Producción de anticuerpos monoclonales para la identificación de células presentadoras de antígeno de monos aotus spp
La Fundación Instituto de Inmunología de Colombia – FIDIC ha diseñado y producido candidatos a vacuna contra la malaria químicamente sintetizados, que han llegado a ser probados en monos Aotus vociferans; La COLFAVAC24 fue la última combinación de péptidos vacúnales que se probó, mostrando una prote...
- Autores:
-
Cruz Castro, Julián Mauricio
Díaz Barrera, María José
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2019
- Institución:
- Colegio Mayor de Cundinamarca
- Repositorio:
- Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
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- Acceso en línea:
- https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/310
- Palabra clave:
- Antígenos
Bacteriología
Tolerancia inmunológica
Sistema inmunitario
Agentes infecciosos
Respuesta inmune
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- Derechos Reservados -Universidad Colegio Myor de Cundinamarca ,2019
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La Fundación Instituto de Inmunología de Colombia – FIDIC ha diseñado y producido candidatos a vacuna contra la malaria químicamente sintetizados, que han llegado a ser probados en monos Aotus vociferans; La COLFAVAC24 fue la última combinación de péptidos vacúnales que se probó, mostrando una protección del 81,7% en los primates inmunizados y posteriormente retados con la cepa FVO de Plasmodium falciparum. Sin embargo, con el objetivo de lograr un índice de protección mayor, se requiere aún más entendimiento sobre la activación de Linfocitos T por las células presentadoras de antígeno; ya que dependiendo de la subpoblación que fagocita el péptido sintético, la respuesta generada variará; por ejemplo, las células dendríticas de tipo mieloide tienen la capacidad de secretar citoquinas que logran potenciar la activación de células T ayudadoras, bien sea de tipo 1 y tipo 2, mientras que las células dendríticas foliculares y plasmocitoides presentan el péptido a las células B para diferenciarlas en células plasmáticas productoras de anticuerpos. Se establece entonces la necesidad de entender los mecanismos inmunológicos que ocurren en la presentación y procesamiento de antígeno a cargo de las células especializadas presentadoras de antígeno, especialmente las células dendríticas para posteriormente lograr caracterizar la activación de las células T vírgenes, hasta llegar a células T efectoras y de memoria de larga vida. |
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Díaz Arévalo, Diana4b9a1ebb1633a8c2defe6148569778fcHernández Rojas, Edith Del Carmenbca0adf32f76bf23e6eef2dd4eaa979cCruz Castro, Julián Mauricio3dd3f44a6ca00c7d307c1df89b722a5fDíaz Barrera, María Joséee52bf89ad2b15bd243544d1c4b32df8Universidad Colegio Mayor de CundinamarcaTrabajo de grado2021-06-30T20:57:12Z2021-06-30T20:57:12Z2019-10https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/31060188La Fundación Instituto de Inmunología de Colombia – FIDIC ha diseñado y producido candidatos a vacuna contra la malaria químicamente sintetizados, que han llegado a ser probados en monos Aotus vociferans; La COLFAVAC24 fue la última combinación de péptidos vacúnales que se probó, mostrando una protección del 81,7% en los primates inmunizados y posteriormente retados con la cepa FVO de Plasmodium falciparum. Sin embargo, con el objetivo de lograr un índice de protección mayor, se requiere aún más entendimiento sobre la activación de Linfocitos T por las células presentadoras de antígeno; ya que dependiendo de la subpoblación que fagocita el péptido sintético, la respuesta generada variará; por ejemplo, las células dendríticas de tipo mieloide tienen la capacidad de secretar citoquinas que logran potenciar la activación de células T ayudadoras, bien sea de tipo 1 y tipo 2, mientras que las células dendríticas foliculares y plasmocitoides presentan el péptido a las células B para diferenciarlas en células plasmáticas productoras de anticuerpos. Se establece entonces la necesidad de entender los mecanismos inmunológicos que ocurren en la presentación y procesamiento de antígeno a cargo de las células especializadas presentadoras de antígeno, especialmente las células dendríticas para posteriormente lograr caracterizar la activación de las células T vírgenes, hasta llegar a células T efectoras y de memoria de larga vida.1. Introducción 10 2. Objetivos 12 2.1 General 12 2.2 Específicos 12 3. Antecedentes 13 4. Marco teórico 19 4.1 Sistema Inmunitario y respuesta inmune 19 4.2 Células presentadoras de antígeno 21 4.2.1 Tipos de células presentadoras de antígeno 23 4.2.1.1 Monocito 23 4.2.1.2 Células B 24 4.2.1.3 Células dendríticas (DCs) 25 4.2.1.3.1 Células dendríticas convencionales (cDCs) 27 4.2.1.3.2 Células dendríticas plasmocitoides (pDCs) 28 4.3 Captura y procesamiento del antígeno 29 4.3.1 Captura del antígeno 29 4.3.2 Procesamiento del antígeno 30 4.3.2.1 Presentación a través de la vía clásica 31 4.3.2.2 Presentación a través de la vía no clásica (familia CD1) 32 4.4 Aotus como modelo animal 32 4.5 Producción de anticuerpos monoclonales 34 4.6 Normatividad y condiciones éticas en murinos 36 4.6.1 Estamentos normativos y éticos 38 5. Diseño metodológico 38 5.1 Universo, población y muestra 38 5.2 Técnicas y procedimientos 39 5.2.1 Predicción in silico de secuencias peptídicas 40 5.2.2 Síntesis de las secuencias peptídicas 41 5.2.3 Protocolo de Inmunización de ratones 42 5.2.4 Obtención de los esplenocitos 43 5.2.5 Valoración de la inmunogenicidad por ELISA 44 5.2.6 Producción del hibridoma 45 5.2.7 Obtención de células dendríticas 46 5.2.8 Inmunofluorescencia indirecta 47 6. Resultados 49 6.1 Predicción “in silico” 49 6. 2 Evaluación de la inmunogenicidad de los ratones 55 6.3 Fusión celular 57 6.4 Evaluación de inmunogenicidad de los clonos 58 6.5 Cultivo de células dendríticas 60 6.6 Evaluación de la afinidad de los clonos frente a las células 62 7. Discusión 67 8. Conclusiones 73 9. Referencias 74 10. Anexos 81PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista ClínicoTrabajo de grado81p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá, Distrito CapitalBacteriología y Laboratorio ClínicoNo objeto asociado1. Mendis KN, David PH, Carter R. Human immune responses against sexual stages of malaria parasites: Considerations for malaria vaccines. Int J Parasitol. 1990;20(4):497–502.2. Piper KP, Hayward RE, Cox MJ, Day KP. Malaria transmission and naturally acquired immunity to PfEMP-1. Infect Immun. 1999;67(12):6369–74.3. Taylor-robinson AW. Vaccination against malaria: targets, strategies and potentiation of immunity to blood stage parasites. Front Biosci. 2000;(2):16–29.4. Vega Robledo GB. La respuesta Inmune. Medigraphic [Internet]. 2008;51(3):128–9. Available from: http://www.medigraphic.com/pdfs/facmed/un-2008/un083j.pdf5. Castillo LV. Producción de aticuerpos monoclonales. Univ Alcala. 2015;1–12.6. 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