Anticuerpos dirigidos contra péptidos de mycobacterium Tuberculosis y su función efectora en macrófagos y neutrófilos Infectados

Actualmente la tuberculosis es un problema de salud pública. La forma más efectiva para contrarrestar es la vacunación; no obstante, se cuenta con la BCG, una vacuna que no otorga protección a toda la población, ya que solo protege a infantes de las presentaciones severas de la enfermedad. Durante a...

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Autores:
Galeano Orjuela, Daniela Alejandra
Gómez Camargo, Juan Sebastián
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2022
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/5685
Acceso en línea:
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/5685
Palabra clave:
Tuberculosis
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closedAccess
License
Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2022
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description Actualmente la tuberculosis es un problema de salud pública. La forma más efectiva para contrarrestar es la vacunación; no obstante, se cuenta con la BCG, una vacuna que no otorga protección a toda la población, ya que solo protege a infantes de las presentaciones severas de la enfermedad. Durante años se ha evaluado el papel de la respuesta inmune humoral y celular frente a Mycobacterium tuberculosis (Mtb) para controlar el desarrollo de la enfermedad. Se conoce que los anticuerpos presentan funciones efectoras que median la respuesta inmune en diferentes patologías; sin embargo, para la tuberculosis no está bien descrita. En este proyecto se planteó el análisis de las funciones efectoras de los anticuerpos sobre macrófagos y neutrófilos infectados con Mtb H37Rv, a través del aislamiento de anticuerpos péptido específicos que reconocían péptidos derivados de la envoltura de la micobacteria; para esto se aislaron 34 anticuerpos péptido-específicos los cuales en su mayoría demostraron su función efectora neutralizante al inhibir la entrada de la micobacteria a macrófagos y además su capacidad para reducir la necrosis y aumentar la apoptosis en neutrófilos. Se encontró que los péptidos 40400, 31025 y 9111 son reconocidos por anticuerpos cuya función efectora en macrófagos neutraliza a la micobacteria inhibiendo su entrada y en neutrófilos reduce la muerte celular por necrosis favoreciendo un proceso apoptótico lo cual establece un mejor panorama en el control y resolución de la patología, estableciendo dichos péptidos como candidatos de un posible modelo vacunal sintético que supere la protección conferida por la BCG.
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spelling Navarrete Ospina, Jeannette2501b1f12f56f0da5153076c8e218e13Carabalí Isajar, Mary Lilián2b4923d54898251e7b414131eb53be9f600Galeano Orjuela, Daniela Alejandra962a3ecd61d5d0ff45cd408a05f00eb7Gómez Camargo, Juan Sebastián8b47c37c7f13c921784294bd98a4b6822022-10-10T20:09:30Z2022-10-10T20:09:30Z2022https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/5685Actualmente la tuberculosis es un problema de salud pública. La forma más efectiva para contrarrestar es la vacunación; no obstante, se cuenta con la BCG, una vacuna que no otorga protección a toda la población, ya que solo protege a infantes de las presentaciones severas de la enfermedad. Durante años se ha evaluado el papel de la respuesta inmune humoral y celular frente a Mycobacterium tuberculosis (Mtb) para controlar el desarrollo de la enfermedad. Se conoce que los anticuerpos presentan funciones efectoras que median la respuesta inmune en diferentes patologías; sin embargo, para la tuberculosis no está bien descrita. En este proyecto se planteó el análisis de las funciones efectoras de los anticuerpos sobre macrófagos y neutrófilos infectados con Mtb H37Rv, a través del aislamiento de anticuerpos péptido específicos que reconocían péptidos derivados de la envoltura de la micobacteria; para esto se aislaron 34 anticuerpos péptido-específicos los cuales en su mayoría demostraron su función efectora neutralizante al inhibir la entrada de la micobacteria a macrófagos y además su capacidad para reducir la necrosis y aumentar la apoptosis en neutrófilos. Se encontró que los péptidos 40400, 31025 y 9111 son reconocidos por anticuerpos cuya función efectora en macrófagos neutraliza a la micobacteria inhibiendo su entrada y en neutrófilos reduce la muerte celular por necrosis favoreciendo un proceso apoptótico lo cual establece un mejor panorama en el control y resolución de la patología, estableciendo dichos péptidos como candidatos de un posible modelo vacunal sintético que supere la protección conferida por la BCG.1. Resumen 11 2. Introducción …12 3. Objetivos … 15 3.1 Objetivo general 3.2 Objetivos específicos 4. Antecedentes ………… 16 5. Marco teórico ………… 19 5.1 Generalidades Tuberculosis 5.2 Mycobacterium tuberculosis y el complejo MTB 5.3 Epidemiología de la TB 5.4 Diagnóstico de la TB 5.5 Respuesta inmune innata de la TB 5.8 Respuesta inmune adaptativa de la TB 5.9 Vacunas contra la TB 6. Metodología …31 6.1 Diseño metodológico 6.1.1 Tipo de investigación 6.1.2 Alcance, nivel y enfoque de investigación 6.1.3 Población objeto de estudio 6.1.4 Muestra 6.2 Técnicas y procedimientos 6.2.1 Macrófagos 6.2.1.1 Cultivo de macrófagos U937 6.2.1.2 Ensayo de inhibición en macrófagos infectados con Mtb H37Rv, mediado por péptidos 6.2.2 Predicción de epítopes B 6.2.2.1 Aproximación bioinformatica 6.2.3 Aislamiento de inmunoglobulinas IgG afines peptidicos seleccionados 6.2.3.1 Aislamiento y purificación de IgG 6.2.3.2 Purificación de IgG péptido-especifica 6.2.3.2.1 Aproximación experimental ELISAs 6.2.3.2.2 Aproximación experimental Dot Blot 6.2.4 Evaluación de la función efectora de inmunoglobulinas que reconocen péptidos derivados de la envoltura de Mtb H37Rv 6.2.4.1 Macrófagos 6.2.4.1.1 Ensayo de inhibición en macrófagos infectados con Mtb H37Rv, mediado por IgG 6.2.4.2 Neutrófilos 6.2.4.2.1 Aislamiento de neutrófilos en sangre periférica 6.2.4.2.2 Ensayo de invasión en neutrófilos infectados con Mtb H37Rv, mediado por IgG 7. Resultados . 38 6 7.1 Inhibición de la entrada de Mtb H37Rv por péptidos modificados a macrófagos U937 7.2 Selección de péptidos sintetizados a partir de proteínas presentes en la envoltura de Mtb H37Rv 7.3 Evaluación del reconocimiento de péptidos nativos y modificados a partir de inmunoglobulinas presentes en suero humano 7.4 Aislamiento de inmunoglobulinas IgG afines peptídicos seleccionados 7.5 Inhibición de la entrada de Mtb H37Rv por anticuerpos dirigidos a péptidos nativos y modificados a macrófagos U937 7.6 Muerte celular en Neutrófilos infectados con Mtb H37Rv, mediada por IgG 8. Discusión … 48 9. Conclusiones ……… 55 10. Recomendaciones . 57 11. Referencias …58 12. Anexos …… 61PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico68p.application/pdfspaDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2022https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbAnticuerpos dirigidos contra péptidos de mycobacterium Tuberculosis y su función efectora en macrófagos y neutrófilos InfectadosTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionFacultad de Ciencias de la SaludBogotaBacteriología y Laboratorio ClínicoArévalo M. Informe Tuberculosis Primer Semestre Año 2020. Secretaría de Salud [Internet]. 2020 [citado 21 abril 2021]; 1 - 12MinSalud. Informe de Evento Tuberculosis. 2021.WHO. 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