Caracterización de esferoides multicelulares de líneas de cáncer de ovario OVCAR-3 y MES-OV con fibroblastos MRC-5

A nivel mundial, el cáncer de ovario es el octavo cáncer más común en las mujeres y representó 296.956 muertes por cáncer en el año 2022. El cáncer de ovario es una enfermedad muy heterogénea e, incluso entre el tipo más común, es decir, el cáncer de ovario epitelial, de naturaleza agresiva y de opc...

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Autores:: Tamayo Montañez, Ana Maria

Tipo de recurso:: Trabajo de grado de pregrado

Fecha de publicación:: 2024

Institución:: Colegio Mayor de Cundinamarca

Repositorio:: Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca

Idioma:: spa

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description	A nivel mundial, el cáncer de ovario es el octavo cáncer más común en las mujeres y representó 296.956 muertes por cáncer en el año 2022. El cáncer de ovario es una enfermedad muy heterogénea e, incluso entre el tipo más común, es decir, el cáncer de ovario epitelial, de naturaleza agresiva y de opciones de tratamiento limitadas. Recientemente se ha descrito la significativa influencia del microambiente tumoral en la progresión de este cáncer, particularmente el rol de los fibroblastos. Los fibroblastos asociados al cáncer hacen parte de este microambiente tumoral y tienen funciones secretoras y de generación de la matriz extracelular, lo cual contribuye al crecimiento invasión y metástasis. Entender los mecanismos moleculares y celulares que subyacen a los efectos mediados por los fibroblastos asociados a tumor en el cáncer de ovario es importante para plantear posibles estrategias terapéuticas. Los modelos de cultivo tridimensionales han sido usados para estudio del microambiente tumoral, sin embargo, en anteriores proyectos de investigación se presenta un efecto dependiente de concentración de fibroblastos sobre la formación de cultivos multicelulares con líneas de cáncer. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la relación de fibroblastos MRC-5 y células tumorales OVCAR-3 y MES-OV sobre la formación del cultivo 3D. Se generaron esferoides en proporciones 1:1, 1:2, 1:3, 2:1, 3:1 de células tumorales versus fibroblastos MRC- 5, posteriormente se evaluaron las características morfológicas (área, diámetro, circularidad, organización celular y compactación) y expresión de proteínas α-SMA, vimentina y E- cadherina. Se evidencio disminución de área y diámetro, aumento de circularidad y compactación, con una presentación de mayor homogeneidad y densidad celular, en concentraciones mayores de fibroblastos MRC-5. Se identificó disminución en la expresión E- cadherina y aumento de vimetina, determinando variación de efecto sobre los modelos 3D esferoides según concentración de células tumorales OVCAR-3 y MES-OV.
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Entender los mecanismos moleculares y celulares que subyacen a los efectos mediados por los fibroblastos asociados a tumor en el cáncer de ovario es importante para plantear posibles estrategias terapéuticas. Los modelos de cultivo tridimensionales han sido usados para estudio del microambiente tumoral, sin embargo, en anteriores proyectos de investigación se presenta un efecto dependiente de concentración de fibroblastos sobre la formación de cultivos multicelulares con líneas de cáncer. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la relación de fibroblastos MRC-5 y células tumorales OVCAR-3 y MES-OV sobre la formación del cultivo 3D. Se generaron esferoides en proporciones 1:1, 1:2, 1:3, 2:1, 3:1 de células tumorales versus fibroblastos MRC- 5, posteriormente se evaluaron las características morfológicas (área, diámetro, circularidad, organización celular y compactación) y expresión de proteínas α-SMA, vimentina y E- cadherina. Se evidencio disminución de área y diámetro, aumento de circularidad y compactación, con una presentación de mayor homogeneidad y densidad celular, en concentraciones mayores de fibroblastos MRC-5. Se identificó disminución en la expresión E- cadherina y aumento de vimetina, determinando variación de efecto sobre los modelos 3D esferoides según concentración de células tumorales OVCAR-3 y MES-OV.RESUMEN INTRODUCCIÓN 1 ANTECEDENTES 2 PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN 3 JUSTIFICACIÓN 4 OBJETIVOS 4.1 Objetivo general 4.2 Objetivos específicos 5 MARCO REFERENCIAL 5.1 Biología del cáncer 5.2 Cáncer de ovario 5.3 Esferoides y organoides: 5.4 Microambiente tumoral 5.5 Fibroblastos 5.6 Fenotipo Transición Epitelio Mesénquima 6 DISEÑO METODOLÓGICO 6.1 Universo 6.2 Población 6.3 Muestra 6.4 Hipótesis 6.5 Variables 6.6 Indicadores 6.7 Técnicas y procedimientos 6.7.1 Líneas celulares y condiciones de cultivo 6.7.2 Generación de Esferoides 6.7.3 Medición área, diámetro y circularidad de los esferoides 6.7.4 Fijación en formaldehido y cortes de parafina 6.7.5 Inmunohistoquímica 6.7.6 Análisis estadístico 7 RESULTADOS 7.1 Área, circularidad y diámetro de esferoides multicelulares de líneas de cáncer de ovario OVCAR-3 o MES-OV con diferente relación de fibroblastos MRC-5 7.2 Organización celular en los esferoides multicelular de cáncer de ovario OVCAR-3 y MES-OV con diferente relación de fibroblastos MRC-5. 7.3 Expresión de proteínas de unión celular de los esferoides multicelulares de las líneas celulares de cáncer de ovario OVCAR-3 y MES-OV con diferente relación de fibroblastos MRC-5 8 DISCUSION 9 CONCLUSIONES REFERENCIAS 10 ANEXOSPregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico62p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBacteriología y Laboratorio ClínicoDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2024https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbCaracterización de esferoides multicelulares de líneas de cáncer de ovario OVCAR-3 y MES-OV con fibroblastos MRC-5Trabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionHuerta Sáenz I. 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Caracterización de esferoides multicelulares de líneas de cáncer de ovario OVCAR-3 y MES-OV con fibroblastos MRC-5

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