Evaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir Heliotropium indicum Linn sobre la linea celular de Osteosarcoma OSCA-8
El osteosarcoma es el cáncer más común de tejido óseo, afecta en un mayor porcentaje a niños, adolescentes y adultos jóvenes. Éste se caracteriza por ser un tumor maligno de mal pronóstico con tratamiento agresivo que abarca quimioterapia, cirugía y radioterapia, que aunque buscan mejorar la salud g...
- Autores:
-
Lozano Aguilar, Erika Johana
Reyes Álvarez, Karen Alejandra
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2019
- Institución:
- Colegio Mayor de Cundinamarca
- Repositorio:
- Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3693
- Acceso en línea:
- https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3693
- Palabra clave:
- osteosarcoma
citotoxicidad
genotoxicidad
Malachra alceifolia Jacq
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- closedAccess
- License
- Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019
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Malachra alceifolia Jacq Cordia dentata Poir Heliotropium indicum Linn |
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El osteosarcoma es el cáncer más común de tejido óseo, afecta en un mayor porcentaje a niños, adolescentes y adultos jóvenes. Éste se caracteriza por ser un tumor maligno de mal pronóstico con tratamiento agresivo que abarca quimioterapia, cirugía y radioterapia, que aunque buscan mejorar la salud global del paciente pueden causar efectos secundarios indeseables tales como náuseas, vómitos, mielosupresión, inmunosupresión, ototoxicidad y cardiotoxicidad entre otros, además de no alcanzar el 100% de efectividad, por lo que se hace necesaria la búsqueda de nuevas alternativas terapéuticas. La medicina herbolaria es una herramienta que favorece el tratamiento del cáncer, ya que numerosos estudios demuestran que los metabolitos secundarios de las plantas interfieren en el control de la supervivencia y muerte de las células malignas, lo que permite su planteamiento como una nueva forma de tratar el osteosarcoma. El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad citotóxica de los extractos obtenidos de las plantas Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre las líneas celulares OSCA-8 (Osteosarcoma canino) y MDCK (fibroblastos caninos renales, empleados como control celular de citotoxicidad) empleando el ensayo de viabilidad celular por reducción metabólica del Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT). Los extractos vegetales mostraron actividad citotóxica dosis dependiente, exhibiendo un mejor comportamiento los extractos Cordia dentata Poir en solvente Acetato de etilo (CDAe) y Heliotropium indicum Linn en solvente Metanol (HIM). En cuanto a la línea celular OSCA-8 se demostró que el extracto CDAe ejerció inhibición con una IC50 de 22,38 μg/ml y 29,24 μg/ml a las 48 y 72 horas post tratamiento respectivamente, mientras que el extracto HIM ejerció inhibición en esta línea celular con una IC50 de 173,38 μg/ml y 222,08 μg/ml a las 48 y 72 horas post tratamiento respectivamente. En las células empleadas como control de citotoxicidad se observó que la concentración de extractos vegetales requerida para inhibir su crecimiento fue mucho mayor en comparación a la requerida para inhibir las células cancerígenas: el extracto CDAe inhibió la línea celular control con una IC50 de 243,22 μg/ml y 158,12 μg/ml a las 48 y 72 horas post tratamiento, respectivamente, mientras que el extracto de HIM ejerció inhibición con una IC50 de 524,81 μg/ml y 247,68 μg/ml a las 48 y 72 horas post tratamiento respectivamente. Como prueba complementaria en la evaluación de la actividad citotóxica, se realizó el ensayo de cometa donde fueron evaluados los extractos CDAe y HIM, obteniendo resultados sugestivos de genotoxicidad, debido a la observación de la pérdida de integridad del ADN en células individuales a las 48 horas post tratamiento. Los resultados sugirieron que ambos extractos tienen la capacidad de causar un marcado efecto genotóxico sobre la línea celular OSCA-8, evidenciándose en mayor proporción que el observado sobre la línea celular control MDCK. Los resultados obtenidos son prometedores en la investigación contra el cáncer, exactamente en la investigación de nuevas alternativas terapéuticas para tratar el osteosarcoma. Sin embargo, es necesario continuar con más investigaciones al respecto. |
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Torres, Orlando Alfredo92320546deacdefe71e430b13969df69Muñoz, Ana Luisa75d8f56074df1bf3a06e40a4cdc5d676Lozano Aguilar, Erika Johana5caf7d4d75651c21c0c722db49cce111Reyes Álvarez, Karen Alejandra165ff54350a707efcdefc72c0527d07d2021-11-21T21:16:44Z2021-11-21T21:16:44Z2019-06https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/369360045El osteosarcoma es el cáncer más común de tejido óseo, afecta en un mayor porcentaje a niños, adolescentes y adultos jóvenes. Éste se caracteriza por ser un tumor maligno de mal pronóstico con tratamiento agresivo que abarca quimioterapia, cirugía y radioterapia, que aunque buscan mejorar la salud global del paciente pueden causar efectos secundarios indeseables tales como náuseas, vómitos, mielosupresión, inmunosupresión, ototoxicidad y cardiotoxicidad entre otros, además de no alcanzar el 100% de efectividad, por lo que se hace necesaria la búsqueda de nuevas alternativas terapéuticas. La medicina herbolaria es una herramienta que favorece el tratamiento del cáncer, ya que numerosos estudios demuestran que los metabolitos secundarios de las plantas interfieren en el control de la supervivencia y muerte de las células malignas, lo que permite su planteamiento como una nueva forma de tratar el osteosarcoma. El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad citotóxica de los extractos obtenidos de las plantas Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre las líneas celulares OSCA-8 (Osteosarcoma canino) y MDCK (fibroblastos caninos renales, empleados como control celular de citotoxicidad) empleando el ensayo de viabilidad celular por reducción metabólica del Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT). Los extractos vegetales mostraron actividad citotóxica dosis dependiente, exhibiendo un mejor comportamiento los extractos Cordia dentata Poir en solvente Acetato de etilo (CDAe) y Heliotropium indicum Linn en solvente Metanol (HIM). En cuanto a la línea celular OSCA-8 se demostró que el extracto CDAe ejerció inhibición con una IC50 de 22,38 μg/ml y 29,24 μg/ml a las 48 y 72 horas post tratamiento respectivamente, mientras que el extracto HIM ejerció inhibición en esta línea celular con una IC50 de 173,38 μg/ml y 222,08 μg/ml a las 48 y 72 horas post tratamiento respectivamente. En las células empleadas como control de citotoxicidad se observó que la concentración de extractos vegetales requerida para inhibir su crecimiento fue mucho mayor en comparación a la requerida para inhibir las células cancerígenas: el extracto CDAe inhibió la línea celular control con una IC50 de 243,22 μg/ml y 158,12 μg/ml a las 48 y 72 horas post tratamiento, respectivamente, mientras que el extracto de HIM ejerció inhibición con una IC50 de 524,81 μg/ml y 247,68 μg/ml a las 48 y 72 horas post tratamiento respectivamente. Como prueba complementaria en la evaluación de la actividad citotóxica, se realizó el ensayo de cometa donde fueron evaluados los extractos CDAe y HIM, obteniendo resultados sugestivos de genotoxicidad, debido a la observación de la pérdida de integridad del ADN en células individuales a las 48 horas post tratamiento. Los resultados sugirieron que ambos extractos tienen la capacidad de causar un marcado efecto genotóxico sobre la línea celular OSCA-8, evidenciándose en mayor proporción que el observado sobre la línea celular control MDCK. Los resultados obtenidos son prometedores en la investigación contra el cáncer, exactamente en la investigación de nuevas alternativas terapéuticas para tratar el osteosarcoma. Sin embargo, es necesario continuar con más investigaciones al respecto.INTRODUCCIÓN 10 1. OBJETIVOS 13 1.1. OBJETIVO GENERAL 13 1.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS 13 2. ANTECEDENTES 14 3. MARCO TEÓRICO 19 3.1. LAS PLANTAS COMO FUENTES NATURALES DE PRINCIPIOS ACTIVOS 19 3.2. CONCEPTOS GENERALES DEL GÉNERO MALACHRA 19 3.2.1. Clasificación, descripción y distribución geográfica de Malachra alceifolia Jacq 19 3.2.2. Fitoquímica de Malachra alceifolia Jacq 21 3.2.3. Aplicaciones clínicas de Malachra alceifolia Jacq 21 3.3. CONCEPTOS GENERALES DEL GÉNERO CORDIA 21 3.3.1. Clasificación, descripción y distribución geográfica de Cordia dentata Poir 21 3.3.2. Fitoquímica de Cordia dentata Poir 23 3.3.3. Aplicaciones clínicas de Cordia dentata Poir 23 3.4. CONCEPTOS GENERALES DEL GÉNERO HELIOTROPIUM 23 3.4.1. Clasificación, descripción y distribución geográfica de Heliotropium indicum Linn 23 3.4.2. Fitoquímica de Heliotropium indicum Linn 25 3.4.3. Aplicaciones clínicas de Heliotropium indicum Linn 25 3.5. EL CÁNCER, UNA DE LAS PRINCIPALES CAUSAS DE MUERTE EN EL MUNDO 25 3.5.1. Ciclo celular y origen del cáncer 26 3.5.1.1. Fase G1 o gap 1 27 3.5.1.2. Fase S o síntesis 28 3.5.1.3. Fase G2 28 3.5.1.4. Fase M 29 3.6. OSTEOSARCOMA (OS) 30 3.6.1. Epidemiología 31 3.6.2. Factores de riesgo 31 3.6.3. Etiología y patogenia 31 3.6.4. Presentación clínica 32 3.6.5. Clasificación de los osteosarcomas 32 3.6.5.1. Osteosarcomas primarios 33 3.6.5.2. Osteosarcomas secundarios 34 3.6.6. Diagnóstico 35 3.6.7. Tratamiento 35 3.6.7.1. Quimioterapia 35 3.6.7.2.Cirugía 37 3.6.7.3. Radioterapia (RT) 37 3.7. CULTIVO CELULAR 38 4. DISEÑO METODOLÓGICO 39 4.1. ÁREA DE ESTUDIO 39 4.2. TIPO DE INVESTIGACIÓN 39 4.3. UNIVERSO 39 4.4. POBLACIÓN DE ESTUDIO 39 4.5. MUESTRA 39 4.6. HIPÓTESIS 40 4.6.1. Hipótesis alterna 40 4.6.2. Hipótesis nula 40 4.7. VARIABLES E INDICADORES 40 4.8. TÉCNICAS Y PROCEDIMIENTOS 40 4.8.1. Extractos 41 4.8.2. Cultivo celular 41 4.8.3. Curva de proliferación celular 42 4.8.4. Ensayo de viabilidad celular 43 4.8.5. Cálculo de la Concentración inhibitoria 50 ( IC50) 44 4.8.6. Ensayo de cometa 44 4.8.7. Análisis estadístico 46 5. RESULTADOS 47 5.1. TASA DE PROLIFERACIÓN CELULAR 47 5.2. EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD CITOTÓXICA 48 5.3. CÁLCULO DE LA CONCENTRACIÓN INHIBITORIA 50 (IC50 ) 54 5.4. EVALUACION DE LA ACTIVIDAD GENOTOXICA. ENSAYO DE COMETA 55 6. DISCUSIÓN 57 7. CONCLUSIONES 64 8. RECOMENDACIONES 66 REFERENCIAS 67 ANEXOS 80PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico84p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá DCBacteriología y Laboratorio ClínicoDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbEvaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir Heliotropium indicum Linn sobre la linea celular de Osteosarcoma OSCA-8Trabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionWinslow LC, Kroll DJ. Herbs as medicines. 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8-3-81.pdfapplication/pdf1219635https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/1/Evaluaci%c3%b3n%20in%20vitro%20de%20la%20actividad%20citot%c3%b3xica%20de%20los%20extractos%20de%20Malachra%20alceifolia%20Jacq%2c%20Cordia%20dentata%20Poir%20y%20Heliotropium%20indicum%20Linn%20sobre%20la%20l%c3%adnea%20celular%20de%20osteosarcoma%20canino%20OSCA%208-3-81.pdf0c0ab9ac0caf35f9f18315e26973b79fMD51open accessIDENTIFICACION TRABAJO DE GRADO.pdfIDENTIFICACION TRABAJO DE GRADO.pdfapplication/pdf816168https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/2/IDENTIFICACION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdfe05be50f18a1d6d7dabb25e977f0a1f9MD52metadata only accessDiapositivas Evaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8.pdfDiapositivas Evaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8.pdfapplication/pdf1495131https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/3/Diapositivas%20Evaluaci%c3%b3n%20in%20vitro%20de%20la%20actividad%20citot%c3%b3xica%20de%20los%20extractos%20de%20Malachra%20alceifolia%20Jacq%2c%20Cordia%20dentata%20Poir%20y%20Heliotropium%20indicum%20Linn%20sobre%20la%20l%c3%adnea%20celular%20de%20osteosarcoma%20canino%20OSCA%208.pdfac5a0b120e22d1f1f409d0f33de93a47MD53open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814828https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/4/license.txt2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7aMD54open accessTEXTEvaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8-3-81.pdf.txtEvaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8-3-81.pdf.txtExtracted texttext/plain145928https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/5/Evaluaci%c3%b3n%20in%20vitro%20de%20la%20actividad%20citot%c3%b3xica%20de%20los%20extractos%20de%20Malachra%20alceifolia%20Jacq%2c%20Cordia%20dentata%20Poir%20y%20Heliotropium%20indicum%20Linn%20sobre%20la%20l%c3%adnea%20celular%20de%20osteosarcoma%20canino%20OSCA%208-3-81.pdf.txt3415f03e17df3a89c9b0137331004d0dMD55open accessIDENTIFICACION TRABAJO DE GRADO.pdf.txtIDENTIFICACION TRABAJO DE GRADO.pdf.txtExtracted texttext/plain126https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/7/IDENTIFICACION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdf.txta8d3b1e631793a3f711efc055fcdb68fMD57metadata only accessDiapositivas Evaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8.pdf.txtDiapositivas Evaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8.pdf.txtExtracted texttext/plain17385https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/9/Diapositivas%20Evaluaci%c3%b3n%20in%20vitro%20de%20la%20actividad%20citot%c3%b3xica%20de%20los%20extractos%20de%20Malachra%20alceifolia%20Jacq%2c%20Cordia%20dentata%20Poir%20y%20Heliotropium%20indicum%20Linn%20sobre%20la%20l%c3%adnea%20celular%20de%20osteosarcoma%20canino%20OSCA%208.pdf.txt089ec6f9da89e469399ff2d91d816975MD59open accessTHUMBNAILEvaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8-3-81.pdf.jpgEvaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8-3-81.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg5120https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/6/Evaluaci%c3%b3n%20in%20vitro%20de%20la%20actividad%20citot%c3%b3xica%20de%20los%20extractos%20de%20Malachra%20alceifolia%20Jacq%2c%20Cordia%20dentata%20Poir%20y%20Heliotropium%20indicum%20Linn%20sobre%20la%20l%c3%adnea%20celular%20de%20osteosarcoma%20canino%20OSCA%208-3-81.pdf.jpg19b64929ccad87c54f48c66bf8cb9f90MD56open accessIDENTIFICACION TRABAJO DE GRADO.pdf.jpgIDENTIFICACION TRABAJO DE GRADO.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg7880https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/8/IDENTIFICACION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdf.jpg05c7b26ac07dcbb0597fe57a55059f1cMD58metadata only accessDiapositivas Evaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8.pdf.jpgDiapositivas Evaluación in vitro de la actividad citotóxica de los extractos de Malachra alceifolia Jacq, Cordia dentata Poir y Heliotropium indicum Linn sobre la línea celular de osteosarcoma canino OSCA 8.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg9015https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3693/10/Diapositivas%20Evaluaci%c3%b3n%20in%20vitro%20de%20la%20actividad%20citot%c3%b3xica%20de%20los%20extractos%20de%20Malachra%20alceifolia%20Jacq%2c%20Cordia%20dentata%20Poir%20y%20Heliotropium%20indicum%20Linn%20sobre%20la%20l%c3%adnea%20celular%20de%20osteosarcoma%20canino%20OSCA%208.pdf.jpg7e21818e9ece6a5ceccd09d9d43acdecMD510open accessunicolmayor/3693oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/36932021-11-22 03:00:51.436An error occurred on the license name.|||https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/open accessBiblioteca Digital 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