Producción de Clorofila y Astaxantina a partir de la microalga Haematococcus Pluvialis bajo estrés inducido por deficiencia de nitrógeno en el biorreactor Biostat Aplus de 5 litros

Las microalgas han tomado gran importancia en los últimos tiempos gracias a los productos que resultan de su metabolismo como los biocombustibles, los carotenoides y los pigmentos, el Haematococcus pluvialis es una especie de microalga de la familia de las xantofilas que tiene la capacidad de produc...

Full description

Autores:
Pérez Zambrano, Erika Tatiana
Ayala Agudelo, Yazmin
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2019
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
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Palabra clave:
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Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019
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description Las microalgas han tomado gran importancia en los últimos tiempos gracias a los productos que resultan de su metabolismo como los biocombustibles, los carotenoides y los pigmentos, el Haematococcus pluvialis es una especie de microalga de la familia de las xantofilas que tiene la capacidad de producir el carotenoide conocido como astaxantina el cual representa aproximadamente el 3.0% del peso seco de la microalga y el pigmento conocido como clorofila que hace parte de su composición natural; estos compuestos son ampliamente usados en la industria farmacéutica, cosmética y alimentaria gracias al gran auge que han tomado los productos elaborados naturalmente para la salud. El objetivo de este trabajo fue determinar la concentración de nitrógeno adecuada para brindar las condiciones de crecimiento y estrés necesarias en el medio de cultivo, para lograr optimizar el rendimiento en la producción de astaxantina y clorofila. Con el fin de determinar las condiciones de cultivo óptimas para la microalga Haematococcus pluvialis se realizaron tres ensayos de cultivo en el medio RM sometiendo la microalga a condiciones de estrés por deficiencia de nitrógeno variando las concentraciones del mismo en el medio de cultivo; se hizó un ensayo de control (concentración de Nitrógeno 100%) y dos ensayos con deficiencia de nitrógeno en el medio de cultivo (concentración de Nitrógeno 5%, 4%), con fotoperiodos de 20 horas luz 4 horas oscuridad, pH de 5,7 a 6,3 y agitación constante en un biorreactor Biostat A plus; los resultados demostraron que el mayor rendimiento en producción de astaxantina y clorofila se obtuvo en el cultivo que tenía una concentración de nitrógeno de 5%, logrando una producción de 1,1µg/ml de astaxantina y 13,5µg/ml de clorofila. De acuerdo a los resultados obtenidos en los ensayos, se pudo concluir que la deficiencia de la concentración de nitrógeno en el medio de cultivo tiene un papel importante para la creación de condiciones de estrés que desencadenan la formación de células en forma de quiste productoras de astaxantina y el aumento en la fotosíntesis que se ve representado en la producción de clorofila.
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El objetivo de este trabajo fue determinar la concentración de nitrógeno adecuada para brindar las condiciones de crecimiento y estrés necesarias en el medio de cultivo, para lograr optimizar el rendimiento en la producción de astaxantina y clorofila. Con el fin de determinar las condiciones de cultivo óptimas para la microalga Haematococcus pluvialis se realizaron tres ensayos de cultivo en el medio RM sometiendo la microalga a condiciones de estrés por deficiencia de nitrógeno variando las concentraciones del mismo en el medio de cultivo; se hizó un ensayo de control (concentración de Nitrógeno 100%) y dos ensayos con deficiencia de nitrógeno en el medio de cultivo (concentración de Nitrógeno 5%, 4%), con fotoperiodos de 20 horas luz 4 horas oscuridad, pH de 5,7 a 6,3 y agitación constante en un biorreactor Biostat A plus; los resultados demostraron que el mayor rendimiento en producción de astaxantina y clorofila se obtuvo en el cultivo que tenía una concentración de nitrógeno de 5%, logrando una producción de 1,1µg/ml de astaxantina y 13,5µg/ml de clorofila. 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MARCO TEÓRICO 33 6.1 Clorofila 33 6.1.1 Estructura química de la clorofila 33 6.1.2 Producción de clorofila 34 6.1.3 Fuentes de clorofila 35 6.1.4 Usos, aplicaciones y propiedades de la clorofila 35 6.1.5 Métodos de extracción de clorofila 36 6.2 Astaxantina 36 6.2.1 Estructura Química de la astaxantina 38 6.2.2 Producción de astaxantina 39 6.2.3 Síntesis de la astaxantina 40 6.2.4 Fuentes de astaxantina 42 6.2.5 Usos, aplicaciones y propiedades de la astaxantina 43 6.2.6 Métodos de extracción de astaxantina 44 6.3 Generalidades de las Microalgas 46 6.3.1 Descripción de la microalga Haematococcus pluvialis 47 6.3.2 Clasificación de la microalga Haematococcus pluvialis 49 6.3.3 Ciclo de vida de la Microalga Haematococcus pluvialis 50 6.3.4 Vía metabólica de la Microalga Haematococcus pluvialis 52 6.3.5 Requerimientos nutricionales y medios de cultivo de la microalga Haematococcus pluvialis 54 6.3.6 Factores de estrés para la microalga Haematococcus pluvialis 56 6.3.7 Medio de cultivo RUDIC (RM) 57 6.4 Fotobiorreactor o fermentador 58 6.4.1 Tipos de biorreactores 58 6.4.2 Modo de operación de un biorreactor 61 6.4.3 Biorreactor BIOSTAT Aplus 62 6.4.4 Características de los métodos del Biorreactor 64 7. METODOLOGÍA 67 7.1 Tipo de estudio 67 7.2 Universo 67 7.3 Población 68 7.4 Muestra 68 7.5 Hipótesis 68 7.6 Unidad de análisis 69 7.7 Variables 69 7.7.1 Variables independientes 69 7.7.2 Variables dependientes 70 7.8.1 Revisión bibliográfica 70 7.8.2 Microorganismo 71 7.8.3 Preparación del inóculo 72 7.8.4 Curva de pH 74 7.8.5 Curva de crecimiento 75 7.8.6 Extracción de clorofila y astaxantina 75 7.8.7 Determinación de clorofila y astaxantina 75 7.8.8 Determinación de nitrógeno en el medio de cultivo 76 7.9 Análisis y resultados 76 8. RESULTADOS 77 8.1 Revisión bibliográfica condiciones de cultivo para la microalga Haematococcus pluvialis 77 8.2 Crecimiento celular 79 8.3 Producción de clorofila y astaxantina 83 8.4 Concentración de nitrógeno en el medio de cultivo 86 8.5 Medición de pH en el medio de cultivo RM 88 9. DISCUSIÓN 89 10. CONCLUSIONES 95 11. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 97PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico97p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.CBacteriología y Laboratorio ClínicoUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbProducción de Clorofila y Astaxantina a partir de la microalga Haematococcus Pluvialis bajo estrés inducido por deficiencia de nitrógeno en el biorreactor Biostat Aplus de 5 litrosTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionslam M, Gracia F. los antioxidantes para la salud óptima. revista médico científica 2013;26(2):3-9.Reardon W, Troxler S. ¿por qué la clorofila es saludable?. 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