Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis
H. pluvialis es una microalga productora de astaxantina, carotenoide, utilizado en la industria pecuaria, alimentaria y nutracéutica, es por ello que propone determinar las condiciones adecuadas para su producción. Se realizó el cultivo en medios Rudic’s medium (RM) y Bold’s basal medium (BBM), supl...
- Autores:
-
Cuero Amú, Kelin Johana
Domínguez Castillo, Jayveri Astrid
Espitia Sánchez, Karen Danitza
Fuentes Cañón, Laura Andrea
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2019
- Institución:
- Colegio Mayor de Cundinamarca
- Repositorio:
- Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3654
- Acceso en línea:
- https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3654
- Palabra clave:
- luces de colores
estrés salino
microalga
factores de estrés
carotenoide
- Rights
- closedAccess
- License
- Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019
| id |
UCOLMAYOR2_b1258e1d4be76ead51f880e46695b86b |
|---|---|
| oai_identifier_str |
oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3654 |
| network_acronym_str |
UCOLMAYOR2 |
| network_name_str |
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca |
| repository_id_str |
|
| dc.title.spa.fl_str_mv |
Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis |
| title |
Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis |
| spellingShingle |
Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis luces de colores estrés salino microalga factores de estrés carotenoide |
| title_short |
Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis |
| title_full |
Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis |
| title_fullStr |
Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis |
| title_full_unstemmed |
Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis |
| title_sort |
Efecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis |
| dc.creator.fl_str_mv |
Cuero Amú, Kelin Johana Domínguez Castillo, Jayveri Astrid Espitia Sánchez, Karen Danitza Fuentes Cañón, Laura Andrea |
| dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv |
Camacho Kurmen, Judith Elena |
| dc.contributor.author.none.fl_str_mv |
Cuero Amú, Kelin Johana Domínguez Castillo, Jayveri Astrid Espitia Sánchez, Karen Danitza Fuentes Cañón, Laura Andrea |
| dc.subject.lemb.none.fl_str_mv |
luces de colores estrés salino |
| topic |
luces de colores estrés salino microalga factores de estrés carotenoide |
| dc.subject.proposal.spa.fl_str_mv |
microalga factores de estrés carotenoide |
| description |
H. pluvialis es una microalga productora de astaxantina, carotenoide, utilizado en la industria pecuaria, alimentaria y nutracéutica, es por ello que propone determinar las condiciones adecuadas para su producción. Se realizó el cultivo en medios Rudic’s medium (RM) y Bold’s basal medium (BBM), suplementados con concentraciones de acetato de sodio de 0.248 mg/mL, 0.310 mg/mL, 0.372 mg/mL, luz blanca y azul con una irradianza de 150 μE m-2 s -1 , con CO2 al 5%, agitación con burbujeo, temperatura 20oC ± 2oC, fotoperiodo 20:4 Luz / Oscuridad y pH 6.8. Posteriormente, se realizó el recuento de biomasa y la evaluación morfológica en hemocitómetro. La cuantificación de clorofila y astaxantina se realiz por espectrofotometría. Se obtuvo un crecimiento en el medio BBM, de 3.80x104 cel/ml, sin diferencias significativas con el medio RM (F:0.7871; P:0.376; GL:2). La biomasa a los 30 días fue de 2.49x105 cel/mL y 1.55x105 cel/mL en medio BBM y RM respectivamente. Se obtuvo una mayor concentración de astaxantina en el medio RM (5.06μg/mL) significativamente más eficiente para la producción (F=52.74;P=<0.0001;GL=1), en el cual se utilizó una concentración a 0.372 mg/mL de acetato de sodio, luz azul e irradianza 150 μE m−2 s −1 como factores de estrés. En cuanto la clorofila, se obtuvieron 29.45μg/mL al utilizar luz azul, alta irradianza y 0.310mg/mL de acetato de sodio en medio RM. La morfología observada fue vegetativa, palmella y enquistante (aplanóspora). Se concluye que la luz azul, el acetato de sodio a 0.372 mg/mL y alta irradianza inducen una mayor síntesis de astaxantina por H. pluvialis. |
| publishDate |
2019 |
| dc.date.issued.none.fl_str_mv |
2019 |
| dc.date.accessioned.none.fl_str_mv |
2021-11-12T21:48:21Z |
| dc.date.available.none.fl_str_mv |
2021-11-12T21:48:21Z |
| dc.type.spa.fl_str_mv |
Trabajo de grado - Pregrado |
| dc.type.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
| dc.type.coarversion.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85 |
| dc.type.content.spa.fl_str_mv |
Text |
| dc.type.driver.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
| dc.type.redcol.spa.fl_str_mv |
https://purl.org/redcol/resource_type/TP |
| dc.type.version.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| format |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
| status_str |
publishedVersion |
| dc.identifier.uri.none.fl_str_mv |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3654 |
| dc.identifier.barcode.none.fl_str_mv |
60050 |
| url |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3654 |
| identifier_str_mv |
60050 |
| dc.language.iso.spa.fl_str_mv |
spa |
| language |
spa |
| dc.relation.references.spa.fl_str_mv |
Nguyen KD. Astaxanthin: A Comparative Case of Synthetic VS. Natural Production. Chemical and Biomolecular Engineering [Internet]. 2013 [citado 2018 agosto 20]; Available in: https://www.researchgate.net/publication/305150785_Astaxanthin_a_comparati ve_case_of_synthetic_vs_natural_production Camacho JE, González G, Klotz B. Producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis bajo diferentes condiciones de estrés. NOVA [Internet]. 2013 [citado 2017 oct 7];11(19):94-103 Disponible en:http://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/nova/article/view/1022/1019 Ambati RR, Phang SM, Ravi S, et al. astaxanthin: sources, extraction, stability, biological activities and its commercial applications--a review. Mar drugs [Internet]. 2014[citado 2018 abril 19];12(1), 128-152 Available in: http://www.mdpi.com/1660- 3397/12/1/128/htm Fernández J, Oterino AG, Alonso GG, Flores JA y Turrado JP. Presencia de Haematococcus pluvialis (Flotow, 1844) en la provincia de Zamora (Haematococcaceae). Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol. [Internet] 2015 [citado 2018 abril 23]; 149, 101-107. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0167779903000787 Martínez S. Evaluación del crecimiento celular y de los pigmentos obtenidos de la microalga Haematococcus pluvialis (CHLOROPHYTA: VOLVOCALES) cultivada en diferentes medios.[Trabajo de grado de para obtener el titulo de doctora en tecnología avanzada] [Internet] 2011 Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y Tecnología Avanzada. Instituto Politécnico Nacional., México, D.F., págs. 103. [citado 2018 Abril 19] Disponible en: http://tesis.ipn.mx/bitstream/handle/123456789/8226/EVALCREC.pdf?sequence=1. Kiperstok AC,Sebestyén P, Podola B, Melkonian M.Biofilm cultivation of Haematococcus pluvialis enables a highly productive one-phase process for astaxanthin production using high light intensities. Algal Research [Internet] 2017 [citado 2018 abril 24]; 213-222 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S221192641630594X Makio K, Toshihide K and Shiro N. Enhanced Carotenoid Biosynthesis by Oxidative Stress in Acetate-Induced Cyst Cells of a Green Unicellular Alga, Haematococcus pluvialis Appl Environ Microbiol [Internet] 1993 [citado 2018 abril 24];59(3): 867– 73. Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC202201/ Orosa M, Valero JF, Herrero C, et al. Comparison of the accumulation of astaxanthin in Haematococcus pluvialis and other green microalgae under N-starvation and high light conditions. Biotechnology Letters [Internet].2001 [citado 2018 abril 22];23 (13), 1079-85 Available in: https://link.springer.com/article/10.1023%2FA%3A1010510508384 Steinbrenner J and Linden H. Regulation of Two Carotenoid Biosynthesis Genes Coding for Phytoene Synthase and Carotenoid Hydroxylase during Stress-Induced astaxanthin Formation in the Green Alga Haematococcus pluvialis. Planta Physio [Internet].2001 [citado 2018 abril 22];125 (2): 810 - 17 Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC64882/ Sarada R, Tripathi U and Ravishankar GA. Influence of stress on astaxanthin production in Haematococcus pluvialis grown under different culture conditions. Process Biochemistry [Internet].2002 [citado 2018 abril 22];37 (6): 623-27 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0032959201002461 Orosa M, Franqueira D, Cid A and Abalde J. Analysis and enhancement of astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis. Bioresource Technology [Internet].2005 [citado 2018 abr 2]; (96) 373–378 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852404001476 Jeon Y, Cho C and Yun Y. Combined effects of light intensity and acetate concentration on the growth of unicellular microalga Haematococcus pluvialis. Enzyme and Microbial Technology [Internet].2006 [citado 2018 marz 29]; (39) 490–495 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141022906001098?via%3Dihu b Imamoglu E, Vardar F and Conk M.. Effect of different culture media and light intensities on growth of Haematococcus pluvialis. International Journal of Natural and Engineering Sciences [Internet]. 2007 [citado 2018 abril 22]; 1 (3): 05-09 Available in: https://www.researchgate.net/publication/284261435_Effect_of_different_culture_ media_and_light_intensities_on_growth_of_Haematococcus_pluvialis Vidhyavathi, Venkatachalam and Sarada. Regulation of carotenoid biosynthetic genes expression and carotenoid accumulation in the green alga Haematococcus pluvialis under nutrient stress conditions. J Exp Bot [Internet].2008 [citado 2019 marz 25];59(6):1409-18. Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18343887 Imamoglu E, Dalay MC and Sukan FV. Influences of different stress media and high light intensities on accumulation of astaxanthin in the green alga Haematococcus pluvialis.New Biotechnology [Internet]. 2009 [citado 2018 abril 22]; 26 (3): 199- 204 Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19712763 Su Y, Wang J, Shi M, et al. Metabolomic and network analysis of astaxanthin- producing Haematococcus pluvialis under various stress conditions. Bioresource technology [Internet]. 2014 [citado 2019 marz 10]; 26 170:522-529 Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25164345 Chekanov K, Lobakova E, Selyakh I, et al. Accumulation of astaxanthin by a new Haematococcus pluvialis strain BM1 from the white sea coastal rocks (Russia). Marine drugs [Internet]. 2014 [citado 2018 sep 4]; 12(8):4504-20. Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25196836 Dong, Huang, Zhang, et al. Four different methods comparison for extraction of astaxanthin from green alga Haematococcus pluvialis.The Scientific World Journal [Internet]. 2014 [citado 2018 sep 4]; 7 Available in: https://www.hindawi.com/journals/tswj/2014/694305/ Wan, Zhang, Hou, et al. The effect of temperature on cell growth and astaxanthin accumulation of Haematococcus pluvialis during a light–dark cyclic cultivation. Bioresource Technology [Internet]. 2014 [citado 2018 sep 2] ;167 :276-283Available in: hhttps://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852414008748 Chen G, Wang B, Han D, et al. Molecular mechanisms of the coordination between astaxanthin and fatty acid biosynthesis in Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae) Plant J. [Internet]. 2015 [citado 2019 marz 10] ; 81(1):95-107 Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25353310 Zhengquan G, Yan L, Guanxun W, et al. Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis: Astaxanthin Induction by Salicylic Acid (SA) and Jasmonic Acid (JA). PLoS One [Internet]. 2015 [citado 2018 sep 3] ; 10(10) Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4979887/ Hernández KJ, Pérez ME,Romo CJ, Alcatran LA,Hurtado LA. Condiciones de producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis: Revisión bibliográfica 2003-2013. Rev Mex Cienc Farm [Internet]. 2015 [citado 2017 oct 8]; 46 (1): 7-16. Available in: http://www.redalyc.org/pdf/579/57946147002.pdf Régnier P, Bastias J, Rodriguez-Ruiz V, et al. astaxanthin from Haematococcus pluvialis Prevents Oxidative Stress on Human Endothelial Cells without Toxicity. Mar drugs [Internet].2015 [citado 2018 abril 19]; 13(5): 2857–2874 Available in https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4446609/ Zhang Z, Wang B, Hu Q, et al. A new paradigm for producing astaxanthin from the unicellular green alga Haematococcus pluvialis. Biotechnology and Bioengineering [Internet]. 2016 [citado 2019 marz 29]; 3(10):2088-99 Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27563850 Pan-utai W, Parakulsuksatid P and Phomkaivon N. Effect of inducing agents on growth and astaxanthin production in Haematococcus pluvialis: Organic and inorganic. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology [Internet].2017. [citado 2019 marz 25]; (12) 152-158 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1878818117304619#bib16 Castillo CM,Rivera FC,Díaz AG. Evaluation of Cell Growth Conditions for the astaxanthin Production as and of Haematococcus pluvialis Microalgae. Evaluación de las condiciones de crecimiento celular para la producción de astaxantina a partir de la microalga Haematococcus pluvialis. Bogotá: Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca; [Internet] 2017 [citado 2019 ener 19]. Available in: http://www.scielo.org.co/pdf/nova/v15n28/1794-2470-nova-15-28-00019.pdf Sun H, Liu B, Lu X, Cheng KW, Chen F Anonymous Staged cultivation enhances biomass accumulation in the green growth phase of Haematococcus pluvialis.Bioresour Technol.[Internet] 2017 [citado 2018 mar 30]233:326-331. Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28285225 Bangxiang He, Lulu Hou, Manman Dong, et al.Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis: astaxanthin Induction by High Light with Acetate and Fe2. Int. J. Mol. Sci [Internet] 2018 [citado 2018 mar 30]; 19(1) 175 Available in:http://www.mdpi.com/1422-0067/19/1/175 Sheng B, Fan F, Huang J, et al. Investigation on models for light distribution of Haematococcus pluvialis during astaxanthin accumulation stage with an application case. Algal Research [Internet] 2018 [citado 2018 sep 4]; 33: 182-189 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2211926417311761 Christian D, Zhang J, Sawdon AJ, et al. Enhanced astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis using high carbon dioxide concentration and light illumination. Bioresour Technol [Internet] 2018 [citado 2018 sep 4]; 256:548-551 Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29482971 Kathiresan s, Chandrashekar A,Ravishankar G and Sarada R, Regulation of astaxanthin and its intermediates through cloning and genetic transformation of β- carotene ketolase in Haematococcus pluvialis, Journal of Biotechnology [Internet] 2015 [2019 abril 4]; 196–197: 33-41 Available in:: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168165615000152 Constanza L and Muñoz MM. Estrés oxidativo: origen, evolución y consecuencias de la toxicidad del oxígeno. NOVA [Internet] 2012 [citado 2018 abril 24];10 (18) 135- 250 Disponible en:http://www.scielo.org.co/pdf/nova/v10n18/v10n18a08.pdf Solari S, Vilchez J et al. astaxantina: antioxidante de origen natural con variadas aplicaciones en cosmética. Chile: Universidad Arturo Prat; 2011 [citado 2018 mar 30]. Available in: http://www.unap.cl/admision/carreras/pregrado/2012/images/farmacia/papers/2011- B-1.pdf Mercola, Investigación sobre la astaxantina demuestra que tiene beneficios significativos en todo el cuerpo [Internet] 2017 [2019 abril 3] Disponible en: https://articulos.mercola.com/sitios/articulos/archivo/2017/02/20/beneficios-de-la- astanxatina-para-todo-el-cuerpo.aspx Islam M, Gracia F, los antioxidantes para la salud óptima, Rev méd cient [Internet] 2013 [2019 abril 3]; 26(2): 3-9 Disponible en: https://www.revistamedicocientifica.org/index.php/rmc/article/viewFile/371/pdf_54 Mayor R, Estrés Oxidativo y Sistema de Defensa Antioxidante. Rev. Inst. Med. Trop. [Internet] 2010 [citado 2018 abril 24];5(2):23-29 Disponible en:http://scielo.iics.una.py/pdf/imt/v5n2/v5n2a05.pdf López P and Mach N. Efecto del consumo de astaxantina en la salud. Revisión.Rev Esp Nutr Comunitaria [Internet] 2012 [citado 2019 ener 23];18(3):164-177 Disponible en:http://www.renc.es/imagenes/auxiliar/files/RENC%202012- 3_art%206.pdf 38Carranco M, Calvo M and Fernandos G,Carotenoides y su función antioxidante: Revisión. Archivos Latinoamericanos de Nutrición [Internet] 2011 [citado 2019 enero 9];61(3):233-41 Disponible en: https://www.alanrevista.org/ediciones/2011/3/art-1/ carotenoides [Internet] 2012 [2019 abril 3]; Disponible en: http://www.sanutricion.org.ar/files/upload/files/carotenoides.pdf Danxiang H , Yantao L and Qiang H, Astaxanthin in microalgae: pathways, functions and biotechnological implications, Algae [Internet] 2013 [2019 abril 4]; 28(2): 131- 147 Available in: https://www.e-algae.org/upload/pdf/ALGAE_28_2_01.pdf Guerin M, Huntley ME and Olaizola M. Haematococcus astaxanthin: applications for human health and nutrition. Trends in Biotechnology [Internet] 2003 [citado 2018 abril 24]21(5):210-6. Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12727382 Tominaga K,Hongo N,Karato M and Yamashita E, Cosmetic benefits of astaxanthin on humans subjects actabp [Internet] 2012 [2019 abril 3]; 59 (1) 43–47 Available in: http://www.actabp.pl/pdf/1_2012/43.pdf Maquera SL,“EVALUACION DEL EFECTO PIGMENTANTE Y NUTRICIONAL DEL Haematococcus pluvialis COMO BIOAGENTE APLICADO EN LA DIETA DE TRUCHAS EN EL CRIADERO C.E.D.E.PEZ PUNO 2014”. [ tesis para optar el Título Profesional de Químico Farmacéutica ]. AREQUIPA – PERÚ Universidad catolica de Santa Maria 2015[citado 2018 abril 25] Disponible en:https://core.ac.uk/download/pdf/54220179.pdf Ciapara I,Valenzuela L and Goycoolea FM. astaxanthin: A Review of its Chemistry and Applications. Crit Rev Food Sci Nutr.[Internet] 2006 [citado 2018 abril 24];46(2):185-96. Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16431409 García A, Estudio de la producción de astaxantina por Xanthophyllomyces dendrorhous. Universidad de leon. Departamento Biología Molecular [Internet] 2012 [citado 2019 enero 9] Disponible en: https://buleria.unileon.es/bitstream/handle/10612/2144/tesis_1a2340.PDF?sequence= 1 Córdoba NM, Acero NL, Duque LF, Jiménez LJ, Serna JA. Obtención y caracterización de astaxantina de la microalga Haematococcus pluvialis. AGCIENCIA [Internet]. 2015 [citado 2019 marz 29];21:73-82. Disponible en: http://revistas.ugca.edu.co/index.php/ugciencia/article/view/426/729. Meléndez A, Vicario I y Francisco J. Importancia nutricional de los pigmentos carotenoides. Archivos Latinoamericanos de Nutrición [Internet]. 2004 [citado 2019 ene 6];54(2) . Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/262738748_Importancia_nutricional_de_ Meyers, S. P. Papel del carotenoide astaxantina en nutrición de especies acuáticas. [Internet]. 2004 [citado 2019 abril 3]; 473-491. Disponible en: https://www.uanl.mx/utilerias/nutricion_acuicola/IV/archivos/28meyers.pdf Ibañez M producción de astaxantina a partir de la microalga haematococcus pluvialis y evaluación de posibles aplicaciones, XXI Encuentro de Jóvenes Investigadores de la Universidad Nacional del Litoral [Internet] 2017 [2019 abril 3]; 26(2): 3-9 Disponible en: http://bibliotecavirtual.unl.edu.ar:8080/colecciones/xmlui/bitstream/handle/1234567 89/8673/10.2.2.pdf?sequence=1&isAllowed=y Herrera M, Sánchez D, López J,Nuñez A y Moreno O, Extracción de la astaxantina y su estabilidad, Revista Latinoamericana de Recursos Naturales [Internet] 2011 [2019 abril 3]; 7 (1): 21-27 Disponible en: https://www.researchgate.net/profile/Jose_Alberto_Nunez- Gastelum/publication/271707353_Extraccion_de_la_astaxantina_y_su_estabilidad/li nks/54d063c10cf298d656667a43/Extraccion-de-la-astaxantina-y-su-estabilidad.pdf Hernández A and Labbé JI. Microalgas, cultivo y beneficios. Revista de biología marina y oceanografía [Internet] 2014 [citado 2018 agos 4]; 49 (2): 157-173 Available in: https://www.researchgate.net/publication/267629066_Microalgas_cultivo_y_benefic ios Odjadjare EC, Mutanda T and Olaniran AO. Potential biotechnological application of microalgae: a critical review. Critical Reviews in Biotechnology [Internet] 2017 [citado 2018 mar 30]; 3737-52 Available inhttps://www.tandfonline.com/doi/abs/10.3109/07388551.2015.1108956?journalC ode=ibty20 53Miranda A, Efecto de las Bajas Concentraciones de Nitratos y Fosfatos sobre la Acumulación de Astaxantina en Haematococcus pluvialis UTEX 2505 Inf. tecnol. [Internet] 2019 [2019 abril 3]; 30 (1): 23-32Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718- 07642019000100023 Boussiba S. Carotenogenesis in the green alga Haematococcus pluvialis: Cellular physiology and stress response. Physiologia Plantarum [Internet] 2000.[citado 2019 marz 29]; 108: 111–117 Available in: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1034/j.1399-3054.2000.108002111.x Shah M, Liang Y, Cheng JJ, et al. Astaxanthin-Producing Green Microalga Haematococcus pluvialis: From Single Cell to High Value Commercial Products. Frontiers in plant science [Internet] 2016 [citado 2019 ene 12] Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27200009 Ramírez D. Evaluación del crecimiento y producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis en un fotobiorreactor tipo airlift [Tesis presentada para optar el título de Magíster en Ingeniería Química] Bogotá: Universidad Nacional de Colombia ;2013[citado 2017 nov 3]. Available in: http://www.bdigital.unal.edu.co/11205/1/300061.2013.pdf Zhang C, Liu J and Zhang L.Cell cycles and proliferation patterns in Haematococcus pluvialis.Chin J of Ocean Limnol.[Internet] 2017 [citado 2018 abril 24]35 (5) 1205– 12111. Available in:https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00343-017-6103- 8 Fernandez D,Barrera N,Fonseca L y Jaimes L,Aspectos teóricos de la extracción de carotenoides a partir de microalgas, Fundación Universidad de América Semilleros Formación Investigativa [Internet] 2017 [ citado 2019 ene 10]; 3 (1): 35-48. Disponible en :http://repository.uamerica.edu.co/handle/20.500.11839/6436 Benavente J, Montañez C, et al.Tecnología de Cultivo de Microalgas en Fotobiorreactores. Revista cientifica de la universidad autónoma de coahuila. [Internet] 2014 [ citado 2019 marz 29];7(4). Disponible en :https://www.researchgate.net/publication/262560081_Tecnologia_de_Cultivo_de_ Microalgas_en_Fotobiorreactores Bohne F and Linden H. Regulation of carotenoid biosynthesis genes in response to light in Chlamydomonas reinhardtii. Biochimica et biophysica acta [Internet] 2002 [citado 2019 ene 14]; 13;1579(1):26-34. Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12401216 Khanam I and Deb U. Calculation of the Average Irradiance and the Microalgae Growth for a Year at CUET, Bangladesh. American Journal of Computational Mathematics [Internet] 2016 [citado 2018 septiembre 14]; 6(3). Available in:http://www.scirp.org/journal/PaperInformation.aspx?paperID=70402 Bravo F, LeMay V, Jandl R, et al. Managing Forest Ecosystems: The Challenge of Climate Change. Springer Netherlands [Internet] 2008.[citado 2018 septiembre 14].Available: https://www.springer.com/la/book/9781402083426 Albarracin I. Microalgas: potenciales productoras de biodisel. centro de energias [Internet] 2007 [ citado 2018 septiembre 14]. Disponible en: http://www.redalyc.org/pdf/461/46125177011.pdf Granada G, Produccion de astaxantina a partir de microalgas Haematococcus pluvialis, [Tesis de Grado presentada como parte de los requisitos para optar titulo de ingienereia en biotecnología]. udla [Internet] 2015 [citado 2019 ene 25] Disponible en: http://dspace.udla.edu.ec/bitstream/33000/4183/1/UDLA-EC-TIB-2015- 04%28S%29.pdf Mostafa N,Hishamuddin O, Soon G and Suhaimi N.studies on the Genetic Variation of the Green Unicellular Alga Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae) Obtained from Different Geographical Locations Using ISSR and RAPD Molecular Marker, Molecules [Internet] 2011 [2019 abril 3]; 16, 2598-2608 Disponible en: https://www.mdpi.com/1420-3049/16/3/2599/htm Cuantificación clorofila a [Internet] 2015 [2019 abril 3]Disponible en: http://www.cofes.org.ar/descargas/relas/5_jornada/4_CLOROFILA.pdf Masojidek J, Torzillo G and koblizek M, Photosyntesis in Microalgae, Richmond A and Hu Q, Manual de Microalgal Culture: Applied Phycology and Biotechnology, [Internet] 2015 [ citado 2018 septiembre 20]2: 21-736 Available in: https://books.google.com.co/books?id=SM6m4GZ_Ok0C&printsec=frontcover&d q=%20microalgas+de+Amos+Richmond&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjVo9PJx MjdAhWM%20uFMKHVRKAIIQ6AEIKDAA#v=snippet&q=microalgas%20de% 20Amos%20Rich%20mond&f=false Lodish H, Berk A, Matsudaira P at eal, Biología celular y molecular 7ma Edicion, Argentina: Editorial Médica Panamericana, [Internet] 2016 [ citado 2018 septiembre 20]Available in: https://books.google.com.co/books?id=YdyMSxY2LjMC&pg=PA334&dq=clorofil a&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwiCjo2bwMrdAhUQ2FMKHUprBSsQ6AEIMjAC #v=onepage&q=clorofila&f=false Rosas C,“PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS EN LA COLUMNA DE AGUA DETERMINADOS MEDIANTE TÉCNICAS ESPECTROSCÓPICAS Y CROMATOGRÁFICAS (HPLC-RP): VARIABILIDAD ESPACIO-TEMPORAL Y EFECTOS DE RADIACIÓN UV”. [ Tesis de Grado presentada como parte de los requisitos para optar al grado de Licenciado en Ciencias Biológicas. ]. Chile Universidad Austral de Chile [Internet] 2007 [citado 2019 ene 25] Disponible en: http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2007/fcr789p/doc/fcr789p.pdf Camacho J, Lancheros A, Huerfano M, condiciones de cultivo estándar relacionados con la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis, @limentech ciencia y tecnología alimentaria [Internet] 2016 [2019 abril 4]; 14 (1) 70 -80 Disponible en: http://revistas.unipamplona.edu.co/ojs_viceinves/index.php/ALIMEN/article/view/2 127/1265 Hernández E , Aguirre N Y Palacio J. Relación entre la determinación del pigmento Clorofila a y el Biovolumen geométrico algal en un lago de planicie de inundación (Ciénaga de Ayapel, Córdoba-Colombia) Rev. Fac. Ing. Univ. Antioquia [Internet] 2011 [2019 abril 4]; 60 159-169 Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/rfiua/n60/n60a16.pdf Butnariu M, Methods of Analysis (Extraction, Separation, Identification and Quantification) of Carotenoids from Natural Products, Butnariu, J Ecosys Ecograph [Internet] 2016 [2019 abril 4]; 6 (2): 2-19 Disponible en: https://www.omicsonline.org/open-access/methods-of-analysis-extraction- separation-identification-and-quantification-of-carotenoids-from-natural-products- 2157-7625-1000193.php?aid=77160 Vargas M y Ríos S. Producción de ácidos grasos y Astaxantina en H. pluvialis bajo condiciones de, estrés [Proyecto de grado Bacteriología y laboratorio clínico] Bogotá: Universidad Colegio Mayor and de Cundinamarca; 2015[citado 2017 oct 3]. referencia Producción de ácidos grasos y Astaxantina en H. pluvialis bajo condiciones de estrés. Bastidas O,Conteo Celular con Hematocitómetro Uso Elemental del Hematocitómetro, Celeromics [Internet] [citado 2018 abril 30] Disponible en: http://www.celeromics.com/es/resources/docs/Articles/Conteo-Camara- Neubauer.pdf M Halmi, M Shukor, W Johari, MY Shukor. Evaluation of several mathematical models for fitting the growth of the algae Dunaliella tertiolecta. Asian Journal of Plant Biology [Internet] 2014 [citado 2018 abril 7]; 2 (1) 01-06 Available in: https://journal.hibiscuspublisher.com/index.php/AJPB/article/view/81/161 Díaz J, Gómez L, Orozco M, Quiroga N. Efecto de estrés producido por la deficiencia de nitrógenos sobre el crecimiento y producción de astaxantina y la expresión de genes relacionados con la misma en el cultivo de H. pluvialis. [Proyecto de grado Bacteriología y Laboratorio Clínico]. Bogotá: Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca; 2016[citado 2017 oct 3]. Lallana, V.H. y Lallana Ma. del C Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal.[Internet], 2003 [citado 2018 agos 20] Disponible en: http://www.fca.uner.edu.ar/files/academica/deptos/catedras/fisiologiaveg/m_didacti co/manual_practicas/ExtPig_bED.pdf Niño C.; Rodríguez. F. Evaluación de las condiciones de crecimiento celular y factores de estrés para la producción de astaxantina a partir de la microalga Haematococcus pluvialis.(Trabajo de grado para obtener el título de Bacteriología y laboratorio clínico) Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. Bogotá, Colombia. 2015 [ citado 2019 marzo 10] Disponible en: Biblioteca Universidad Colegio Mayor de cundinamarca. Martinez A. Puesta en marcha de un cultivo de microalgas para la eliminación de nutrientes de un agua residual urbana previamente tratada anaeróbicamente.[ Máster Universitario en Ingeniería Hidráulica y Medio Ambiente]Universidad Politécnica de Valencia [Internet] 2011 [citado 2019 marz 22] Disponible en: https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/12831/Ruiz%20Martinez%20Ana%20- %20Tesina%20Fin%20Master%20-%202011.pdf?sequence=1 Beltran J, Guajardo C,Barceló I y López U .Biotratamiento de efluentes secundarios municipales utilizando microalgas: Efecto del pH, nutrientes (C, N y P) y enriquecimiento con CO2. Revista de Biología Marina y Oceanografía [Internet] 2017 [ citado 2019 enero 23] 52 (3): 417-27 Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/pdf/revbiolmar/v52n3/art01.pdf Bustillo A, método para cuantificar suspensiones de esporas de hongos y otros organismos universidad nacional de palmira [Internet] 2010 [2019 abril 3]; Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/277870402_METODO_PARA_CUANTIF ICAR_SUSPENSIONES_DE_ESPORAS_DE_HONGOS_Y_OTROS_ORGANIS MOS Dickerson R, Gray H, Darensbourg M y Darensbourg D. Principios de química, 3era edición,España, Editorial reverte, equilibrio en disolución: ácidos y bases [Internet] 1992 [citado 2019 marz 3] Cap 5 163-208 Disponible en: https://books.google.com.co/books?id=vVt6frGy9mgC&pg=PA190&dq=disociacion +del+acetato+de+sodio+en+agua&hl=es- Viada E, Gómez L, y Reyna I Estrés oxidativo ccm [Internet] 2017.[citado 2019 marz 3]21 (1) ;Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1560-43812017000100014 Ruijuan M, Skye T, Elvis C, Eladl E and et al ,Blue light enhances astaxanthin biosynthesis metabolism and extraction efficiency in Haematococcus pluvialis by inducing haematocyst germination.Algal Research [Internet] 2018 [ citado 2019 feb 26]35; 215-222 Available in: : https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S221192641830328X Rio M. Producción de astaxantina por la microalga Haematococcus pluvialis en cultivo continuo, Universidad de sevilla [Internet] 2007 [citado 2019 marz 5] Disponible en: https://dialnet.unirioja.es/servlet/tesis?codigo=138280 La astaxantina natural vs su homólogo sintético XVII Congreso nacional de acuicultura cartagena [Internet] 2019 [citado 2019 enero 23] Disponible en: http://www.mispeces.com/nav/actualidad/reportajes/reportaje/La-astaxantina- natural-vs-su-homlogo-sinttico/#.XKGDytJKjtS Dong K, Durairaj V, Ramasamy P, Jong I at eal. Cell-wall disruption and lipid/astaxanthin extraction from microalgae: Chlorella and Haematococcus Bioresource Technology [Internet] 2016 [ citado 2019 marz 5]199; 300-310 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852415012134?via%3Dihub EFSA Panel on Additives and Products or Substances used in Animal Feed (FEEDAP). Scientific Opinion on the safety and efficacy of synthetic astaxanthin as feed additive for salmon and trout, other fish, ornamental fish, crustaceans and ornamental birds. EFSA Journal [Internet] 2014 [ citado 2019 ene 23] 12(6):3724 Available in: http://www.efsa.europa.eu/en/efsajournal/doc/3724.pdf Fábregas J, Domínguez A, Regueiro M and Maseda A, Otero A.Optimization of culture medium for the continuous cultivation of the microalga Haematococcus pluvialis, Appl Microbiol Biotechnol. [Internet] 2000 [ citado 2019 marz 25 ] ;53(5):530-5.Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10855711 Jeeji N, Beena B and and Shashirekha V. Biology of growth conditions, nutrition and biomass development in Haematococcus pluvialis, Haematococcaceae, Chlorophyceae Phycological Society, India [Internet] 2016 [ citado 2019 marz 7] 46 (2): 20-28 Available in: http://www.phykosindia.com/paper4vol46no2.pdf Hata1 N, Ogbonna1 J, Hasegawa1 Y, Taroda H. Production of astaxanthin by Haematococcus pluvialis in a sequential heterotrophic-photoautotrophic culture Journal of Applied Phycology [Internet] 2001 [ citado 2019 marz 7] 13: 395–402 Available in: https://link.springer.com/article/10.1023/A:1011921329568 Hanan N, Kaid N,Shukor H,Rahman N at eal. Pre-Optimization Conditions for Haematococcus pluvialis Growth. International Journal [Internet] 2013 [ citado 2019 marz 7] 3 (2) 70-73 Available in:http://insightsociety.org/ojaseit/index.php/ijaseit/article/viewFile/307/277 Rammunia M,Ariyadasaa T,.Nimarshana P, and Attalage R. Comparative assessment on the extraction of carotenoids from microalgal sources: Astaxanthin from H. pluvialis and β-carotene from D. salina Food Chemistry [Internet] 2019 [ citado 2019 marz 7] 277; 128-134 Available in:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0308814618318417?via%3Dih ub Moronta, R., Mora, R., y Morales, E. Respuesta de la microalga Chlorella sorokiniana al pH, salinidad y temperatura en condiciones axénicas y no axénicas. Revista de la Facultad de Economía, [Internet] 2006 [citado 2019 marz 25 ] 23(1), 28-43 Disponible en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S0378- 78182006000100003&script=sci_abstract Sun H, Kong Q, Geng Z,Duan L at eal Enhancement of cell biomass and cell activity of astaxanthin-rich Haematococcus pluvialis Bioresource Technology [Internet] 2015 [ citado 2019 marz 9]186; 67-73 Available in:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852415002874?via%3Dih ub Ruijuan Ma, Skye R., Elvis T, Faisal A at eal Gene expression profiling of astaxanthin and fatty acid pathways in Haematococcus pluvialis in response to different LED lighting conditions Bioresour Technol. [Internet] 2018 [ citado 2019 marz 9]250; 591-602 Available in:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852417320989?via%3Dih ub |
| dc.rights.spa.fl_str_mv |
Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019 |
| dc.rights.uri.spa.fl_str_mv |
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ |
| dc.rights.accessrights.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/closedAccess |
| dc.rights.creativecommons.spa.fl_str_mv |
Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) |
| dc.rights.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/access_right/c_14cb |
| rights_invalid_str_mv |
Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019 https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) http://purl.org/coar/access_right/c_14cb |
| eu_rights_str_mv |
closedAccess |
| dc.format.extent.spa.fl_str_mv |
137p. |
| dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv |
application/pdf |
| dc.publisher.spa.fl_str_mv |
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca |
| dc.publisher.faculty.spa.fl_str_mv |
Facultad de Ciencias de la Salud |
| dc.publisher.place.spa.fl_str_mv |
Bogotá DC |
| dc.publisher.program.spa.fl_str_mv |
Bacteriología y Laboratorio Clínico |
| institution |
Colegio Mayor de Cundinamarca |
| bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/1/Efecto%20de%20los%20factores%20de%20estr%c3%a9s%20acetato%20de%20sodio%2c%20alta%20irradianza%20y%20color%20de%20luz%20sobre%20la%20produc.pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/2/IDENTIFICAION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/3/Presentacion%20Trabajo%20de%20Grado.pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/4/license.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/5/Efecto%20de%20los%20factores%20de%20estr%c3%a9s%20acetato%20de%20sodio%2c%20alta%20irradianza%20y%20color%20de%20luz%20sobre%20la%20produc.pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/7/IDENTIFICAION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/9/Presentacion%20Trabajo%20de%20Grado.pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/6/Efecto%20de%20los%20factores%20de%20estr%c3%a9s%20acetato%20de%20sodio%2c%20alta%20irradianza%20y%20color%20de%20luz%20sobre%20la%20produc.pdf.jpg https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/8/IDENTIFICAION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdf.jpg https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/10/Presentacion%20Trabajo%20de%20Grado.pdf.jpg |
| bitstream.checksum.fl_str_mv |
5ea2de0284b89ca96c3db190e5d2ca00 052848f7e7d2f0b66333e8fc3a07ec3e dcca96a863cbab092383ef901a937bee 2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7a 023bcebcd093d3ca378d3bd6bb2df39d 63b64eff98493cf749daf612a5bd63cd 98d219189e44f8308382d0c37b67efb1 8dec5fadb9fc7b13e567eab48ac0771b 896505f46b39a967ede1376b190ef846 26f3fcc42980cbc19dffda18c8bd3f2d |
| bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 |
| repository.name.fl_str_mv |
Biblioteca Digital Unicolmayor |
| repository.mail.fl_str_mv |
repositorio@unicolmayor.edu.co |
| _version_ |
1812210035896352768 |
| spelling |
Camacho Kurmen, Judith Elena88ec3d87924bea44fb175e7780652267Cuero Amú, Kelin Johana12042d3417f38610c52e5b4b9694f17dDomínguez Castillo, Jayveri Astrid411aa294abaf46f42b8bb10aa765710aEspitia Sánchez, Karen Danitzaa9e2c792803e930424577f1f04102d61Fuentes Cañón, Laura Andreaab5df088b8e8d362fa532c3815a0d2f02021-11-12T21:48:21Z2021-11-12T21:48:21Z2019https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/365460050H. pluvialis es una microalga productora de astaxantina, carotenoide, utilizado en la industria pecuaria, alimentaria y nutracéutica, es por ello que propone determinar las condiciones adecuadas para su producción. Se realizó el cultivo en medios Rudic’s medium (RM) y Bold’s basal medium (BBM), suplementados con concentraciones de acetato de sodio de 0.248 mg/mL, 0.310 mg/mL, 0.372 mg/mL, luz blanca y azul con una irradianza de 150 μE m-2 s -1 , con CO2 al 5%, agitación con burbujeo, temperatura 20oC ± 2oC, fotoperiodo 20:4 Luz / Oscuridad y pH 6.8. Posteriormente, se realizó el recuento de biomasa y la evaluación morfológica en hemocitómetro. La cuantificación de clorofila y astaxantina se realiz por espectrofotometría. Se obtuvo un crecimiento en el medio BBM, de 3.80x104 cel/ml, sin diferencias significativas con el medio RM (F:0.7871; P:0.376; GL:2). La biomasa a los 30 días fue de 2.49x105 cel/mL y 1.55x105 cel/mL en medio BBM y RM respectivamente. Se obtuvo una mayor concentración de astaxantina en el medio RM (5.06μg/mL) significativamente más eficiente para la producción (F=52.74;P=<0.0001;GL=1), en el cual se utilizó una concentración a 0.372 mg/mL de acetato de sodio, luz azul e irradianza 150 μE m−2 s −1 como factores de estrés. En cuanto la clorofila, se obtuvieron 29.45μg/mL al utilizar luz azul, alta irradianza y 0.310mg/mL de acetato de sodio en medio RM. La morfología observada fue vegetativa, palmella y enquistante (aplanóspora). Se concluye que la luz azul, el acetato de sodio a 0.372 mg/mL y alta irradianza inducen una mayor síntesis de astaxantina por H. pluvialis.TÍTULO 1 RESUMEN 1 INTRODUCCIÓN 2 OBJETIVOS 4 Objetivo general 4 Objetivos específicos 4 MARCO TEÓRICO Y ANTECEDENTES 5 ANTECEDENTES 5 MARCO TEÓRICO 20 Estrés oxidativo 20 Antioxidantes 20 ASTAXANTINA 21 Haematococcus pluvialis 26 CLOROFILA 33 DISEÑO METODOLÓGICO 36 GENERALIDADES 36 METODOLOGÍA 37 Fase 1 37 Fase 2 41 Fase 3 41 Análisis estadístico 43 RESULTADOS 43 Cinética de crecimiento y acumulación final de biomasa 43 Cambios morfológicos presentados durante el estudio 50 Observación macroscópica de los cultivos de H. pluvialis en BBM y RM bajo condiciones de estrés 53 Producción de astaxantina y clorofila 57 Astaxantina y clorofila en el medio BBM 58 Astaxantina y clorofila en el medio RM 61 DISCUSIÓN 69 CONCLUSIONES 78 RECOMENDACIONES 79 PARTICIPACIÓN EN EVENTOS 79 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 80PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico137p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá DCBacteriología y Laboratorio ClínicoDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbEfecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialisTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionNguyen KD. Astaxanthin: A Comparative Case of Synthetic VS. Natural Production. Chemical and Biomolecular Engineering [Internet]. 2013 [citado 2018 agosto 20]; Available in: https://www.researchgate.net/publication/305150785_Astaxanthin_a_comparati ve_case_of_synthetic_vs_natural_productionCamacho JE, González G, Klotz B. Producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis bajo diferentes condiciones de estrés. NOVA [Internet]. 2013 [citado 2017 oct 7];11(19):94-103 Disponible en:http://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/nova/article/view/1022/1019Ambati RR, Phang SM, Ravi S, et al. astaxanthin: sources, extraction, stability, biological activities and its commercial applications--a review. Mar drugs [Internet]. 2014[citado 2018 abril 19];12(1), 128-152 Available in: http://www.mdpi.com/1660- 3397/12/1/128/htmFernández J, Oterino AG, Alonso GG, Flores JA y Turrado JP. Presencia de Haematococcus pluvialis (Flotow, 1844) en la provincia de Zamora (Haematococcaceae). Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol. [Internet] 2015 [citado 2018 abril 23]; 149, 101-107. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0167779903000787Martínez S. Evaluación del crecimiento celular y de los pigmentos obtenidos de la microalga Haematococcus pluvialis (CHLOROPHYTA: VOLVOCALES) cultivada en diferentes medios.[Trabajo de grado de para obtener el titulo de doctora en tecnología avanzada] [Internet] 2011 Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y Tecnología Avanzada. Instituto Politécnico Nacional., México, D.F., págs. 103. [citado 2018 Abril 19] Disponible en: http://tesis.ipn.mx/bitstream/handle/123456789/8226/EVALCREC.pdf?sequence=1.Kiperstok AC,Sebestyén P, Podola B, Melkonian M.Biofilm cultivation of Haematococcus pluvialis enables a highly productive one-phase process for astaxanthin production using high light intensities. Algal Research [Internet] 2017 [citado 2018 abril 24]; 213-222 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S221192641630594XMakio K, Toshihide K and Shiro N. Enhanced Carotenoid Biosynthesis by Oxidative Stress in Acetate-Induced Cyst Cells of a Green Unicellular Alga, Haematococcus pluvialis Appl Environ Microbiol [Internet] 1993 [citado 2018 abril 24];59(3): 867– 73. Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC202201/Orosa M, Valero JF, Herrero C, et al. Comparison of the accumulation of astaxanthin in Haematococcus pluvialis and other green microalgae under N-starvation and high light conditions. Biotechnology Letters [Internet].2001 [citado 2018 abril 22];23 (13), 1079-85 Available in: https://link.springer.com/article/10.1023%2FA%3A1010510508384Steinbrenner J and Linden H. Regulation of Two Carotenoid Biosynthesis Genes Coding for Phytoene Synthase and Carotenoid Hydroxylase during Stress-Induced astaxanthin Formation in the Green Alga Haematococcus pluvialis. Planta Physio [Internet].2001 [citado 2018 abril 22];125 (2): 810 - 17 Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC64882/Sarada R, Tripathi U and Ravishankar GA. Influence of stress on astaxanthin production in Haematococcus pluvialis grown under different culture conditions. Process Biochemistry [Internet].2002 [citado 2018 abril 22];37 (6): 623-27 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0032959201002461Orosa M, Franqueira D, Cid A and Abalde J. Analysis and enhancement of astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis. Bioresource Technology [Internet].2005 [citado 2018 abr 2]; (96) 373–378 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852404001476Jeon Y, Cho C and Yun Y. Combined effects of light intensity and acetate concentration on the growth of unicellular microalga Haematococcus pluvialis. Enzyme and Microbial Technology [Internet].2006 [citado 2018 marz 29]; (39) 490–495 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141022906001098?via%3Dihu bImamoglu E, Vardar F and Conk M.. Effect of different culture media and light intensities on growth of Haematococcus pluvialis. International Journal of Natural and Engineering Sciences [Internet]. 2007 [citado 2018 abril 22]; 1 (3): 05-09 Available in: https://www.researchgate.net/publication/284261435_Effect_of_different_culture_ media_and_light_intensities_on_growth_of_Haematococcus_pluvialisVidhyavathi, Venkatachalam and Sarada. Regulation of carotenoid biosynthetic genes expression and carotenoid accumulation in the green alga Haematococcus pluvialis under nutrient stress conditions. J Exp Bot [Internet].2008 [citado 2019 marz 25];59(6):1409-18. Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18343887Imamoglu E, Dalay MC and Sukan FV. Influences of different stress media and high light intensities on accumulation of astaxanthin in the green alga Haematococcus pluvialis.New Biotechnology [Internet]. 2009 [citado 2018 abril 22]; 26 (3): 199- 204 Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19712763Su Y, Wang J, Shi M, et al. Metabolomic and network analysis of astaxanthin- producing Haematococcus pluvialis under various stress conditions. Bioresource technology [Internet]. 2014 [citado 2019 marz 10]; 26 170:522-529 Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25164345Chekanov K, Lobakova E, Selyakh I, et al. Accumulation of astaxanthin by a new Haematococcus pluvialis strain BM1 from the white sea coastal rocks (Russia). Marine drugs [Internet]. 2014 [citado 2018 sep 4]; 12(8):4504-20. Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25196836Dong, Huang, Zhang, et al. Four different methods comparison for extraction of astaxanthin from green alga Haematococcus pluvialis.The Scientific World Journal [Internet]. 2014 [citado 2018 sep 4]; 7 Available in: https://www.hindawi.com/journals/tswj/2014/694305/Wan, Zhang, Hou, et al. The effect of temperature on cell growth and astaxanthin accumulation of Haematococcus pluvialis during a light–dark cyclic cultivation. Bioresource Technology [Internet]. 2014 [citado 2018 sep 2] ;167 :276-283Available in: hhttps://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852414008748Chen G, Wang B, Han D, et al. Molecular mechanisms of the coordination between astaxanthin and fatty acid biosynthesis in Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae) Plant J. [Internet]. 2015 [citado 2019 marz 10] ; 81(1):95-107 Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25353310Zhengquan G, Yan L, Guanxun W, et al. Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis: Astaxanthin Induction by Salicylic Acid (SA) and Jasmonic Acid (JA). PLoS One [Internet]. 2015 [citado 2018 sep 3] ; 10(10) Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4979887/Hernández KJ, Pérez ME,Romo CJ, Alcatran LA,Hurtado LA. Condiciones de producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis: Revisión bibliográfica 2003-2013. Rev Mex Cienc Farm [Internet]. 2015 [citado 2017 oct 8]; 46 (1): 7-16. Available in: http://www.redalyc.org/pdf/579/57946147002.pdfRégnier P, Bastias J, Rodriguez-Ruiz V, et al. astaxanthin from Haematococcus pluvialis Prevents Oxidative Stress on Human Endothelial Cells without Toxicity. Mar drugs [Internet].2015 [citado 2018 abril 19]; 13(5): 2857–2874 Available in https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4446609/Zhang Z, Wang B, Hu Q, et al. A new paradigm for producing astaxanthin from the unicellular green alga Haematococcus pluvialis. Biotechnology and Bioengineering [Internet]. 2016 [citado 2019 marz 29]; 3(10):2088-99 Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27563850Pan-utai W, Parakulsuksatid P and Phomkaivon N. Effect of inducing agents on growth and astaxanthin production in Haematococcus pluvialis: Organic and inorganic. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology [Internet].2017. [citado 2019 marz 25]; (12) 152-158 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1878818117304619#bib16Castillo CM,Rivera FC,Díaz AG. Evaluation of Cell Growth Conditions for the astaxanthin Production as and of Haematococcus pluvialis Microalgae. Evaluación de las condiciones de crecimiento celular para la producción de astaxantina a partir de la microalga Haematococcus pluvialis. Bogotá: Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca; [Internet] 2017 [citado 2019 ener 19]. Available in: http://www.scielo.org.co/pdf/nova/v15n28/1794-2470-nova-15-28-00019.pdfSun H, Liu B, Lu X, Cheng KW, Chen F Anonymous Staged cultivation enhances biomass accumulation in the green growth phase of Haematococcus pluvialis.Bioresour Technol.[Internet] 2017 [citado 2018 mar 30]233:326-331. Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28285225Bangxiang He, Lulu Hou, Manman Dong, et al.Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis: astaxanthin Induction by High Light with Acetate and Fe2. Int. J. Mol. Sci [Internet] 2018 [citado 2018 mar 30]; 19(1) 175 Available in:http://www.mdpi.com/1422-0067/19/1/175Sheng B, Fan F, Huang J, et al. Investigation on models for light distribution of Haematococcus pluvialis during astaxanthin accumulation stage with an application case. Algal Research [Internet] 2018 [citado 2018 sep 4]; 33: 182-189 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2211926417311761Christian D, Zhang J, Sawdon AJ, et al. Enhanced astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis using high carbon dioxide concentration and light illumination. Bioresour Technol [Internet] 2018 [citado 2018 sep 4]; 256:548-551 Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29482971Kathiresan s, Chandrashekar A,Ravishankar G and Sarada R, Regulation of astaxanthin and its intermediates through cloning and genetic transformation of β- carotene ketolase in Haematococcus pluvialis, Journal of Biotechnology [Internet] 2015 [2019 abril 4]; 196–197: 33-41 Available in:: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168165615000152Constanza L and Muñoz MM. Estrés oxidativo: origen, evolución y consecuencias de la toxicidad del oxígeno. NOVA [Internet] 2012 [citado 2018 abril 24];10 (18) 135- 250 Disponible en:http://www.scielo.org.co/pdf/nova/v10n18/v10n18a08.pdfSolari S, Vilchez J et al. astaxantina: antioxidante de origen natural con variadas aplicaciones en cosmética. Chile: Universidad Arturo Prat; 2011 [citado 2018 mar 30]. Available in: http://www.unap.cl/admision/carreras/pregrado/2012/images/farmacia/papers/2011- B-1.pdfMercola, Investigación sobre la astaxantina demuestra que tiene beneficios significativos en todo el cuerpo [Internet] 2017 [2019 abril 3] Disponible en: https://articulos.mercola.com/sitios/articulos/archivo/2017/02/20/beneficios-de-la- astanxatina-para-todo-el-cuerpo.aspxIslam M, Gracia F, los antioxidantes para la salud óptima, Rev méd cient [Internet] 2013 [2019 abril 3]; 26(2): 3-9 Disponible en: https://www.revistamedicocientifica.org/index.php/rmc/article/viewFile/371/pdf_54Mayor R, Estrés Oxidativo y Sistema de Defensa Antioxidante. Rev. Inst. Med. Trop. [Internet] 2010 [citado 2018 abril 24];5(2):23-29 Disponible en:http://scielo.iics.una.py/pdf/imt/v5n2/v5n2a05.pdfLópez P and Mach N. Efecto del consumo de astaxantina en la salud. Revisión.Rev Esp Nutr Comunitaria [Internet] 2012 [citado 2019 ener 23];18(3):164-177 Disponible en:http://www.renc.es/imagenes/auxiliar/files/RENC%202012- 3_art%206.pdf38Carranco M, Calvo M and Fernandos G,Carotenoides y su función antioxidante: Revisión. Archivos Latinoamericanos de Nutrición [Internet] 2011 [citado 2019 enero 9];61(3):233-41 Disponible en: https://www.alanrevista.org/ediciones/2011/3/art-1/carotenoides [Internet] 2012 [2019 abril 3]; Disponible en: http://www.sanutricion.org.ar/files/upload/files/carotenoides.pdfDanxiang H , Yantao L and Qiang H, Astaxanthin in microalgae: pathways, functions and biotechnological implications, Algae [Internet] 2013 [2019 abril 4]; 28(2): 131- 147 Available in: https://www.e-algae.org/upload/pdf/ALGAE_28_2_01.pdfGuerin M, Huntley ME and Olaizola M. Haematococcus astaxanthin: applications for human health and nutrition. Trends in Biotechnology [Internet] 2003 [citado 2018 abril 24]21(5):210-6. Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12727382Tominaga K,Hongo N,Karato M and Yamashita E, Cosmetic benefits of astaxanthin on humans subjects actabp [Internet] 2012 [2019 abril 3]; 59 (1) 43–47 Available in: http://www.actabp.pl/pdf/1_2012/43.pdfMaquera SL,“EVALUACION DEL EFECTO PIGMENTANTE Y NUTRICIONAL DEL Haematococcus pluvialis COMO BIOAGENTE APLICADO EN LA DIETA DE TRUCHAS EN EL CRIADERO C.E.D.E.PEZ PUNO 2014”. [ tesis para optar el Título Profesional de Químico Farmacéutica ]. AREQUIPA – PERÚ Universidad catolica de Santa Maria 2015[citado 2018 abril 25] Disponible en:https://core.ac.uk/download/pdf/54220179.pdfCiapara I,Valenzuela L and Goycoolea FM. astaxanthin: A Review of its Chemistry and Applications. Crit Rev Food Sci Nutr.[Internet] 2006 [citado 2018 abril 24];46(2):185-96. Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16431409García A, Estudio de la producción de astaxantina por Xanthophyllomyces dendrorhous. Universidad de leon. Departamento Biología Molecular [Internet] 2012 [citado 2019 enero 9] Disponible en: https://buleria.unileon.es/bitstream/handle/10612/2144/tesis_1a2340.PDF?sequence= 1Córdoba NM, Acero NL, Duque LF, Jiménez LJ, Serna JA. Obtención y caracterización de astaxantina de la microalga Haematococcus pluvialis. AGCIENCIA [Internet]. 2015 [citado 2019 marz 29];21:73-82. Disponible en: http://revistas.ugca.edu.co/index.php/ugciencia/article/view/426/729.Meléndez A, Vicario I y Francisco J. Importancia nutricional de los pigmentos carotenoides. Archivos Latinoamericanos de Nutrición [Internet]. 2004 [citado 2019 ene 6];54(2) . Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/262738748_Importancia_nutricional_de_Meyers, S. P. Papel del carotenoide astaxantina en nutrición de especies acuáticas. [Internet]. 2004 [citado 2019 abril 3]; 473-491. Disponible en: https://www.uanl.mx/utilerias/nutricion_acuicola/IV/archivos/28meyers.pdfIbañez M producción de astaxantina a partir de la microalga haematococcus pluvialis y evaluación de posibles aplicaciones, XXI Encuentro de Jóvenes Investigadores de la Universidad Nacional del Litoral [Internet] 2017 [2019 abril 3]; 26(2): 3-9 Disponible en: http://bibliotecavirtual.unl.edu.ar:8080/colecciones/xmlui/bitstream/handle/1234567 89/8673/10.2.2.pdf?sequence=1&isAllowed=yHerrera M, Sánchez D, López J,Nuñez A y Moreno O, Extracción de la astaxantina y su estabilidad, Revista Latinoamericana de Recursos Naturales [Internet] 2011 [2019 abril 3]; 7 (1): 21-27 Disponible en: https://www.researchgate.net/profile/Jose_Alberto_Nunez- Gastelum/publication/271707353_Extraccion_de_la_astaxantina_y_su_estabilidad/li nks/54d063c10cf298d656667a43/Extraccion-de-la-astaxantina-y-su-estabilidad.pdfHernández A and Labbé JI. Microalgas, cultivo y beneficios. Revista de biología marina y oceanografía [Internet] 2014 [citado 2018 agos 4]; 49 (2): 157-173 Available in: https://www.researchgate.net/publication/267629066_Microalgas_cultivo_y_benefic iosOdjadjare EC, Mutanda T and Olaniran AO. Potential biotechnological application of microalgae: a critical review. Critical Reviews in Biotechnology [Internet] 2017 [citado 2018 mar 30]; 3737-52 Available inhttps://www.tandfonline.com/doi/abs/10.3109/07388551.2015.1108956?journalC ode=ibty2053Miranda A, Efecto de las Bajas Concentraciones de Nitratos y Fosfatos sobre la Acumulación de Astaxantina en Haematococcus pluvialis UTEX 2505 Inf. tecnol. [Internet] 2019 [2019 abril 3]; 30 (1): 23-32Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718- 07642019000100023Boussiba S. Carotenogenesis in the green alga Haematococcus pluvialis: Cellular physiology and stress response. Physiologia Plantarum [Internet] 2000.[citado 2019 marz 29]; 108: 111–117 Available in: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1034/j.1399-3054.2000.108002111.xShah M, Liang Y, Cheng JJ, et al. Astaxanthin-Producing Green Microalga Haematococcus pluvialis: From Single Cell to High Value Commercial Products. Frontiers in plant science [Internet] 2016 [citado 2019 ene 12] Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27200009Ramírez D. Evaluación del crecimiento y producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis en un fotobiorreactor tipo airlift [Tesis presentada para optar el título de Magíster en Ingeniería Química] Bogotá: Universidad Nacional de Colombia ;2013[citado 2017 nov 3]. Available in: http://www.bdigital.unal.edu.co/11205/1/300061.2013.pdfZhang C, Liu J and Zhang L.Cell cycles and proliferation patterns in Haematococcus pluvialis.Chin J of Ocean Limnol.[Internet] 2017 [citado 2018 abril 24]35 (5) 1205– 12111. Available in:https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00343-017-6103- 8Fernandez D,Barrera N,Fonseca L y Jaimes L,Aspectos teóricos de la extracción de carotenoides a partir de microalgas, Fundación Universidad de América Semilleros Formación Investigativa [Internet] 2017 [ citado 2019 ene 10]; 3 (1): 35-48. Disponible en :http://repository.uamerica.edu.co/handle/20.500.11839/6436Benavente J, Montañez C, et al.Tecnología de Cultivo de Microalgas en Fotobiorreactores. Revista cientifica de la universidad autónoma de coahuila. [Internet] 2014 [ citado 2019 marz 29];7(4). Disponible en :https://www.researchgate.net/publication/262560081_Tecnologia_de_Cultivo_de_ Microalgas_en_FotobiorreactoresBohne F and Linden H. Regulation of carotenoid biosynthesis genes in response to light in Chlamydomonas reinhardtii. Biochimica et biophysica acta [Internet] 2002 [citado 2019 ene 14]; 13;1579(1):26-34. Available in:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12401216Khanam I and Deb U. Calculation of the Average Irradiance and the Microalgae Growth for a Year at CUET, Bangladesh. American Journal of Computational Mathematics [Internet] 2016 [citado 2018 septiembre 14]; 6(3). Available in:http://www.scirp.org/journal/PaperInformation.aspx?paperID=70402Bravo F, LeMay V, Jandl R, et al. Managing Forest Ecosystems: The Challenge of Climate Change. Springer Netherlands [Internet] 2008.[citado 2018 septiembre 14].Available: https://www.springer.com/la/book/9781402083426Albarracin I. Microalgas: potenciales productoras de biodisel. centro de energias [Internet] 2007 [ citado 2018 septiembre 14]. Disponible en: http://www.redalyc.org/pdf/461/46125177011.pdfGranada G, Produccion de astaxantina a partir de microalgas Haematococcus pluvialis, [Tesis de Grado presentada como parte de los requisitos para optar titulo de ingienereia en biotecnología]. udla [Internet] 2015 [citado 2019 ene 25] Disponible en: http://dspace.udla.edu.ec/bitstream/33000/4183/1/UDLA-EC-TIB-2015- 04%28S%29.pdfMostafa N,Hishamuddin O, Soon G and Suhaimi N.studies on the Genetic Variation of the Green Unicellular Alga Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae) Obtained from Different Geographical Locations Using ISSR and RAPD Molecular Marker, Molecules [Internet] 2011 [2019 abril 3]; 16, 2598-2608 Disponible en: https://www.mdpi.com/1420-3049/16/3/2599/htmCuantificación clorofila a [Internet] 2015 [2019 abril 3]Disponible en: http://www.cofes.org.ar/descargas/relas/5_jornada/4_CLOROFILA.pdfMasojidek J, Torzillo G and koblizek M, Photosyntesis in Microalgae, Richmond A and Hu Q, Manual de Microalgal Culture: Applied Phycology and Biotechnology, [Internet] 2015 [ citado 2018 septiembre 20]2: 21-736 Available in: https://books.google.com.co/books?id=SM6m4GZ_Ok0C&printsec=frontcover&d q=%20microalgas+de+Amos+Richmond&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjVo9PJx MjdAhWM%20uFMKHVRKAIIQ6AEIKDAA#v=snippet&q=microalgas%20de% 20Amos%20Rich%20mond&f=falseLodish H, Berk A, Matsudaira P at eal, Biología celular y molecular 7ma Edicion, Argentina: Editorial Médica Panamericana, [Internet] 2016 [ citado 2018 septiembre 20]Available in: https://books.google.com.co/books?id=YdyMSxY2LjMC&pg=PA334&dq=clorofil a&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwiCjo2bwMrdAhUQ2FMKHUprBSsQ6AEIMjAC #v=onepage&q=clorofila&f=falseRosas C,“PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS EN LA COLUMNA DE AGUA DETERMINADOS MEDIANTE TÉCNICAS ESPECTROSCÓPICAS Y CROMATOGRÁFICAS (HPLC-RP): VARIABILIDAD ESPACIO-TEMPORAL Y EFECTOS DE RADIACIÓN UV”. [ Tesis de Grado presentada como parte de los requisitos para optar al grado de Licenciado en Ciencias Biológicas. ]. Chile Universidad Austral de Chile [Internet] 2007 [citado 2019 ene 25] Disponible en: http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2007/fcr789p/doc/fcr789p.pdfCamacho J, Lancheros A, Huerfano M, condiciones de cultivo estándar relacionados con la producción de astaxantina en Haematococcus pluvialis, @limentech ciencia y tecnología alimentaria [Internet] 2016 [2019 abril 4]; 14 (1) 70 -80 Disponible en: http://revistas.unipamplona.edu.co/ojs_viceinves/index.php/ALIMEN/article/view/2 127/1265Hernández E , Aguirre N Y Palacio J. Relación entre la determinación del pigmento Clorofila a y el Biovolumen geométrico algal en un lago de planicie de inundación (Ciénaga de Ayapel, Córdoba-Colombia) Rev. Fac. Ing. Univ. Antioquia [Internet] 2011 [2019 abril 4]; 60 159-169 Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/rfiua/n60/n60a16.pdfButnariu M, Methods of Analysis (Extraction, Separation, Identification and Quantification) of Carotenoids from Natural Products, Butnariu, J Ecosys Ecograph [Internet] 2016 [2019 abril 4]; 6 (2): 2-19 Disponible en: https://www.omicsonline.org/open-access/methods-of-analysis-extraction- separation-identification-and-quantification-of-carotenoids-from-natural-products- 2157-7625-1000193.php?aid=77160Vargas M y Ríos S. Producción de ácidos grasos y Astaxantina en H. pluvialis bajo condiciones de, estrés [Proyecto de grado Bacteriología y laboratorio clínico] Bogotá: Universidad Colegio Mayor and de Cundinamarca; 2015[citado 2017 oct 3]. referencia Producción de ácidos grasos y Astaxantina en H. pluvialis bajo condiciones de estrés.Bastidas O,Conteo Celular con Hematocitómetro Uso Elemental del Hematocitómetro, Celeromics [Internet] [citado 2018 abril 30] Disponible en: http://www.celeromics.com/es/resources/docs/Articles/Conteo-Camara- Neubauer.pdfM Halmi, M Shukor, W Johari, MY Shukor. Evaluation of several mathematical models for fitting the growth of the algae Dunaliella tertiolecta. Asian Journal of Plant Biology [Internet] 2014 [citado 2018 abril 7]; 2 (1) 01-06 Available in: https://journal.hibiscuspublisher.com/index.php/AJPB/article/view/81/161Díaz J, Gómez L, Orozco M, Quiroga N. Efecto de estrés producido por la deficiencia de nitrógenos sobre el crecimiento y producción de astaxantina y la expresión de genes relacionados con la misma en el cultivo de H. pluvialis. [Proyecto de grado Bacteriología y Laboratorio Clínico]. Bogotá: Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca; 2016[citado 2017 oct 3].Lallana, V.H. y Lallana Ma. del C Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal.[Internet], 2003 [citado 2018 agos 20] Disponible en: http://www.fca.uner.edu.ar/files/academica/deptos/catedras/fisiologiaveg/m_didacti co/manual_practicas/ExtPig_bED.pdfNiño C.; Rodríguez. F. Evaluación de las condiciones de crecimiento celular y factores de estrés para la producción de astaxantina a partir de la microalga Haematococcus pluvialis.(Trabajo de grado para obtener el título de Bacteriología y laboratorio clínico) Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. Bogotá, Colombia. 2015 [ citado 2019 marzo 10] Disponible en: Biblioteca Universidad Colegio Mayor de cundinamarca.Martinez A. Puesta en marcha de un cultivo de microalgas para la eliminación de nutrientes de un agua residual urbana previamente tratada anaeróbicamente.[ Máster Universitario en Ingeniería Hidráulica y Medio Ambiente]Universidad Politécnica de Valencia [Internet] 2011 [citado 2019 marz 22] Disponible en: https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/12831/Ruiz%20Martinez%20Ana%20- %20Tesina%20Fin%20Master%20-%202011.pdf?sequence=1Beltran J, Guajardo C,Barceló I y López U .Biotratamiento de efluentes secundarios municipales utilizando microalgas: Efecto del pH, nutrientes (C, N y P) y enriquecimiento con CO2. Revista de Biología Marina y Oceanografía [Internet] 2017 [ citado 2019 enero 23] 52 (3): 417-27 Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/pdf/revbiolmar/v52n3/art01.pdfBustillo A, método para cuantificar suspensiones de esporas de hongos y otros organismos universidad nacional de palmira [Internet] 2010 [2019 abril 3]; Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/277870402_METODO_PARA_CUANTIF ICAR_SUSPENSIONES_DE_ESPORAS_DE_HONGOS_Y_OTROS_ORGANIS MOSDickerson R, Gray H, Darensbourg M y Darensbourg D. Principios de química, 3era edición,España, Editorial reverte, equilibrio en disolución: ácidos y bases [Internet] 1992 [citado 2019 marz 3] Cap 5 163-208 Disponible en: https://books.google.com.co/books?id=vVt6frGy9mgC&pg=PA190&dq=disociacion +del+acetato+de+sodio+en+agua&hl=es-Viada E, Gómez L, y Reyna I Estrés oxidativo ccm [Internet] 2017.[citado 2019 marz 3]21 (1) ;Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1560-43812017000100014Ruijuan M, Skye T, Elvis C, Eladl E and et al ,Blue light enhances astaxanthin biosynthesis metabolism and extraction efficiency in Haematococcus pluvialis by inducing haematocyst germination.Algal Research [Internet] 2018 [ citado 2019 feb 26]35; 215-222 Available in: : https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S221192641830328XRio M. Producción de astaxantina por la microalga Haematococcus pluvialis en cultivo continuo, Universidad de sevilla [Internet] 2007 [citado 2019 marz 5] Disponible en: https://dialnet.unirioja.es/servlet/tesis?codigo=138280La astaxantina natural vs su homólogo sintético XVII Congreso nacional de acuicultura cartagena [Internet] 2019 [citado 2019 enero 23] Disponible en: http://www.mispeces.com/nav/actualidad/reportajes/reportaje/La-astaxantina- natural-vs-su-homlogo-sinttico/#.XKGDytJKjtSDong K, Durairaj V, Ramasamy P, Jong I at eal. Cell-wall disruption and lipid/astaxanthin extraction from microalgae: Chlorella and Haematococcus Bioresource Technology [Internet] 2016 [ citado 2019 marz 5]199; 300-310 Available in: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852415012134?via%3DihubEFSA Panel on Additives and Products or Substances used in Animal Feed (FEEDAP). Scientific Opinion on the safety and efficacy of synthetic astaxanthin as feed additive for salmon and trout, other fish, ornamental fish, crustaceans and ornamental birds. EFSA Journal [Internet] 2014 [ citado 2019 ene 23] 12(6):3724 Available in: http://www.efsa.europa.eu/en/efsajournal/doc/3724.pdfFábregas J, Domínguez A, Regueiro M and Maseda A, Otero A.Optimization of culture medium for the continuous cultivation of the microalga Haematococcus pluvialis, Appl Microbiol Biotechnol. [Internet] 2000 [ citado 2019 marz 25 ] ;53(5):530-5.Available in: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10855711Jeeji N, Beena B and and Shashirekha V. Biology of growth conditions, nutrition and biomass development in Haematococcus pluvialis, Haematococcaceae, Chlorophyceae Phycological Society, India [Internet] 2016 [ citado 2019 marz 7] 46 (2): 20-28 Available in: http://www.phykosindia.com/paper4vol46no2.pdfHata1 N, Ogbonna1 J, Hasegawa1 Y, Taroda H. Production of astaxanthin by Haematococcus pluvialis in a sequential heterotrophic-photoautotrophic culture Journal of Applied Phycology [Internet] 2001 [ citado 2019 marz 7] 13: 395–402 Available in: https://link.springer.com/article/10.1023/A:1011921329568Hanan N, Kaid N,Shukor H,Rahman N at eal. Pre-Optimization Conditions for Haematococcus pluvialis Growth. International Journal [Internet] 2013 [ citado 2019 marz 7] 3 (2) 70-73 Available in:http://insightsociety.org/ojaseit/index.php/ijaseit/article/viewFile/307/277Rammunia M,Ariyadasaa T,.Nimarshana P, and Attalage R. Comparative assessment on the extraction of carotenoids from microalgal sources: Astaxanthin from H. pluvialis and β-carotene from D. salina Food Chemistry [Internet] 2019 [ citado 2019 marz 7] 277; 128-134 Available in:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0308814618318417?via%3Dih ubMoronta, R., Mora, R., y Morales, E. Respuesta de la microalga Chlorella sorokiniana al pH, salinidad y temperatura en condiciones axénicas y no axénicas. Revista de la Facultad de Economía, [Internet] 2006 [citado 2019 marz 25 ] 23(1), 28-43 Disponible en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S0378- 78182006000100003&script=sci_abstractSun H, Kong Q, Geng Z,Duan L at eal Enhancement of cell biomass and cell activity of astaxanthin-rich Haematococcus pluvialis Bioresource Technology [Internet] 2015 [ citado 2019 marz 9]186; 67-73 Available in:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852415002874?via%3Dih ubRuijuan Ma, Skye R., Elvis T, Faisal A at eal Gene expression profiling of astaxanthin and fatty acid pathways in Haematococcus pluvialis in response to different LED lighting conditions Bioresour Technol. [Internet] 2018 [ citado 2019 marz 9]250; 591-602 Available in:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852417320989?via%3Dih ubluces de coloresestrés salinomicroalgafactores de estréscarotenoideORIGINALEfecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la produc.pdfEfecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la produc.pdfapplication/pdf3236381https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/1/Efecto%20de%20los%20factores%20de%20estr%c3%a9s%20acetato%20de%20sodio%2c%20alta%20irradianza%20y%20color%20de%20luz%20sobre%20la%20produc.pdf5ea2de0284b89ca96c3db190e5d2ca00MD51open accessIDENTIFICAION TRABAJO DE GRADO.pdfIDENTIFICAION TRABAJO DE GRADO.pdfapplication/pdf936946https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/2/IDENTIFICAION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdf052848f7e7d2f0b66333e8fc3a07ec3eMD52metadata only accessPresentacion Trabajo de Grado.pdfPresentacion Trabajo de Grado.pdfapplication/pdf4399108https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/3/Presentacion%20Trabajo%20de%20Grado.pdfdcca96a863cbab092383ef901a937beeMD53open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814828https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/4/license.txt2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7aMD54open accessTEXTEfecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la produc.pdf.txtEfecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la produc.pdf.txtExtracted texttext/plain186901https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/5/Efecto%20de%20los%20factores%20de%20estr%c3%a9s%20acetato%20de%20sodio%2c%20alta%20irradianza%20y%20color%20de%20luz%20sobre%20la%20produc.pdf.txt023bcebcd093d3ca378d3bd6bb2df39dMD55open accessIDENTIFICAION TRABAJO DE GRADO.pdf.txtIDENTIFICAION TRABAJO DE GRADO.pdf.txtExtracted texttext/plain652https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/7/IDENTIFICAION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdf.txt63b64eff98493cf749daf612a5bd63cdMD57metadata only accessPresentacion Trabajo de Grado.pdf.txtPresentacion Trabajo de Grado.pdf.txtExtracted texttext/plain47767https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/9/Presentacion%20Trabajo%20de%20Grado.pdf.txt98d219189e44f8308382d0c37b67efb1MD59open accessTHUMBNAILEfecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la produc.pdf.jpgEfecto de los factores de estrés acetato de sodio, alta irradianza y color de luz sobre la produc.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg6314https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/6/Efecto%20de%20los%20factores%20de%20estr%c3%a9s%20acetato%20de%20sodio%2c%20alta%20irradianza%20y%20color%20de%20luz%20sobre%20la%20produc.pdf.jpg8dec5fadb9fc7b13e567eab48ac0771bMD56open accessIDENTIFICAION TRABAJO DE GRADO.pdf.jpgIDENTIFICAION TRABAJO DE GRADO.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg6488https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/8/IDENTIFICAION%20TRABAJO%20DE%20GRADO.pdf.jpg896505f46b39a967ede1376b190ef846MD58metadata only accessPresentacion Trabajo de Grado.pdf.jpgPresentacion Trabajo de Grado.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg9628https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3654/10/Presentacion%20Trabajo%20de%20Grado.pdf.jpg26f3fcc42980cbc19dffda18c8bd3f2dMD510open accessunicolmayor/3654oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/36542021-11-13 03:00:38.777An error occurred on the license name.|||https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/open accessBiblioteca Digital Unicolmayorrepositorio@unicolmayor.edu.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 |