Evaluación de la susceptibilidad de klebsiella Pneumoniae Atcc 13883 y Klebsiella Pneumoniae Atcc 700603 a la Ciprofloxacina en función de su fase de crecimiento

La determinación in vitro de susceptibilidad antimicrobiana a diferentes moléculas actualmente se realiza indistintamente en las fases de la cinética de crecimiento, aunque en cada una de ellas el microorganismo tiene una serie de cambios en su metabolismo y desarrollo, lo que muy seguramente podría...

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Autores:
Valencia Salguero, Jessica Tatiana
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2018
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3715
Acceso en línea:
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3715
Palabra clave:
In vitro
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Klebsiella pneumoniae
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closedAccess
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Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018
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description La determinación in vitro de susceptibilidad antimicrobiana a diferentes moléculas actualmente se realiza indistintamente en las fases de la cinética de crecimiento, aunque en cada una de ellas el microorganismo tiene una serie de cambios en su metabolismo y desarrollo, lo que muy seguramente podría inducir una respuesta diferente a los antimicrobianos. Por lo anteriormente descrito, en este trabajo se evaluó la susceptibilidad de las cepas Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 y Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 en cada una de las fases de la cinética de crecimiento, frente a la ciprofloxacina como molécula antibacteriana modelo, con el propósito de determinar si hay diferencia en la concentración inhibitoria mínima (CIM) y concentración bactericida mínima (CBM), dependiendo de la fase de crecimiento bacteriano en la cual se realice la determinación. Con esta finalidad se realizó la caracterización morfológica macroscópica de las colonias de cada cepa en estudio, luego se determinó la cinética de crecimiento y mediante la utilización de técnicas de viabilidad se evidenció que la fase en donde hay mayor población bacteriana viable es al final de la fase exponencial en la fase estacionaria. Finalmente se realizó la prueba de susceptibilidad a la ciprofloxacina de las cepas estudiadas, para determinar la CIM y CBM en las fases de latencia, exponencial y estacionaria. Se encontró que la susceptibilidad varía según la fase de la cinética de crecimiento bacteriano en donde se realice la determinación y de la condición en la que se lleve a cabo el estudio.
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spelling Hernández Rojas, Edith del Carmen691add7415cca2135c3de6050313997bRosas Perez, Jaiver Eduardo26cfa49df2758d5233e600609ff18723Vega Chaparro, Sandra Clarissa90752087fa9aec606f4d9c5617a6bfa8Valencia Salguero, Jessica Tatianaa09e70b2a23a7f3d516af455befa94552021-11-23T20:50:18Z2021-11-23T20:50:18Z2018-06-01https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/371558420La determinación in vitro de susceptibilidad antimicrobiana a diferentes moléculas actualmente se realiza indistintamente en las fases de la cinética de crecimiento, aunque en cada una de ellas el microorganismo tiene una serie de cambios en su metabolismo y desarrollo, lo que muy seguramente podría inducir una respuesta diferente a los antimicrobianos. Por lo anteriormente descrito, en este trabajo se evaluó la susceptibilidad de las cepas Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 y Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 en cada una de las fases de la cinética de crecimiento, frente a la ciprofloxacina como molécula antibacteriana modelo, con el propósito de determinar si hay diferencia en la concentración inhibitoria mínima (CIM) y concentración bactericida mínima (CBM), dependiendo de la fase de crecimiento bacteriano en la cual se realice la determinación. Con esta finalidad se realizó la caracterización morfológica macroscópica de las colonias de cada cepa en estudio, luego se determinó la cinética de crecimiento y mediante la utilización de técnicas de viabilidad se evidenció que la fase en donde hay mayor población bacteriana viable es al final de la fase exponencial en la fase estacionaria. Finalmente se realizó la prueba de susceptibilidad a la ciprofloxacina de las cepas estudiadas, para determinar la CIM y CBM en las fases de latencia, exponencial y estacionaria. Se encontró que la susceptibilidad varía según la fase de la cinética de crecimiento bacteriano en donde se realice la determinación y de la condición en la que se lleve a cabo el estudio.RESUMEN 11 INTRODUCCIÓN 13 OBJETIVOS 16 1. ANTECEDENTES 17 2. MARCO TEÓRICO 22 2.1. GÉNERO Klebsiella 22 2.1.1. Características generales y clasificación 22 2.1.2. Epidemiología 22 2.1.3. Factores de patogenicidad y virulencia 23 2.1.4. Identificación del género Klebsiella 24 2.2. Klebsiella pneumoniae 27 2.2.1. Epidemiología 27 2.2.2. Patogenicidad 28 2.3. CEPAS ATCC 29 2.3.1. Cepas de Klebsiella pneumoniae ATCC 29 2.4. CINÉTICA DE CRECIMIENTO BACTERIANO 30 2.4.1. Fases de la cinética de crecimiento 31 2.5. TÉCNICAS DE VIABILIDAD 32 2.5.1. Recuento en placa 32 2.5.2. Azul de tripán 33 2.6. INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCIÓN EN SALUD - IAAS 34 2.7. RESISTENCIA BACTERIANA 34 2.7.1. Resistencia de Klebsiella pneumoniae 36 2.8. ANTIBIÓTICOS UTILIZADOS EN INFECCIONES POR Klebsiella pneumoniae 37 2.8.2. Ciprofloxacina 38 2.9. MÉTODOS DE DILUCIÓN 39 2.9.2. CIM y CBM 39 3. DISEÑO METODOLÓGICO 41 3.1. TÉCNICAS Y PROCEDIMIENTOS 41 3.1.1. Activación de las cepas ATCC 41 3.1.2. Características macroscópicas de las colonias 41 3.1.3. Coloración de Gram 42 3.1.4. Criopreservación de las cepas ATCC 42 3.1.5. Determinación de la cinética de crecimiento en tubo 42 3.1.6. Determinación de la cinética de crecimiento en placa 43 3.1.7. Ensayo preliminar para evaluar viabilidad bacteriana 45 3.1.8. Técnica de plaqueo manual 45 3.1.9. Viabilidad con azul de tripán 46 3.1.10. Determinación de CIM con ciprofloxacina 48 3.1.11. Determinación de la CBM con la ciprofloxacina 50 4. RESULTADOS 52 4.1. ACTIVACIÓN DE LAS CEPAS ATCC 52 4.2. CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS DE LAS COLONIAS 52 4.2.1. Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 52 4.2.2. Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 53 4.3. COLORACIÓN DE GRAM 54 4.4. CRIOPRESERVACIÓN DE LAS CEPAS ATCC 54 4.5. DETERMINACIÓN DE LA CINÉTICA DE CRECIMIENTO EN TUBO 55 4.5.1. Ensayo utilizando 100 o 300 μl de inóculo durante 12 horas de incubación 55 4.5.2. Ensayo utilizando 100 o 300 μl de inóculo durante 12 horas de incubación, para determinar el tiempo de la fase de latencia y exponencial de cada cepa 56 4.5.3. Cinética de crecimiento en tubo realizando la lectura de la placa con y sin tapa 57 4.6. DETERMINACIÓN DE LA CINÉTICA DE CRECIMIENTO EN PLACA 58 4.6.1. Ensayo utilizando 100 0 300 μl de inóculo durante 12 horas de incubación en placa 58 4.6.2. Variación leyendo la placa con y sin tapa 59 4.6.3. Cinética de crecimiento durante 12 horas de incubación en placa, para determinar el tiempo de la fase de latencia y exponencial de cada cepa 60 4.6.4. Cinética de crecimiento durante 24 horas de incubación en placa 61 4.6.5. Cinética de crecimiento durante 36 horas de incubación en placa 62 4.7. VIABILIDAD BACTERIANA 63 4.7.1. Ensayo preliminar 63 4.7.2. Ensayo de plaqueo bacteriano 64 4.7.3. Ensayo de viabilidad con azul de tripán 67 4.8. DETERMINACIÓN DE LA CIM UTILIZANDO CIPROFLOXACINA 69 4.8.1. Determinación de la CIM en placa 69 4.8.2. Determinación de la CIM en tubo 70 4.9. DETERMINACIÓN DE LA CBM UTILIZANDO CIPROFLOXACINA 71 4.9.1. Determinación de la CBM en placa 71 4.9.2. Determinación de la CBM en tubo 72 5. DISCUSIÓN 75 6. CONCLUSIONES 82 7. REFERENCIAS 84PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico99p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.CBacteriología y Laboratorio ClínicoDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbEvaluación de la susceptibilidad de klebsiella Pneumoniae Atcc 13883 y Klebsiella Pneumoniae Atcc 700603 a la Ciprofloxacina en función de su fase de crecimientoTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionOMS. Carga mundial de infecciones asociadas a la atención sanitaria [Internet]. WHO. 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