Caracterización de Cutibacterium (Propionibacterium) Acnes aislado a partir de acné Vulgaris.

El acné es una enfermedad inflamatoria crónica de los folículos pilo sebáceos que afecta principalmente, adolescentes y adultos jóvenes. Su etiología es multifactorial, incluyendo componentes, como la función hormonal alterada, aumento en la producción de sebo, la hiperqueratinización folicular, la...

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Autores:
Ibañez Galvis, Catalina
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2018
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3772
Palabra clave:
Enfermedad
Función hormonal
Características bioquímicas
Touchdown
Acné
Acnes
Filotipo
Biotipo
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Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018
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description El acné es una enfermedad inflamatoria crónica de los folículos pilo sebáceos que afecta principalmente, adolescentes y adultos jóvenes. Su etiología es multifactorial, incluyendo componentes, como la función hormonal alterada, aumento en la producción de sebo, la hiperqueratinización folicular, la proliferación de Cutibacterium acnes (C. acnes), antes denominado Propionibacterium acnes y la activación de diversas cascadas inflamatorias (1,2). Existen diferentes metodologías para clasificar a C. acnes, las basadas en el genoma, en el proteóma y en sus características bioquímicas (3–7). Desafortunadamente, las que se basan en las características bioquímicas han generado muchas discrepancias, pero son utilizadas debido a sus bajos costos, las pruebas basadas en el análisis proteómico constituyen una herramienta útil en la tipificación y clasificación de las especies; sin embargo, estas no son del todo confiables; y por último las pruebas genómicas existentes comprometen altos costos, maquinaria y personal especializado. En este trabajo se estandarizó la prueba de reacción en cadena de la polimerasa tipo “Touchdown” múltiple (PCRTD múltiple) para determinar los filotipos de C. acnes circulantes en una población de Bogotá. Se evidencio una mayor prevalencia del filotipo IA2 (96%), seguido de los filotipo IB (4%), siendo IA1 asociado con formas de acné inflamatorio frecuentemente aislado en otros estudios (8)
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dc.relation.references.spa.fl_str_mv Quintero Y, Asuaje L, Franco F, Roye R. Propionibacterium acnes: pasado, presente y futuro. Dermatología Venezolana. 2015; 53(2).
Cardona-Arias JA, Álvarez-Medina MC, Martínez-Valencia DM, Cruz-Tobón AM, Vallejo-Patiño MM. Prevalencia de acné en estudiantes de octavo a undécimo grado de El Retiro-Antioquia y percepciones asociadas. Archivos de medicina [Internet]. 2014;10(1). Available from: http://www.archivosdemedicina.com/medicina-de-familia/prevalencia-de-acnen-adolescentes-de-un-municipio-colombiano-y-percepciones-asociadas.pdf
Cebrián R, Arévalo S, Arias-Santiago S, Riazzo C, Rojo MD, Bermúdez P, et. al Optimization of genotypic and biochemical methods to profile P. acnes isolates from a patient population. J Microbiol Methods. 2017; 141:17–24.
Barnard E, Nagy I, Hunyadkurti J, Patrick S, McDowell A. Multiplex touchdown PCR for rapid typing of the opportunistic pathogen Propionibacterium acnes. J Clin Microbiol. 2015; 53(4):1149–55.
McDowell A, Barnard E, Nagy I, Gao A, Tomida S, Li H, et. al An expanded multilocus sequence typing scheme for propionibacterium acnes: investigation of “pathogenic”, “commensal” and antibiotic resistant strains. PLoS One. 2012; 7(7):e41480.
McDowell A, Valanne S, Ramage G, Tunney MM, Glenn JV, McLorinan GC, et al. Propionibacterium acnes types I and II represent phylogenetically distinct groups. J Clin Microbiol. 2005; 43(1):326–34.
Valanne S, McDowell A, Ramage G, Tunney MM, Einarsson GG, O’Hagan S, et al. CAMP factor homologues in Propionibacterium acnes: a new protein family differentially expressed by types I and II. Microbiology. 2005; 151(Pt 5):1369–79.
Paugam C, Corvec S, Saint-Jean M, Le Moigne M, Khammari A, Boisrobert A, et al. Propionibacterium acnes phylotypes and acne severity: an observational prospective study. J Eur Acad Dermatol Venereol [Internet]. 2017; Available from: http://dx.doi.org/10.1111/jdv.14206
Handa S. Propionibacterium Infecti [Internet]. Francisco Talavera; 2015. Available from: http://emedicine.medscape.com/article/226337- overview#showall
Orozco B, Concha C, Cárdenas LF, Becerra MM, Barona MI, Balcázar LF, et al. Guías colombianas para el manejo del acné: una revisión basada en la evidencia por el Grupo Colombiano de Estudio en Acné. Rev Asoc Colomb Dermatol Cir Dermatol. 2011; 19(2).
Grant RNR. The History of Acne. Proc R Soc Med. 1951; 44(8):647–52.
Kaminsky A. Acné. Un enfoque global. 1st ed. Buenos aires; 2017. 256 p. (Dermatología CI-L de, editor. Definición, historia, epidemiología, genética).
Plewig G, Kligman A. ACNE and ROSACEA. 3rd ed. 2017. 744 p. (Heidelberg S-VB, editor. History of Acne and Rosacea).
Díaz RMD. HISTORIA DE LA DERMATOLOGÍA [Internet]. Vol. 93, Los tres grandes. Primera parte: Robert Willan (1757-1812). Madrid; 2002. p. 344. Available from: http://www.revespcardiol.org
Wilson E. On diseases of the Skin. philadelphia; 1857. 705 p.
Fleming A. ON THE ETIOLOGY OF ACNE VULGARIS AND ITS TREATMENT BY VACCINES. Lancet. 1909 Apr 10;173(4467):1035–8.
Rosenberg EW. Bacteriology of acne. Annu Rev Med. 1969;20:201–6.
Molesworth EH. THE CULTURAL CHARACTERISTICS OF THE MICROBACILLUS OF ACNE. Br Med J. 1910; 1(2577):1227–9
Douglas HC, Gunter SE. The Taxonomic Position of Corynebacterium acnes. J Bacteriol. 1946; 52(1):15–23.
Kishishita M, Ushijima T, Ozaki Y, Ito Y. Biotyping of Propionibacterium acnes isolated from normal human facial skin. Appl Environ Microbiol. 1979; 38(4):585–9
Fitz-Gibbon S, Tomida S, Chiu BH, Nguyen L, Du C, Liu M, et al. Propionibacterium acnes strain populations in the human skin microbiome associated with acne. J Invest Dermatol. 2013; 133(9):2152–60.
Piper KE, Jacobson MJ, Cofield RH, Sperling JW, Sanchez-Sotelo J, Osmon DR, et al. Microbiologic diagnosis of prosthetic shoulder infection by use of implant sonication. J Clin Microbiol. 2009 Jun; 47(6):1878–84.
Kasimatis G, Fitz-Gibbon S, Tomida S, Wong M, Li H. Analysis of Complete Genomes of Propionibacterium acnes Reveals a Novel Plasmid and Increased Pseudogenes in an Acne Associated Strain. Biomed Res Int. 2013; 2013:11.
. Lomholt HB, Kilian M. Clonality and anatomic distribution on the skin of antibiotic resistant and sensitive Propionibacterium acnes. Acta Derm Venereol. 2014; 94(5):534–8
. Sampedro MF, Piper KE, McDowell A, Patrick S, Mandrekar JN, Rouse MS, et al. Species of Propionibacterium and Propionibacterium acnes phylotypes associated with orthopedic implants. Diagn Microbiol Infect Dis. 2009; 64(2):138–45.
. Shannon BA, Cohen RJ, Garrett KL. Polymerase chain reaction-based identification of Propionibacterium acnes types isolated from the male urinary tract: evaluation of adolescents, normal adults and men with prostatic pathology. BJU Int. 2006; 98(2):388–92.
Scholz CF, Jensen A, Lomholt HB, Bruggemann H, Kilian M. A novel highresolution single locus sequence typing scheme for mixed populations of Propionibacterium acnes in vivo. PLoS One. 2014; 9(8):e104199.
Rollason J, McDowell A, Albert HB, Barnard E, Worthington T, Hilton AC, et al. Genotypic and antimicrobial characterisation of Propionibacterium acnes isolates from surgically excised lumbar disc herniations. Biomed Res Int. 2013; 2013:530382.
Nagy E, Urbán E, Becker S, Kostrzewa M, Vörös A, Hunyadkürti J, et al. MALDI-TOF MS fingerprinting facilitates rapid discrimination of phylotypes I, II and III of Propionibacterium acnes. Anaerobe. 2013; 20:20–6.
Lomholt HB, Kilian M. Population Genetic Analysis of Propionibacterium acnes Identifies a Subpopulation and Epidemic Clones Associated with Acne. PLoS One. 2010; 5(8):e12277.
McDowell A, Nagy I, Magyari M, Barnard E, Patrick S. The Opportunistic Pathogen Propionibacterium acnes: Insights into Typing, Human Disease, Clonal Diversification and CAMP Factor Evolution. PLoS One. 2013; 8(9):e70897.
Perry AL, Worthington T, Hilton AC, Lambert PA, Stirling AJ, Elliott TS. Analysis of clinical isolates of Propionibacterium acnes by optimised RAPD. FEMS Microbiol Lett. 2003; 228(1):51–5.
Dekio I, Culak R, Misra R, Gaulton T, Fang M, Sakamoto M, et al. Dissecting the taxonomic heterogeneity within Propionibacterium acnes: proposal for Propionibacterium acnes subsp. Acnes subsp. nov. and Propionibacterium acnes subsp. elongatum subsp. nov. Int J Syst Evol Microbiol. 2015; 65(12):4776–87.
Scholz CFP. The natural history of cutaneous propionibacteria, and reclassification of selected species within the genus Propionibacterium to the proposed novel genera Acidipropionibacterium gen. nov., Cutibacterium gen. nov. and Pseudopropionibacterium gen. nov. Int J Syst Evol Microbiol. 2016; 66(11):4422–32.
Rojas W, Anaya JM, Gomez LM, Aristizabal B, Cano LE, Lopera D. Inmunología de Rojas. 18th ed. Medellín, Colombia.; 2017. 622 p.
Patiño LA, Morales CA. Microbiota de la piel: el ecosistema cutáneo. Rev Asoc Colomb Dermatol. 2013; 21(2):147–58.
Brzuszkiewicz E, Weiner J, Wollherr A, Thurmer A, Hupeden J, Lomholt HB, et al. Comparative genomics and transcriptomics of Propionibacterium acnes. PLoS One. 2011; 6(6):e21581.
Fischer N, Mak TN, Shinohara DB, Sfanos KS, Meyer TF, Brüggemann H. Deciphering the Intracellular Fate of Propionibacterium acnes in Macrophages. Biomed Res Int. 2013; 2013.
Eishi Y. Etiologic link between sarcoidosis and Propionibacterium acnes. Respir Investig. 2013; 51(2):56–68.
de Brouwer B, Veltkamp M, Wauters CA, Grutters JC, Janssen R. Propionibacterium acnes isolated from lymph nodes of patients with sarcoidosis. Sarcoidosis Vasc Diffuse Lung Dis. 2015; 32(3):271–4
Brüggemann H, Henne A, Hoster F, Liesegang H, Wiezer A, Strittmatter A, et al. The Complete Genome Sequence of Propionibacterium Acnes, a Commensal of Human Skin. Science. 2004; 305(5684):671–3.
McDowell A, Perry AL, Lambert PA, Patrick S. A new phylogenetic group of Propionibacterium acnes. J Med Microbiol. 2008; 57(Pt 2):218–24.
. Hauck Y, Soler C, Gerome P, Vong R, Macnab C, Appere G, et al. A novel multiple locus variable number of tandem repeat (VNTR) analysis (MLVA) method for Propionibacterium acnes. Infect Genet Evol. 2015; 33:233–41.
Kilian M, Scholz CF, Lomholt HB. Multilocus sequence typing and phylogenetic analysis of Propionibacterium acnes. J Clin Microbiol. 2012; 50(4):1158–65.
Zárate MS, Romano V, Nievas J, Smayevsky J. Utilidad de la espectrometría de masas MALDI-TOF en la identificación de bacterias anaerobias. Rev Argent Microbiol. 2014; 46(98):102
Kaminsky A, Florez-White M, Arias MI, Bagatin E. Clasificación del acné: Consenso Ibero-Latinoamericano, 2014. Med Cutan Ibero Lat Am. 2015; 43(1):18–23.
. Grice EA, Kong HH, Conlan S, Deming CB, Davis J, Young AC, et al. Topographical and temporal diversity of the human skin microbiome. Science. 2009; 324(5931):1190–2.
Kistowska M, Meier B, Proust T, Feldmeyer L, Cozzio A, Kuendig T, et al. Propionibacterium acnes promotes Th17 and Th17/Th1 responses in acne patients. J Invest Dermatol. 2015; 135(1):110–8.
50. Montenegro Benavides Paola Andrea Pardo Rodríguez Mayda Gisel. Determinación de filotipos de propionibacterium acnes por MALDI-TOF [Internet]. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca; 2017 [cited 2018 Mar 25]. Available from: http://190.60.201.179:28080/janiumbin/detalle.pl?Id=20180325235208
Leal LCS, Ramírez LCC. Evaluación de la congelación para conservación de especies autóctonas bacterianas. NOVA. 2005; 3(4):21–9.
Higaki S, Nakamura M, Morohashi M. Propionibacterium acnes biotypes and susceptibility to minocycline and Keigai‐ rengyo‐ to. Aquat Microb Ecol [Internet]. 2004; Available from: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1365-4632.2004.01887.x/full
OMS | Organización Mundial de la Salud. 2018 Mar 14 [cited 2018 Mar 14]; Available from: http://www.who.int/es
Collier CN, Harper JC, Cafardi JA, Cantrell WC, Wang W, Foster KW, et al. The prevalence of acne in adults 20 years and older. J Am Acad Dermatol. 2008 Jan; 58(1):56–9.
Yentzer BA, Hick J, Reese EL, Uhas A, Feldman SR, Balkrishnan R. Acne vulgaris in the United States: a descriptive epidemiology. Cutis. 2010 Aug; 86(2):94–9.
Pereira Duquia R, da Silva Dos Santos I, de Almeida H Jr, Martins Souza PR, de Avelar Breunig J, Zouboulis CC. Epidemiology of Acne Vulgaris in 18-YearOld Male Army Conscripts in a South Brazilian City. Dermatology. 2017 Jun 14; 233(2-3):145–54.
Lello J, Pearl A, Arroll B, Yallop J, Birchall NM. Prevalence of acne vulgaris in Auckland senior high school students. N Z Med J. 1995 Jul 28; 108(1004):287–9.
Higaki S, Kitagawa T, Kagoura M, Morohashi M, Yamagishi T. Correlation between Propionibacterium acnes biotypes, lipase activity and rash degree in acne patients. J Dermatol. 2000 Aug; 27(8):519–22.
Perkins AC, Cheng CE, Hillebrand GG, Miyamoto K, Kimball AB. Comparison of the epidemiology of acne vulgaris among Caucasian, Asian, Continental Indian and African American women. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2011 Sep; 25(9):1054–60.
Yang X-Y, Wu W-J, Yang C, Yang T, He J-D, Yang Z, et al. Association of HSD17B3 and HSD3B1 polymorphisms with acne vulgaris in Southwestern Han Chinese. Dermatology. 2013 Oct 19; 227(3):202–8.
Atkinson FS, Foster-Powell K, Brand-Miller JC. International tables of glycemic index and glycemic load values: 2008. Diabetes Care. 2008 Dec; 31(12):2281–3
Legarraga P, Moraga M, Lam M, Geoffroy E, Zumarán C, García P. Impacto de la espectrometría de masas por MALDI-TOF MS en la identificación rápida de bacterias aeróbicas y anaeróbicas de importancia clínica. Rev Chilena Infectol. 2013; 30(2):140–6.
Dekio I, Culak R, Fang M, Ball G, Gharbia S, Shah HN. Correlation between phylogroups and intracellular proteomes of Propionibacterium acnes and differences in the protein expression profiles between anaerobically and aerobically grown cells. Biomed Res Int. 2013 Jun 26; 2013:151797.
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spelling Gómez Garzón, Marcelad7301d7cefc1f029227a4dea7bdf6b5eTorres, Lilian Andreaca31d3055adfcfff99d5cd747e04faa1Ibañez Galvis, Catalina06c0fb47e7bb08244e5d56e1d67ab4c12021-12-06T20:36:16Z2021-12-06T20:36:16Z2018-05https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/377258440El acné es una enfermedad inflamatoria crónica de los folículos pilo sebáceos que afecta principalmente, adolescentes y adultos jóvenes. Su etiología es multifactorial, incluyendo componentes, como la función hormonal alterada, aumento en la producción de sebo, la hiperqueratinización folicular, la proliferación de Cutibacterium acnes (C. acnes), antes denominado Propionibacterium acnes y la activación de diversas cascadas inflamatorias (1,2). Existen diferentes metodologías para clasificar a C. acnes, las basadas en el genoma, en el proteóma y en sus características bioquímicas (3–7). Desafortunadamente, las que se basan en las características bioquímicas han generado muchas discrepancias, pero son utilizadas debido a sus bajos costos, las pruebas basadas en el análisis proteómico constituyen una herramienta útil en la tipificación y clasificación de las especies; sin embargo, estas no son del todo confiables; y por último las pruebas genómicas existentes comprometen altos costos, maquinaria y personal especializado. En este trabajo se estandarizó la prueba de reacción en cadena de la polimerasa tipo “Touchdown” múltiple (PCRTD múltiple) para determinar los filotipos de C. acnes circulantes en una población de Bogotá. Se evidencio una mayor prevalencia del filotipo IA2 (96%), seguido de los filotipo IB (4%), siendo IA1 asociado con formas de acné inflamatorio frecuentemente aislado en otros estudios (8)1. INTRODUCCIÓN 15 2. OBJETIVOS 17 2.1 Objetivo general 17 2.2 Objetivos específicos 17 3. ANTECEDENTES 18 4. MARCO REFERENCIAL 25 4.1 La piel 25 4.2 Cutibacterium acnes. 28 4.2.1 Generalidades 28 4.2.2 Clasificación 30 4.2.3 Diagnóstico 35 4.3 Acné vulgar 39 5. METODOLOGÍA. 44 5.1 Obtención de cepas 44 5.2 Biotipificación 45 5.3 Filotipificación 46 5.3.1 Extracción de ADN 46 5.3.2 Cuantificación de ADN 46 5.3.3 Selección de Primer’s 47 5.3.4 Estandarización de la PCR. 49 5.3.5 Electroforesis 50 5.3.6 Interpretación de Corridos Electroforéticos. 51 6. RESULTADOS 52 6.1 Descripción de la población. 52 6.2 Biotipificación 54 6.3 Descripción de biotipos y tipos de acné. 56 6.4 Condiciones finales de la PCR TD múltiple. 57 6.5 Filotipificación 62 6.6 Descripción del filotipo y tipo de acné. 64 6.7 Comparación de biotipificación, filotipificación por PCR TD múltiple y MALDITOF 64 7. DISCUSIÓN 66 8. CONCLUSIONES 71 9. BIBLIOGRAFÍA 73 10. ANEXOS 79PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico93p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.CBacteriología y Laboratorio ClínicoUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbCaracterización de Cutibacterium (Propionibacterium) Acnes aislado a partir de acné Vulgaris.Trabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionQuintero Y, Asuaje L, Franco F, Roye R. Propionibacterium acnes: pasado, presente y futuro. Dermatología Venezolana. 2015; 53(2).Cardona-Arias JA, Álvarez-Medina MC, Martínez-Valencia DM, Cruz-Tobón AM, Vallejo-Patiño MM. Prevalencia de acné en estudiantes de octavo a undécimo grado de El Retiro-Antioquia y percepciones asociadas. Archivos de medicina [Internet]. 2014;10(1). Available from: http://www.archivosdemedicina.com/medicina-de-familia/prevalencia-de-acnen-adolescentes-de-un-municipio-colombiano-y-percepciones-asociadas.pdfCebrián R, Arévalo S, Arias-Santiago S, Riazzo C, Rojo MD, Bermúdez P, et. al Optimization of genotypic and biochemical methods to profile P. acnes isolates from a patient population. J Microbiol Methods. 2017; 141:17–24.Barnard E, Nagy I, Hunyadkurti J, Patrick S, McDowell A. Multiplex touchdown PCR for rapid typing of the opportunistic pathogen Propionibacterium acnes. J Clin Microbiol. 2015; 53(4):1149–55.McDowell A, Barnard E, Nagy I, Gao A, Tomida S, Li H, et. al An expanded multilocus sequence typing scheme for propionibacterium acnes: investigation of “pathogenic”, “commensal” and antibiotic resistant strains. PLoS One. 2012; 7(7):e41480.McDowell A, Valanne S, Ramage G, Tunney MM, Glenn JV, McLorinan GC, et al. Propionibacterium acnes types I and II represent phylogenetically distinct groups. J Clin Microbiol. 2005; 43(1):326–34.Valanne S, McDowell A, Ramage G, Tunney MM, Einarsson GG, O’Hagan S, et al. CAMP factor homologues in Propionibacterium acnes: a new protein family differentially expressed by types I and II. Microbiology. 2005; 151(Pt 5):1369–79.Paugam C, Corvec S, Saint-Jean M, Le Moigne M, Khammari A, Boisrobert A, et al. Propionibacterium acnes phylotypes and acne severity: an observational prospective study. J Eur Acad Dermatol Venereol [Internet]. 2017; Available from: http://dx.doi.org/10.1111/jdv.14206Handa S. Propionibacterium Infecti [Internet]. Francisco Talavera; 2015. Available from: http://emedicine.medscape.com/article/226337- overview#showallOrozco B, Concha C, Cárdenas LF, Becerra MM, Barona MI, Balcázar LF, et al. Guías colombianas para el manejo del acné: una revisión basada en la evidencia por el Grupo Colombiano de Estudio en Acné. Rev Asoc Colomb Dermatol Cir Dermatol. 2011; 19(2).Grant RNR. The History of Acne. Proc R Soc Med. 1951; 44(8):647–52.Kaminsky A. Acné. Un enfoque global. 1st ed. Buenos aires; 2017. 256 p. (Dermatología CI-L de, editor. Definición, historia, epidemiología, genética).Plewig G, Kligman A. ACNE and ROSACEA. 3rd ed. 2017. 744 p. (Heidelberg S-VB, editor. History of Acne and Rosacea).Díaz RMD. HISTORIA DE LA DERMATOLOGÍA [Internet]. Vol. 93, Los tres grandes. Primera parte: Robert Willan (1757-1812). Madrid; 2002. p. 344. Available from: http://www.revespcardiol.orgWilson E. On diseases of the Skin. philadelphia; 1857. 705 p.Fleming A. ON THE ETIOLOGY OF ACNE VULGARIS AND ITS TREATMENT BY VACCINES. Lancet. 1909 Apr 10;173(4467):1035–8.Rosenberg EW. Bacteriology of acne. Annu Rev Med. 1969;20:201–6.Molesworth EH. THE CULTURAL CHARACTERISTICS OF THE MICROBACILLUS OF ACNE. Br Med J. 1910; 1(2577):1227–9Douglas HC, Gunter SE. The Taxonomic Position of Corynebacterium acnes. J Bacteriol. 1946; 52(1):15–23.Kishishita M, Ushijima T, Ozaki Y, Ito Y. Biotyping of Propionibacterium acnes isolated from normal human facial skin. Appl Environ Microbiol. 1979; 38(4):585–9Fitz-Gibbon S, Tomida S, Chiu BH, Nguyen L, Du C, Liu M, et al. Propionibacterium acnes strain populations in the human skin microbiome associated with acne. J Invest Dermatol. 2013; 133(9):2152–60.Piper KE, Jacobson MJ, Cofield RH, Sperling JW, Sanchez-Sotelo J, Osmon DR, et al. Microbiologic diagnosis of prosthetic shoulder infection by use of implant sonication. J Clin Microbiol. 2009 Jun; 47(6):1878–84.Kasimatis G, Fitz-Gibbon S, Tomida S, Wong M, Li H. Analysis of Complete Genomes of Propionibacterium acnes Reveals a Novel Plasmid and Increased Pseudogenes in an Acne Associated Strain. Biomed Res Int. 2013; 2013:11.. Lomholt HB, Kilian M. Clonality and anatomic distribution on the skin of antibiotic resistant and sensitive Propionibacterium acnes. Acta Derm Venereol. 2014; 94(5):534–8. Sampedro MF, Piper KE, McDowell A, Patrick S, Mandrekar JN, Rouse MS, et al. Species of Propionibacterium and Propionibacterium acnes phylotypes associated with orthopedic implants. Diagn Microbiol Infect Dis. 2009; 64(2):138–45.. Shannon BA, Cohen RJ, Garrett KL. Polymerase chain reaction-based identification of Propionibacterium acnes types isolated from the male urinary tract: evaluation of adolescents, normal adults and men with prostatic pathology. BJU Int. 2006; 98(2):388–92.Scholz CF, Jensen A, Lomholt HB, Bruggemann H, Kilian M. A novel highresolution single locus sequence typing scheme for mixed populations of Propionibacterium acnes in vivo. PLoS One. 2014; 9(8):e104199.Rollason J, McDowell A, Albert HB, Barnard E, Worthington T, Hilton AC, et al. Genotypic and antimicrobial characterisation of Propionibacterium acnes isolates from surgically excised lumbar disc herniations. Biomed Res Int. 2013; 2013:530382.Nagy E, Urbán E, Becker S, Kostrzewa M, Vörös A, Hunyadkürti J, et al. MALDI-TOF MS fingerprinting facilitates rapid discrimination of phylotypes I, II and III of Propionibacterium acnes. Anaerobe. 2013; 20:20–6.Lomholt HB, Kilian M. Population Genetic Analysis of Propionibacterium acnes Identifies a Subpopulation and Epidemic Clones Associated with Acne. PLoS One. 2010; 5(8):e12277.McDowell A, Nagy I, Magyari M, Barnard E, Patrick S. The Opportunistic Pathogen Propionibacterium acnes: Insights into Typing, Human Disease, Clonal Diversification and CAMP Factor Evolution. PLoS One. 2013; 8(9):e70897.Perry AL, Worthington T, Hilton AC, Lambert PA, Stirling AJ, Elliott TS. Analysis of clinical isolates of Propionibacterium acnes by optimised RAPD. FEMS Microbiol Lett. 2003; 228(1):51–5.Dekio I, Culak R, Misra R, Gaulton T, Fang M, Sakamoto M, et al. Dissecting the taxonomic heterogeneity within Propionibacterium acnes: proposal for Propionibacterium acnes subsp. Acnes subsp. nov. and Propionibacterium acnes subsp. elongatum subsp. nov. Int J Syst Evol Microbiol. 2015; 65(12):4776–87.Scholz CFP. The natural history of cutaneous propionibacteria, and reclassification of selected species within the genus Propionibacterium to the proposed novel genera Acidipropionibacterium gen. nov., Cutibacterium gen. nov. and Pseudopropionibacterium gen. nov. Int J Syst Evol Microbiol. 2016; 66(11):4422–32.Rojas W, Anaya JM, Gomez LM, Aristizabal B, Cano LE, Lopera D. Inmunología de Rojas. 18th ed. Medellín, Colombia.; 2017. 622 p.Patiño LA, Morales CA. Microbiota de la piel: el ecosistema cutáneo. Rev Asoc Colomb Dermatol. 2013; 21(2):147–58.Brzuszkiewicz E, Weiner J, Wollherr A, Thurmer A, Hupeden J, Lomholt HB, et al. Comparative genomics and transcriptomics of Propionibacterium acnes. PLoS One. 2011; 6(6):e21581.Fischer N, Mak TN, Shinohara DB, Sfanos KS, Meyer TF, Brüggemann H. Deciphering the Intracellular Fate of Propionibacterium acnes in Macrophages. Biomed Res Int. 2013; 2013.Eishi Y. Etiologic link between sarcoidosis and Propionibacterium acnes. Respir Investig. 2013; 51(2):56–68.de Brouwer B, Veltkamp M, Wauters CA, Grutters JC, Janssen R. Propionibacterium acnes isolated from lymph nodes of patients with sarcoidosis. Sarcoidosis Vasc Diffuse Lung Dis. 2015; 32(3):271–4Brüggemann H, Henne A, Hoster F, Liesegang H, Wiezer A, Strittmatter A, et al. The Complete Genome Sequence of Propionibacterium Acnes, a Commensal of Human Skin. Science. 2004; 305(5684):671–3.McDowell A, Perry AL, Lambert PA, Patrick S. A new phylogenetic group of Propionibacterium acnes. J Med Microbiol. 2008; 57(Pt 2):218–24.. Hauck Y, Soler C, Gerome P, Vong R, Macnab C, Appere G, et al. A novel multiple locus variable number of tandem repeat (VNTR) analysis (MLVA) method for Propionibacterium acnes. Infect Genet Evol. 2015; 33:233–41.Kilian M, Scholz CF, Lomholt HB. Multilocus sequence typing and phylogenetic analysis of Propionibacterium acnes. J Clin Microbiol. 2012; 50(4):1158–65.Zárate MS, Romano V, Nievas J, Smayevsky J. Utilidad de la espectrometría de masas MALDI-TOF en la identificación de bacterias anaerobias. Rev Argent Microbiol. 2014; 46(98):102Kaminsky A, Florez-White M, Arias MI, Bagatin E. Clasificación del acné: Consenso Ibero-Latinoamericano, 2014. Med Cutan Ibero Lat Am. 2015; 43(1):18–23.. Grice EA, Kong HH, Conlan S, Deming CB, Davis J, Young AC, et al. Topographical and temporal diversity of the human skin microbiome. Science. 2009; 324(5931):1190–2.Kistowska M, Meier B, Proust T, Feldmeyer L, Cozzio A, Kuendig T, et al. Propionibacterium acnes promotes Th17 and Th17/Th1 responses in acne patients. J Invest Dermatol. 2015; 135(1):110–8.50. Montenegro Benavides Paola Andrea Pardo Rodríguez Mayda Gisel. Determinación de filotipos de propionibacterium acnes por MALDI-TOF [Internet]. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca; 2017 [cited 2018 Mar 25]. Available from: http://190.60.201.179:28080/janiumbin/detalle.pl?Id=20180325235208Leal LCS, Ramírez LCC. Evaluación de la congelación para conservación de especies autóctonas bacterianas. NOVA. 2005; 3(4):21–9.Higaki S, Nakamura M, Morohashi M. Propionibacterium acnes biotypes and susceptibility to minocycline and Keigai‐ rengyo‐ to. Aquat Microb Ecol [Internet]. 2004; Available from: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1365-4632.2004.01887.x/fullOMS | Organización Mundial de la Salud. 2018 Mar 14 [cited 2018 Mar 14]; Available from: http://www.who.int/esCollier CN, Harper JC, Cafardi JA, Cantrell WC, Wang W, Foster KW, et al. The prevalence of acne in adults 20 years and older. J Am Acad Dermatol. 2008 Jan; 58(1):56–9.Yentzer BA, Hick J, Reese EL, Uhas A, Feldman SR, Balkrishnan R. Acne vulgaris in the United States: a descriptive epidemiology. Cutis. 2010 Aug; 86(2):94–9.Pereira Duquia R, da Silva Dos Santos I, de Almeida H Jr, Martins Souza PR, de Avelar Breunig J, Zouboulis CC. Epidemiology of Acne Vulgaris in 18-YearOld Male Army Conscripts in a South Brazilian City. Dermatology. 2017 Jun 14; 233(2-3):145–54.Lello J, Pearl A, Arroll B, Yallop J, Birchall NM. Prevalence of acne vulgaris in Auckland senior high school students. N Z Med J. 1995 Jul 28; 108(1004):287–9.Higaki S, Kitagawa T, Kagoura M, Morohashi M, Yamagishi T. Correlation between Propionibacterium acnes biotypes, lipase activity and rash degree in acne patients. J Dermatol. 2000 Aug; 27(8):519–22.Perkins AC, Cheng CE, Hillebrand GG, Miyamoto K, Kimball AB. Comparison of the epidemiology of acne vulgaris among Caucasian, Asian, Continental Indian and African American women. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2011 Sep; 25(9):1054–60.Yang X-Y, Wu W-J, Yang C, Yang T, He J-D, Yang Z, et al. Association of HSD17B3 and HSD3B1 polymorphisms with acne vulgaris in Southwestern Han Chinese. Dermatology. 2013 Oct 19; 227(3):202–8.Atkinson FS, Foster-Powell K, Brand-Miller JC. International tables of glycemic index and glycemic load values: 2008. Diabetes Care. 2008 Dec; 31(12):2281–3Legarraga P, Moraga M, Lam M, Geoffroy E, Zumarán C, García P. Impacto de la espectrometría de masas por MALDI-TOF MS en la identificación rápida de bacterias aeróbicas y anaeróbicas de importancia clínica. Rev Chilena Infectol. 2013; 30(2):140–6.Dekio I, Culak R, Fang M, Ball G, Gharbia S, Shah HN. Correlation between phylogroups and intracellular proteomes of Propionibacterium acnes and differences in the protein expression profiles between anaerobically and aerobically grown cells. Biomed Res Int. 2013 Jun 26; 2013:151797.D3350- 5. Preps, D3350- 50 Preps, Preps 200. E.Z.N.A.®Bacterial DNA Kit. Available from: http://omegabiotek.com/store/wpcontent/uploads/2013/04/D3350-Bacterial-DNA-Kit-Combo-Online.pdfEnfermedadFunción hormonalCaracterísticas bioquímicasTouchdownAcnéAcnesFilotipoBiotipoORIGINALCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar.pdfCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar.pdfapplication/pdf1371551https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3772/1/Caracterizacion%20de%20Cutibacterium%20acnes%20aislado%20a%20partir%20de%20acne%20vulgar.pdf2d7a5a04f7a4d4e32d675999d5f2224cMD51open accessCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar CARTAS.pdfCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar CARTAS.pdfapplication/pdf338572https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3772/2/Caracterizacion%20de%20Cutibacterium%20acnes%20aislado%20a%20partir%20de%20acne%20vulgar%20CARTAS.pdfd264cf147ab381d888ef98f448fc715dMD52metadata only accessCARACTERIZACIÓN DE Cutibacterium (Propionibacterium) acnes AISLADO (2).pdfCARACTERIZACIÓN DE Cutibacterium (Propionibacterium) acnes AISLADO (2).pdfapplication/pdf1527030https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3772/3/CARACTERIZACI%c3%93N%20DE%20Cutibacterium%20%28Propionibacterium%29%20acnes%20AISLADO%20%282%29.pdfa0d5decf2a7c6e9f65c4bef9fc4eaf23MD53open accessTEXTCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar.pdf.txtCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar.pdf.txtExtracted texttext/plain102284https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3772/5/Caracterizacion%20de%20Cutibacterium%20acnes%20aislado%20a%20partir%20de%20acne%20vulgar.pdf.txtdfe203f2c2cbf25c41472da15bd93cc8MD55open accessCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar CARTAS.pdf.txtCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar CARTAS.pdf.txtExtracted texttext/plain10https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3772/7/Caracterizacion%20de%20Cutibacterium%20acnes%20aislado%20a%20partir%20de%20acne%20vulgar%20CARTAS.pdf.txt890a51b93b428aab90fbbd8685951587MD57metadata only accessCARACTERIZACIÓN DE Cutibacterium (Propionibacterium) acnes AISLADO (2).pdf.txtCARACTERIZACIÓN DE Cutibacterium (Propionibacterium) acnes AISLADO (2).pdf.txtExtracted texttext/plain14865https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3772/9/CARACTERIZACI%c3%93N%20DE%20Cutibacterium%20%28Propionibacterium%29%20acnes%20AISLADO%20%282%29.pdf.txt18fdb72d507ec9ba611e66a52e36d2b8MD59open accessTHUMBNAILCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar.pdf.jpgCaracterizacion de Cutibacterium acnes aislado a partir de acne vulgar.pdf.jpgGenerated 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