]. 2018 [cited 2020 May 8].
Meléndez A, Vicario I, Heredia F. Estabilidad de los pigmentos carotenoides en los alimentos [Internet]. 2004 June [cited 2020 May 10]; 54.
Barbosa C. EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Y CONTENIDO DE LÍPIDOS Y CAROTENOIDES TOTALES EN UN EXTRACTO HEXÁNICO DE Haematococcus pluvialis EN DISTINTOS PERIODOS DE ESTRÉS [Internet]. 2019 Dec. [cited 2020 Apr 15].
Pc IN, Biostat T, Pc N, Pc P. BIOSTAT ® Aplus. [cited 2020 Apr 15]; Available from: http://www.sartogosm.ru/pdf/Data_BIOSTATAplus_SBI2014-e.pdf
Pérez R. Eliminación de nutrientes para el tratamiento biológico de agua residual usando un sistema inmovilizado microalga-bacteria, en crecimiento autotrófico, heterotrófico y mixotrófico [Internet]. 2009 April [cited 2020 Apr 15]. Tesis.
Blanco L, Tacon A. LA PRODUCCIÓN DE ALIMENTO VIVO Y SU IMPORTANCIA EN ACUACULTURA [Internet].
Microscopio Epi-Fluorescencia. [Internet]. [cited 2020 May 8].
Gómez L, et al. Producción de Astaxantina y expresión de genes en Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales) bajo condiciones de estrés por deficiencia de nitrógeno y alta irradiancia. MUTIS [Internet]. 2019 October [cited 2020 Sep18]; 9.
Técnicas Cromatográficas [Internet]. 2007 December [cited 2020 May 8].
Trinidad A. MODELOS DE CRECIMIENTO EN BIOLOGÍA, SU SIGNIFICADO BIOLÓGICO Y SELECCIÓN DEL MODELO POR SU AJUSTE [Internet]. 2014 June [cited 2020 Apr 15].Tesis.
Trejos V, Alzate J, Garcia M. Descripción matemática y análisis de estabilidad de procesos fermentativos. DYNA [Internet]. 2009 [cited 2020 Apr 15];76(158):111–21.
Pérez A, Larrosa J, Fernández Escámez P. Modelos matemáticos para la descripción del crecimiento de microorganismos patógenos en alimentos. Anu Jóvenes Investig [Internet]. 2016 July [cited 2020 Apr 15];9(9):160–3.
Sampieri R. Metodologia de la investigacion [Internet]. sexta. 2014 [cited 2020 May 8].
Chiruchi J, Zoboli J, Usher S, Serrentino C. MANUAL DE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS PARA AGUAS Y EFLUENTES [Internet]. 1996. [cited 2020 Sep 18].
Malagón K. Estandarización de un método analítico por cromatografía líquida de alta eficiencia para la cuantificación de astaxantina a partir de la microalga Haematococcus pluvialis. [Internet]. 2019 [cited 2020 Sep 5].
Yuan J, Chen F.Hydrolysis Kinetics of Astaxanthin Esters and Stability of Astaxanthin of Haematococcus pluvialis during Saponification. J. Agric. Food Chem [Internet]. 1998 December [cited 2020 sep 18]; 47, 31-35.
Yuan J, Chen F. .Chromatographic Separation and Purification of trans- Astaxanthin from the Extracts of Haematococcus pluvialis. J. Agric. Food Chem [Internet]. 1998 July [cited 2020 sep 18]; 46, 3371-3375. Available from: https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jf980039b
Yuan J, Chen F. Purication of trans-astaxanthin from a high-yielding astaxanthin ester-producing strain of the microalga Haematococcus pluvialis. Food Chemistry [Internet]. 2000 March [cited 2020 sep 18]; 68., 443 – 448.
Lu M., Zhang Y., Zhao C. Zhou P, Yu L. Analysis and Identification of Astaxanthin and its Carotenoid Precursors from Xanthophyllomyces dendrorhous by High- Performance Liquid Chromatography. Z. Naturforsch [Internet]. 2010 January. [cited 2020 August 20];65 c, 489 – 494.
The International Conference on Harmonisation of Technical requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH). Q2(R1): Validation of Analytical Procedures: Text and methodology [Internet]. 2005 November [cited 2020 September 18].
Tocquin P, Fratamico A, Franck F. Screening for a low-cost Haematococcus pluvialis medium reveals an unexpected impact of a low N/P ratio on vegetative growth. J Appl Phycol [Internet]. 2012 Jun 29 [cited 2020 Nov 23];24(3):365–73.
Imamoglu E. Effect of Different Culture Media and Light Intensities on Growth of Haematococcus pluvialis. Int J Nat Eng Sci [Internet]. 2007 [cited 2020 Nov 24];1(3):5– 9.
Jin E, Lee CG, Polle JEW. Secondary carotenoid accumulation in Haematococcus (chlorophyceae): Biosynthesis, regulation, and biotechnology [Internet]. Vol. 16, Journal of Microbiology and Biotechnology. 2006 [cited 2020 Nov 24]. p. 821–31.
Extracción ultrasónica de astaxantina para mayores rendimientos - Hielscher Ultrasound Technology [Internet]. [cited 2020 Nov 24].
Castillo A, Pereira S, Otero A, Fiol S, Garcia-Jares C, Lores M. Matrix solid-phase dispersion as a greener alternative to obtain bioactive extracts from: Haematococcus pluvialis. Characterization by UHPLC-QToF. RSC Adv [Internet]. 2020 Jul 16 [cited 2020 Nov 24];10(47):27995–8006.
Luisa G, et al. Producción de Astaxantina y expresión de genes en Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales) bajo condiciones de estrés por deficiencia de nitrógeno y alta irradiancia [Internet]. 2021 Feb 13 [cited 2021 Feb 13].
Rodríguez L. PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA EN Haematococcus pluvialis BAJO EFECTO DE FACTORES DE ESTRÉS COMO ACETATO DE SODIO Y CLORURO DE SODIO. [cited 2021 Feb 23].
WAN, Minxi, et al. The effective photoinduction of Haematococcus pluvialis for accumulating astaxanthin with attached cultivation. Bioresource technology, 2014;163: 26-32.
Vidhyavathi, Raman, et al. Regulation of carotenoid biosynthetic genes expression and carotenoid accumulation in the green alga Haematococcus pluvialis under nutrient stress conditions. Journal of Experimental Botany, 2008; 59(6): 1409- 1418.
Pan-utai W, et al. Effect of inducing agents on growth and astaxanthin production in Haematococcus pluvialis: Organic and inorganic. [Internet]. 2017. [cited 2021 Mar 10]
Vacca, V, et al. Uso de la microalga Chlorella sp. viva en suspensión en la decoloración del agua residual de una empresa textil. [Internet]. 2017. [cited 2021 Mar 10]
Vieira, H, et al. Microalgae-mediated bioremediation and valorization of cattle wastewater previously digested in a hybrid anaerobic reactor using a photobioreactor: Comparison between batch and continuous operation. [Internet]. 2018. [cited 2021 Mar 10]
Choi Y, Sang Y, Jong P. 2011. Multistage operation of airlift photobioreactor for increased production of astaxanthin from Haematococcus pluvialis. [Internet]. 2011. [cited 2021 Mar 10]
Gómez L, Menéndez J, Álvarez I, Flores I. Efecto de diferentes protocolos de aplicación de un campo magnético (0.03T) sobre el crecimiento, viabilidad y composición pigmentaria de Haematococcus pluvialis Flotow en suficiencia y ausencia de nitrógeno. [Internet]. 2009. [cited 2021 Mar 10]
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spelling Camacho Kurmen, Judith Elena88ec3d87924bea44fb175e7780652267Torres Cadavid, Lauraa5d09c81d1a22ff1da22b85f13030c5dUbaque Ramírez, Jeimy Lizethdf27111207ce76e8f6b1bfce534c88862021-09-08T20:18:09Z2021-09-08T20:18:09Z2021-05-30https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/2829La astaxantina es un carotenoide al que se le considera útil en diversas industrias, además se le reconoce por su potente capacidad antiinflamatoria, anticancerígena y antioxidante. La microalga Haematococcus pluvialis es considerada como la mejor productora natural de astaxantina. En la actualidad, la mayor cantidad de astaxantina se produce de forma sintética, y se comercializa a costos elevados, por esto se ha incrementado el interés por producir este compuesto de forma natural. En este estudio se propone la determinación de la producción de astaxantina usando la biomasa de H. pluvialis obtenida en el Biorreactor BIOSTAT A PLUS de 5 litros, sometiéndose a los factores de estrés acetato de sodio (0,375 mg/L y 0, 750 mg/L) y una irradiancia de 360 lux con luz blanca, en medios BBM y RM, pH 6,8, temperatura 20°C, agitación diaria, aire filtrado, cajas de cultivo celular. Se determinó el cambio morfológico, la concentración de clorofila y astaxantina. Estableciendo que el tratamiento que uso medio RM con 0.375 mg/L de acetato de sodio produjo 6.088 ug/mL de astaxantina. El Anova (95%) realizado no estableció diferencias significativas entre tratamientos para la producción del carotenoide (P>0,05), pero sí para el crecimiento celular (P<0.05), y según el test Tukey HSD este tratamiento tiene significativamente mayor crecimiento celular (3.01 x 108 cel./mL). Esta investigación permite concluir que el uso de la biomasa obtenida de H. pluvialis en el Biorreactor BIOSTAT A PLUS de 5 litros, para someterla a factores de estrés como el acetato de sodio, combinado con alta irradiancia, permite obtener concentraciones óptimas de astaxantina, aplicables en la producción industrial.Astaxanthin is a carotenoid that is considered useful in various industries, and it is also recognized for its powerful anti-inflammatory, anti-cancer and antioxidant capacity. The microalgae H. pluvialis is considered the best natural producer of astaxanthin. Currently, the largest amount of astaxanthin is produced synthetically, and is marketed at high costs, for this reason the interest in producing this compound naturally has increased. Proposing in this research to determine the production of astaxanthin using the biomass of H. pluvialis obtained in the 5-liter BIOSTAT A PLUS Bioreactor, subjecting it to the stress factors sodium acetate (0.375 mg / L and 0.750 mg / L) and an irradiance of 360 lux with white light, in BBM and RM media, pH 6.8, temperature 20 ° C, daily shaking, filtered air, cell culture boxes. The morphological change, the concentration of chlorophyll and astaxanthin were determined. Establishing that the treatment using RM medium with 0.375 mg / L of sodium acetate produced 6.088 ug / mL of astaxanthin. The Anova (95%) performed did not establish significant differences between treatments for carotenoid production (P> 0.05), but for cell growth (P <0.05), and according to the Tukey HSD test, this treatment has significantly higher growth cells (3.01 x 108 cel./mL). Concluding using the biomass obtained from H. pluvialis in the BIOSTAT A PLUS 5- liter Bioreactor, to subject it to stress factors such as sodium acetate combined with high irradiance and obtain astaxanthin.1. Resumen 10 2. Introducción 12 3. Antecedentes 13 4. Marco Teórico 22 4.1 Astaxantina 23 4.2 Clorofila 25 4.3 Condiciones de cultivo 26 4.4 Medios de cultivo 28 4.5 Nitratos 30 4.6 Fósforo 31 4.7 Luz 31 4.8 Salinidad 31 4.9 Cloruro de sodio 31 4.10 Acetato de sodio 32 4.12 Biorreactor BIOSTAT A PLUS de 5 litros 32 4.13 Métodos de medición de biomasa 34 4.14 Métodos de medición de pigmentos 35 4.15 Modelos de crecimiento 35 5. Diseño metodológico 38 5.1 Hipótesis 38 5.2 Variables dependientes 38 5.3 Variables independientes 38 5.4 Fase 1. Crecimiento de la microalga H. pluvialis 39 5.5 Fase 2. Cambio morfológico 41 5.6 Fase 3. Determinación de clorofila y astaxantina. 41 5.7 Fase 4. Análisis estadístico 44 6. Resultados 45 6.1 Fase 1. Crecimiento de la microalga H.pluvialis 45 6.2 Fase 2. Cambio morfológico 50 6.3 Fase 3. Determinación de clorofila y astaxantina 57 6.3.1 Determinación de astaxantina por HPLC 63 7. Discusión 69 8. Conclusiones 79 9. Recomendaciones 80 10. Presentación en eventos 81 11. Referencias 84 12. Anexos 91PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico95p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.CBacteriología y Laboratorio ClínicoDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2021https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbProducción de Astaxantina usando las condiciones de estrés acetato de sodio y alta intensidad de luz utilizando la biomasa de la microalga Haematococcus Pluvialis obtenida en el biorreactor Biostat a plus de 5 LTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionRamírez Landínez DM. Evaluación del crecimiento y producción de astaxantina por haematococcus pluvialis en un fotobiorreactor tipo airlift. 2013 Jan 1.Sipaúba-Tavares LH, Millan RN, Berchielli-Morais FA. Effects of some parameters in upscale culture of Haematococcus pluvialis Flotow. Brazilian journal of biology 2013 Aug;73(3):585-591.Wang B, Zhang Z, Hu Q, Sommerfeld M, Lu Y, Han D. Cellular Capacities for High- Light Acclimation and Changing Lipid Profiles across Life Cycle Stages of the Green Alga Haematococcus pluvialis. PloS one 2014;9(9):e106679.Tokarz D, Cisek R, El-Ansari O, Espie GS, Fekl U, Barzda V. Organization of astaxanthin within oil bodies of Haematococcus pluvialis studied with polarization- dependent harmonic generation microscopy. PLoS ONE 2014 September;9(9).Chekanov K, Lobakova E, Selyakh I, Semenova L, Sidorov R, Solovchenko A. Accumulation of Astaxanthin by a New Haematococcus pluvialis Strain BM1 from the White Sea Coastal Rocks (Russia). Marine drugs 2014 Aug 15,;12(8):4504-4520.Dong S, Huang Y, Zhang R, Wang S, Liu Y. Four Different Methods Comparison for Extraction of Astaxanthin from Green Alga Haematococcus pluvialis. TheScientificWorld 2014 Jan 19,;2014:694305.Córdoba-Castro, NM., Acero-Reyes, N.L., Duque-Buitrago, L.F., Jiménez-Aguilar, L.J., Serna-Jiménez, J.A. (2015) Obtención y caracterización de astaxantina de la microalga Haematococcus Pluvialis. UGCiencia 21, 73-82.Granda Jara Gabriela Patricia. PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA A PARTIR DE LA MICROALGA HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS; 2015.Granda Jara Gabriela Patricia. PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA A PARTIR DE LA MICROALGA HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS; 2015.Régnier P, Bastias J, Rodriguez-Ruiz V, Caballero-Casero N, Caballo C, Sicilia D, et al. Astaxanthin from Haematococcus pluvialis Prevents Oxidative Stress on Human Endothelial Cells without Toxicity. Marine Drugs 2015 May;13(5):2857-2874Sathasivam R, Radhakrishnan R, Hashem A, Abd Allah EF. Microalgae metabolites: A rich source for food and medicine [Internet]. Vol. 26, Saudi Journal of Biological Sciences. Elsevier B.V.; 2019 [cited 2020 May 5]. p. 709–22.Niño Castillo CM, Rodríguez Rivera FC, Díaz LE, Lancheros Díaz AG. Evaluación de las condiciones de crecimiento celular para la producción de astaxantina a partir de la microalga Haematococcus pluvialis. Nova [Internet]. 2017 [cited 2020 Apr 11];15(28):19.Zhang L, Su F, Zhang C, Gong F, Liu J. Changes of Photosynthetic Behaviors and Photoprotection during Cell Transformation and Astaxanthin Accumulation in Haematococcus pluvialis Grown Outdoors in Tubular Photobioreactors. International journal of molecular sciences 2016 Dec 26,;18(1):33.García Martín Laura. Producción biotecnológica de astaxantina a partir H. pluvialis”. 2018. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. 86pReis DF, Machado Junior, Francisco Roberto da Silva, Ores JDC, Lemes AC, Burkert CAV, Burkert, Janaina Fernandes de Medeiros. Influência do CO2 no Crescimento de Haematococcus Pluvialis e na Produção de Carotenoides. Uniciências 2019 Jan 24,;22(3Esp):25.Zhang C, Zhang L, Liu J. Exogenous sodium acetate enhances astaxanthin accumulation and photoprotection in Haematococcus pluvialis at the non-motile stage. J Appl Phycol [Internet]. 2019 Apr 15 [cited 2020 May 5];31(2):1001–8.Doria, E. Inuence of Light Stress on the Accumulation of Xantho-phylls and Lipids in Haematococcus Plu-vialis CCALA 1081 Grown under Auto-trophic or Mixotrophic Conditions. (2018) J Marine Biol Aquacult 4(1): 30- 35.He B, Hou L, Dong M, Shi J, Huang X, Ding Y, et al. Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis: Astaxanthin Induction by High Light with Acetate and Fe 2. International journal of molecular sciences 2018 Jan 7,;19(1):175.Luo Q, Bian C, Tao M, Huang Y, Zheng Y, Lv Y, et al. Genome and Transcriptome Sequencing of the Astaxanthin-Producing Green Microalga, Haematococcus pluvialis. Genome biology and evolution 2019;11(1):166-173.Huang L, Gao B, Wu M, Wang F, Zhang C. Comparative transcriptome analysis of a long-time span two-step culture process reveals a potential mechanism for astaxanthin and biomass hyper-accumulation in Haematococcus pluvialis JNU35. Biotechnology for biofuels 2019;12(1):18.Li F, Cai M, Lin M, Huang X, Wang J, Ke H, et al. Differences between Motile and Nonmotile Cells of Haematococcus pluvialis in the Production of Astaxanthin at Different Light Intensities. Marine Drugs 2019 January;17(1):39.Miranda AM, Ossa EA, Vargas GJ, Sáez AA. Efecto de las Bajas Concentraciones de Nitratos y Fosfatos sobre la Acumulación de Astaxantina en Haematococcus pluvialis UTEX 2505. Información tecnológica 2019 Feb;30(1):23-32.Galarza JI, Arredondo Vega BO, Villón J, Henríquez V. Deesterification of astaxanthin and intermediate esters from Haematococcus pluvialis subjected to stress. Biotechnol Reports [Internet]. 2019 Sep;23.RODRIGUEZ ROMERO LAURA JOHANNA. PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA EN Haematococcus pluvialis BAJO EFECTO DE FACTORES DE ESTRÉS COMO ACETATO DE SODIO Y CLORURO DE SODIO. 2019. Trabajo de grado. Unicolmayor. 103 p.MANRIQUE PINZÓN Mónica Alejandra y MARÍN CORREDOR DAVID LEONARDO . PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA EN Haematococcus pluvialis BAJO EL EFECTO DE LA DEFICIENCIA DE NITRÓGENO Y ALTA IRRADIANCIA EN EL BIORREACTOR BIOSTAT ® A PLUS. 2019. Trabajo de grado. Unicolmayor 89 p.Li F, Cai M, Lin M, Huang X, Wang J, Zheng X, et al. Accumulation of Astaxanthin Was Improved by the Nonmotile Cells of Haematococcus pluvialis. BioMed research international 2019;2019:1-7Ding W, Cui J, Zhao Y, Han B, Li T, Zhao P, et al. Enhancing Haematococcus pluvialis biomass and γ-aminobutyric acid accumulation by two-step cultivation and salt supplementation. Bioresource technology [Internet]. 2019 August [cited 2020 Apr 11]];285.Liu Yu, Yildiz I. Biorremediación de aguas residuales de minería y producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis. International Journal of Global Warming [Internet]. 2019 August [cited 2020 Apr 15]; 19.Camacho J, González G, Klotz B. Producción de Astaxantina en Haematococcus pluvialis bajo diferentes condiciones de estrés. Nova [Internet]. 2013 Jun [cited 2020 Apr 11]15;11(19):93.Abalde J, Orosa M, Torres E, Cid A. LA MICROALGA Haematococcus COMO FUENTE DE ASTAXANTINA [Internet]. 1999 [cited 2020 Apr 14].Shah M, Liang Y, Cheng J, Daroch M. Astaxanthin-producing green microalga Haematococcus pluvialis: From single cell to high value commercial products. Frontiers [Internet]. 2016 Apr [cited 2020 Apr 14].Solari S, Vílchez J, Vivar J, Hermosilla N. Astaxantina : antioxidante de origen natural con variadas aplicaciones en cosmética Astaxanthin : natural antioxidants with various applications in cosmetics. Biofarbo [Internet]. 2011 [cited 2020 Apr 14];19(2):6–12.Roldán P, Mach N. Effect of consumption of astaxanthin in health. Rev Esp Nutr Comunitaria [Internet]. 2012 [cited 2020 Apr 15];18(3):164–77.Reinoso H, Tordable M, Grosso M. DESDE LA CÉLULA A LA FOTOSÍNTESIS EN PLANTAS SUPERIORES [Internet]. [cited 2020 Apr 15].Rojas Loria Cesar. Microbiologia General [Internet]. [cited 2021 Feb 13].Chojnacka K, Marquez F. Kinetic and Stoichiometric Relationships of the Energy and Carbon Metabolism in the Culture of Microalgae. Biotechnol [Internet]. 2004 [cited 2019 March 22];3(1):21-34.Hoys C. Análisis de metabolitos de Haematococcus pluvialis en cultivo continuo durante la acumulación de astaxantina [Internet]. 2019 [cited 2020 May 7].Gómez B. Optimización del crecimiento y producción del carotenoide astaxantina por la microalga Haematococcus sp. en diferentes condiciones de cultivo [Internet]. 2018 [cited 2020 May 8].Meléndez A, Vicario I, Heredia F. Estabilidad de los pigmentos carotenoides en los alimentos [Internet]. 2004 June [cited 2020 May 10]; 54.Barbosa C. EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Y CONTENIDO DE LÍPIDOS Y CAROTENOIDES TOTALES EN UN EXTRACTO HEXÁNICO DE Haematococcus pluvialis EN DISTINTOS PERIODOS DE ESTRÉS [Internet]. 2019 Dec. [cited 2020 Apr 15].Pc IN, Biostat T, Pc N, Pc P. BIOSTAT ® Aplus. [cited 2020 Apr 15]; Available from: http://www.sartogosm.ru/pdf/Data_BIOSTATAplus_SBI2014-e.pdfPérez R. Eliminación de nutrientes para el tratamiento biológico de agua residual usando un sistema inmovilizado microalga-bacteria, en crecimiento autotrófico, heterotrófico y mixotrófico [Internet]. 2009 April [cited 2020 Apr 15]. Tesis.Blanco L, Tacon A. LA PRODUCCIÓN DE ALIMENTO VIVO Y SU IMPORTANCIA EN ACUACULTURA [Internet].Microscopio Epi-Fluorescencia. [Internet]. [cited 2020 May 8].Gómez L, et al. Producción de Astaxantina y expresión de genes en Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales) bajo condiciones de estrés por deficiencia de nitrógeno y alta irradiancia. MUTIS [Internet]. 2019 October [cited 2020 Sep18]; 9.Técnicas Cromatográficas [Internet]. 2007 December [cited 2020 May 8].Trinidad A. MODELOS DE CRECIMIENTO EN BIOLOGÍA, SU SIGNIFICADO BIOLÓGICO Y SELECCIÓN DEL MODELO POR SU AJUSTE [Internet]. 2014 June [cited 2020 Apr 15].Tesis.Trejos V, Alzate J, Garcia M. Descripción matemática y análisis de estabilidad de procesos fermentativos. DYNA [Internet]. 2009 [cited 2020 Apr 15];76(158):111–21.Pérez A, Larrosa J, Fernández Escámez P. Modelos matemáticos para la descripción del crecimiento de microorganismos patógenos en alimentos. Anu Jóvenes Investig [Internet]. 2016 July [cited 2020 Apr 15];9(9):160–3.Sampieri R. Metodologia de la investigacion [Internet]. sexta. 2014 [cited 2020 May 8].Chiruchi J, Zoboli J, Usher S, Serrentino C. MANUAL DE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS PARA AGUAS Y EFLUENTES [Internet]. 1996. [cited 2020 Sep 18].Malagón K. Estandarización de un método analítico por cromatografía líquida de alta eficiencia para la cuantificación de astaxantina a partir de la microalga Haematococcus pluvialis. [Internet]. 2019 [cited 2020 Sep 5].Yuan J, Chen F.Hydrolysis Kinetics of Astaxanthin Esters and Stability of Astaxanthin of Haematococcus pluvialis during Saponification. J. Agric. Food Chem [Internet]. 1998 December [cited 2020 sep 18]; 47, 31-35.Yuan J, Chen F. .Chromatographic Separation and Purification of trans- Astaxanthin from the Extracts of Haematococcus pluvialis. J. Agric. Food Chem [Internet]. 1998 July [cited 2020 sep 18]; 46, 3371-3375. Available from: https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jf980039bYuan J, Chen F. Purication of trans-astaxanthin from a high-yielding astaxanthin ester-producing strain of the microalga Haematococcus pluvialis. Food Chemistry [Internet]. 2000 March [cited 2020 sep 18]; 68., 443 – 448.Lu M., Zhang Y., Zhao C. Zhou P, Yu L. Analysis and Identification of Astaxanthin and its Carotenoid Precursors from Xanthophyllomyces dendrorhous by High- Performance Liquid Chromatography. Z. Naturforsch [Internet]. 2010 January. [cited 2020 August 20];65 c, 489 – 494.The International Conference on Harmonisation of Technical requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH). Q2(R1): Validation of Analytical Procedures: Text and methodology [Internet]. 2005 November [cited 2020 September 18].Tocquin P, Fratamico A, Franck F. Screening for a low-cost Haematococcus pluvialis medium reveals an unexpected impact of a low N/P ratio on vegetative growth. J Appl Phycol [Internet]. 2012 Jun 29 [cited 2020 Nov 23];24(3):365–73.Imamoglu E. Effect of Different Culture Media and Light Intensities on Growth of Haematococcus pluvialis. Int J Nat Eng Sci [Internet]. 2007 [cited 2020 Nov 24];1(3):5– 9.Jin E, Lee CG, Polle JEW. Secondary carotenoid accumulation in Haematococcus (chlorophyceae): Biosynthesis, regulation, and biotechnology [Internet]. Vol. 16, Journal of Microbiology and Biotechnology. 2006 [cited 2020 Nov 24]. p. 821–31.Extracción ultrasónica de astaxantina para mayores rendimientos - Hielscher Ultrasound Technology [Internet]. [cited 2020 Nov 24].Castillo A, Pereira S, Otero A, Fiol S, Garcia-Jares C, Lores M. Matrix solid-phase dispersion as a greener alternative to obtain bioactive extracts from: Haematococcus pluvialis. Characterization by UHPLC-QToF. RSC Adv [Internet]. 2020 Jul 16 [cited 2020 Nov 24];10(47):27995–8006.Luisa G, et al. Producción de Astaxantina y expresión de genes en Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales) bajo condiciones de estrés por deficiencia de nitrógeno y alta irradiancia [Internet]. 2021 Feb 13 [cited 2021 Feb 13].Rodríguez L. PRODUCCIÓN DE ASTAXANTINA EN Haematococcus pluvialis BAJO EFECTO DE FACTORES DE ESTRÉS COMO ACETATO DE SODIO Y CLORURO DE SODIO. [cited 2021 Feb 23].WAN, Minxi, et al. The effective photoinduction of Haematococcus pluvialis for accumulating astaxanthin with attached cultivation. Bioresource technology, 2014;163: 26-32.Vidhyavathi, Raman, et al. Regulation of carotenoid biosynthetic genes expression and carotenoid accumulation in the green alga Haematococcus pluvialis under nutrient stress conditions. Journal of Experimental Botany, 2008; 59(6): 1409- 1418.Pan-utai W, et al. Effect of inducing agents on growth and astaxanthin production in Haematococcus pluvialis: Organic and inorganic. [Internet]. 2017. [cited 2021 Mar 10]Vacca, V, et al. Uso de la microalga Chlorella sp. viva en suspensión en la decoloración del agua residual de una empresa textil. [Internet]. 2017. [cited 2021 Mar 10]Vieira, H, et al. Microalgae-mediated bioremediation and valorization of cattle wastewater previously digested in a hybrid anaerobic reactor using a photobioreactor: Comparison between batch and continuous operation. [Internet]. 2018. [cited 2021 Mar 10]Choi Y, Sang Y, Jong P. 2011. Multistage operation of airlift photobioreactor for increased production of astaxanthin from Haematococcus pluvialis. [Internet]. 2011. [cited 2021 Mar 10]Gómez L, Menéndez J, Álvarez I, Flores I. Efecto de diferentes protocolos de aplicación de un campo magnético (0.03T) sobre el crecimiento, viabilidad y composición pigmentaria de Haematococcus pluvialis Flotow en suficiencia y ausencia de nitrógeno. [Internet]. 2009. [cited 2021 Mar 10]AstaxantinaHaematococcus pluvialisBiostatMicroalgaBiomasaBiorreactorCarotenoideEstrés salinoAlta irradianciaLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814828https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/2829/5/license.txt2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7aMD55open accessTEXTLaura Torres y Jeimy Lizeth Ubaque Ramirez.pdf.txtLaura Torres y Jeimy Lizeth Ubaque Ramirez.pdf.txtExtracted texttext/plain27126https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/2829/8/Laura%20Torres%20y%20Jeimy%20Lizeth%20Ubaque%20Ramirez.pdf.txt32da229b1fd96aea1bddcaaede5d426fMD58open accessFormato decanatura1...pdf.txtFormato decanatura1...pdf.txtExtracted texttext/plain1https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/2829/10/Formato%20decanatura1...pdf.txt68b329da9893e34099c7d8ad5cb9c940MD510metadata only accessFORMATO DERECHOS DE AUTOR TG 2021...pdf.txtFORMATO DERECHOS DE AUTOR TG 2021...pdf.txtExtracted 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