Evaluación de la capacidad fijadora de nitrógeno de Rizobacterias nativas de bosque Altoandino de Usme para uso en restauración ecológica
En este trabajo se aislaron 33 rizobacterias en los medios específicos ASHBY, NFB y JMV, a partir de suelo de Bosque Altoandino de Usme, con el fin de evaluar su capacidad fijadora de nitrógeno y su aporte al crecimiento de especies vegetales nativas de este ecosistema. Se caracterizaron morfológica...
- Autores:
-
Gómez Avendaño, Gabriela
González Pérez, Diego Fernando
Hernández Vega, Johana Cristina
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2018
- Institución:
- Colegio Mayor de Cundinamarca
- Repositorio:
- Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
- Idioma:
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- OAI Identifier:
- oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3594
- Acceso en línea:
- https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3594
- Palabra clave:
- ASHBY
Nitrógeno
Berthelot
Enterobacter
Rizobacterias
Restauración ecológica
Enzima nitrogenasa
Ácido Indol Acético
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- closedAccess
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- Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018
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En este trabajo se aislaron 33 rizobacterias en los medios específicos ASHBY, NFB y JMV, a partir de suelo de Bosque Altoandino de Usme, con el fin de evaluar su capacidad fijadora de nitrógeno y su aporte al crecimiento de especies vegetales nativas de este ecosistema. Se caracterizaron morfológicamente y se determinó la producción de Ácido Indol Acético (AIA) y amonio, mediante el método de Salkowski y el método colorimétrico de Berthelot, respectivamente. Todas las rizobacterias aisladas evidenciaron producción de AIA entre 3.37 y 11.87 ug/mL y de amonio entre 0,37 y 7,99 ug/mL. Se seleccionaron las 5 rizobacterias con mayor actividad, se usaron en la producción de bioinóculos y se identificaron como Serratia marcescens, Serratia liquefaciens, Enterobacter cloacae, Enterobacter sakazakii y Klebsiella oxytoca. Los bioinóculos simples se aplicaron a plántulas de las especies vegetales nativas Escallonia paniculata y Vallea stipularis, para establecer su efecto en la promoción del crecimiento vegetal, mediante el análisis de los parámetros de altura, número de hojas y grosor. Para la primera especie se encontró que la diferencia en el crecimiento de las plantas inoculadas frente a las plantas control fue estadísticamente significativa al día 90 (P= 0,001), siendo Enterobacter sakazakii y Klebsiella oxytoca las más efectivas. Para Vallea stipularis durante el tiempo de seguimiento se observaron diferencias frente a los controles, pero estas no fueron estadísticamente significativas (P=0,65). Por lo cual se pudo concluir que el crecimiento de plantas usadas en restauración ecológica puede ser apoyado con el uso de rizobacterias fijadoras de nitrógeno |
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Rodriguez, Carolina Jaime5e21fd1b6ce4807cf2e1ab21a543a2e1Camacho Kurmen, Judith Elena88ec3d87924bea44fb175e7780652267Gómez Avendaño, Gabriela13b4781f058d558eadc12425d2ba0addGonzález Pérez, Diego Fernandof4eac072d172f52b3b74c1bd4b43e575Hernández Vega, Johana Cristina2d006be30daf31206d634ad0102691782021-11-04T18:56:43Z2021-11-04T18:56:43Z2018-05-31https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3594En este trabajo se aislaron 33 rizobacterias en los medios específicos ASHBY, NFB y JMV, a partir de suelo de Bosque Altoandino de Usme, con el fin de evaluar su capacidad fijadora de nitrógeno y su aporte al crecimiento de especies vegetales nativas de este ecosistema. Se caracterizaron morfológicamente y se determinó la producción de Ácido Indol Acético (AIA) y amonio, mediante el método de Salkowski y el método colorimétrico de Berthelot, respectivamente. Todas las rizobacterias aisladas evidenciaron producción de AIA entre 3.37 y 11.87 ug/mL y de amonio entre 0,37 y 7,99 ug/mL. Se seleccionaron las 5 rizobacterias con mayor actividad, se usaron en la producción de bioinóculos y se identificaron como Serratia marcescens, Serratia liquefaciens, Enterobacter cloacae, Enterobacter sakazakii y Klebsiella oxytoca. Los bioinóculos simples se aplicaron a plántulas de las especies vegetales nativas Escallonia paniculata y Vallea stipularis, para establecer su efecto en la promoción del crecimiento vegetal, mediante el análisis de los parámetros de altura, número de hojas y grosor. Para la primera especie se encontró que la diferencia en el crecimiento de las plantas inoculadas frente a las plantas control fue estadísticamente significativa al día 90 (P= 0,001), siendo Enterobacter sakazakii y Klebsiella oxytoca las más efectivas. Para Vallea stipularis durante el tiempo de seguimiento se observaron diferencias frente a los controles, pero estas no fueron estadísticamente significativas (P=0,65). Por lo cual se pudo concluir que el crecimiento de plantas usadas en restauración ecológica puede ser apoyado con el uso de rizobacterias fijadoras de nitrógenoÍNDICE DE FIGURAS 8 ÍNDICE DE TABLAS 10 LISTA DE ANEXOS 11 RESUMEN 12 1. INTRODUCCIÓN 13 2. OBJETIVOS 15 2.1 OBJETIVO GENERAL 15 2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 15 3. ANTECEDENTES 16 4. MARCO TEÓRICO 25 4.1 EL BOSQUE ALTOANDINO COLOMBIANO 25 4.2 ÁRBOLES NATIVOS DE BOSQUE ALTOANDINO EMPLEADOS EN RESTAURACIÓNECOLÓGICA 26 4.2.1 Vallea stipularis 27 4.2.2 Escallonia paniculata 28 4.3 RESTAURACIÓN ECOLÓGICA 29 4.3.1 Restauración pasiva y activa 30 4.3.2 Disturbio 30 4.3.3 Proceso de restauración ecológica 31 4.3.4 Empleo de bacterias en restauración ecológica 31 4.4 BACTERIAS EN LA PROMOCIÓN DE CRECIMIENTO VEGETAL 32 4.4.1 Mecanismos directos 32 4.4.2 Mecanismos indirectos 33 4.5 CICLO BIOGEOQUÍMICO DEL NITRÓGENO 34 4.5.1 Importancia del nitrógeno 34 4.5.2 Ciclo del nitrógeno 34 4.5.3 Mineralización 36 4.5.4 Absorción 36 4.5.5 Desnitrificación 36 4.6 FIJACIÓN BIOLÓGICA DEL NITRÓGENO 37 4.6.1 Proceso bioquímico en la fijación biológica de nitrógeno 37 4.6.2 Estrategias de protección frente al oxígeno 38 4.7 MÉTODOS DE EVALUACIÓN DE LA FIJACIÓN DE NITRÓGENO Y PRODUCCIÓN DE ÁCIDO INDOL ACÉTICO (AIA) 38 4.7.1 Cuantificación de nitrógeno in vitro 38 4.7.2 Cuantificación de ácido indol acético (AIA) 39 4.8 MICROORGANISMOS FIJADORES DE NITRÓGENO 41 4.8.1 Microorganismos de vida libre 41 4.8.2 Bacterias simbióticas fijadoras de nitrógeno 42 4.9 BIOINÓCULOS 42 5. DISEÑO METODOLÓGICO 45 5.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN 45 5.2 UNIVERSO, POBLACIÓN, MUESTRA 45 5.2.1 Universo 45 5.2.2 Población 45 5.2.3 Muestra 45 5.3 HIPÒTESIS, VARIABLE, INDICADORES 45 5.4 FASE I. DETERMINACIÓN DE RIZOBACTERIAS CON CAPACIDAD FIJADORAS DE NITRÓGENO 46 5.4.1 Recolección de muestras y preparación 46 5.4.2 Aislamiento en medios selectivos para rizobacterias Fijadoras de nitrógeno 47 5.5 FASE II. SELECCIÓN DE RIZOBACTERIAS CON MAYOR POTENCIAL FIJADOR DE NITRÓGENO IN VITRO 48 5.5.1 Cuantificación de ácido indol acético (AIA) 48 5.5.2 Cuantificación de nitrógeno fijado in vitro 49 5.5.3 Identificación presuntiva de rizobacterias fijadoras de nitrógeno 50 5.6 FASE III. ESTABLECIMIENTO DEL APORTE DE LAS BACTERIAS AL CRECIMIENTO DE LAS ESPECIES VEGETALES 51 5.6.1 Preparación de bioinóculos 51 5.6.2 Ensayos de crecimiento vegetal 51 5.6.3 Análisis estadístico 53 6. RESULTADOS 54 6.1 AISLAMIENTO EN MEDIOS SELECTIVOS PARA RIZOBACTERIAS FIJADORAS DE NITRÓGENO 54 6.2 CUANTIFICACIÓN DE ÁCIDO INDOL ACÉTICO (AIA) 65 6.3 CUANTIFICACIÓN DE NITRÓGENO FIJADO IN VITRO (PRODUCCIÓN DE IÓN AMONIO) 67 6.4 PREPARACIÓN DE BIONÓCULOS 68 6.5 IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA DE RIZOBACTERIA FIJADORAS DE NITRÓGENO 70 6.6 ENSAYOS DE CRECIMIENTO VEGETAL 70 6.6.1 Altura, número de hojas y grosor de Escallonia paniculata 73 6.6.2 Altura, número de hojas y grosor de Vallea stipularis 75 6.6.3 Monitoreo cualitativo del establecimiento bacteriano en vivero 76 7. DISCUSIÓN 79 8. CONCLUSIONES 86 9. RECOMENDACIONES 87 REFERENCIAS 88 ANEXOS 94PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico103p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.CBacteriología y Laboratorio ClínicoUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbEvaluación de la capacidad fijadora de nitrógeno de Rizobacterias nativas de bosque Altoandino de Usme para uso en restauración ecológicaTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionShrimant Shridhar B. Review: Nitrogen Fixing Microorganisms. Revista internacional de investigación microbiológica (Internet). 2012. 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