Evaluación del efecto del agua de las curtiembres de San Benito localidad de Tunjuelito en la cepa transgénica EG1285 de Caenorhabditis elegans
La actividad manufacturera en Colombia representa una de las mayores fuentes de ingreso, dentro de estas las curtiembres hacen uso de metales pesados y sustancias químicas contaminantes con efectos nocivos para la salud. Las afecciones que causan los metales pesados son de interés en salud pública;...
- Autores:
-
Sánchez Gutiérrez, Wendy Paola
Santiago Lozano, Yessica Fernanda
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2019
- Institución:
- Colegio Mayor de Cundinamarca
- Repositorio:
- Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
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La actividad manufacturera en Colombia representa una de las mayores fuentes de ingreso, dentro de estas las curtiembres hacen uso de metales pesados y sustancias químicas contaminantes con efectos nocivos para la salud. Las afecciones que causan los metales pesados son de interés en salud pública; además, no se conoce el nivel toxicológico del agua residual proveniente de las curtiembres, Los desechos provenientes de esta actividad son vertidos al Río Tunjuelito que desemboca en el río Bogotá, fuente de abastecimiento indirecta para las poblaciones ribereñas que las utilizan como regadío en cultivos y medio de hidratación de especies animales. Estudiar los efectos de estos desechos en el modelo biológico Caenorhabditis elegans, permite hacer asociaciones entre la exposición a componentes tóxicos y los efectos de este sobre el nematodo. La cepa transgénica EG1285 de C elegans permite la visualización microscópica de las neuronas GABAérgicas e inferir el posible daño neuronal. En este proyecto se evaluó las características fenotípicas y fisiológicas entre la cepa salvaje N2 y EG1285, encontrando que no hubo diferencias significativas. La cepa EG1285 se evaluó con agua recolectada del Río Tunjuelito a la altura de las curtiembres, la muestra no género dosis letal para la cepa por lo cual los nematodos fueron colocados al contacto directo con el agua para evaluar el daño neuronal con ensayos de letalidad, motilidad, supervivencia y reproducción. Se encontró diferencia estadística entre las cepas con y sin tratamiento. Finalmente se determinó la presencia de Cromo encontrando niveles permitidos en este tipo de agua de 0,024mg/L. |
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Assessment of Sublethal Endpoints for Toxicity Testing With the Nematode Caenorhabditis Elegans. Environ Toxicol Chem. 2005;20(4):833. Anderson GL, Cole RD, Williams PL. Assessing behavioral toxicity with Caenorhabditis elegans. Environ Toxicol Chem. 2004;23(5):1235–40. Bautista R. IJ. Las curtiembres del corredor Villapinzón- Chocontá y el Río Bogotá. Rev Fac Ciencias Económicas Investig y Reflexión. 2004;12(2):36–45. Harada H, Kurauchi M, Hayashi R, Eki T. Shortened lifespan of nematode Caenorhabditis elegans after prolonged exposure to heavy metals and detergents. Ecotoxicol Environ Saf. 2007;66(3):378–83. Du M, Wang D. The neurotoxic effects of heavy metal exposure on GABAergic nervous system in nematode Caenorhabditis elegans. Environ Toxicol Pharmacol. 2009;27(3):314– 20. Negga R, Stuart JA, Machen ML, Salva J, Lizek AJ, Richardson SJ, et al. 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Finalmente se determinó la presencia de Cromo encontrando niveles permitidos en este tipo de agua de 0,024mg/L.RESUMEN 1 INTRODUCCIÓN 2 1. OBJETIVOS 3 1.1 OBJETIVO GENERAL 3 1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 3 2. ANTECEDENTES 4 3. MARCO TEÓRICO 10 3.1 CAENORHABDITIS ELEGANS 10 3.2 CICLO DE VIDA 10 3.3 SISTEMA DIGESTIVO 13 3.4 SISTEMA REPRODUCTOR 14 3.5 SISTEMA NERVIOSO 15 3.5.1 Neuronas GABAérgicas 15 3.5.2 Receptores de GABA 16 3.5.3 Función Locomotora 17 3.6 CEPA TRANSGÉNICA EG1285 17 3.7 CURTIEMBRES DE SAN BENITO 18 3.8 CALIDAD DEL AGUA DEL RÍO TUNJUELITO 20 3.9 NORMATIVIDAD 21 4. METODOLOGÍA 23 METODOLOGÍA GENERAL 23 4.1 RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA DE AGUA 23 4.2 PREPARACIÓN DEL MEDIO NGM Y MANTENIMIENTO DE LA CEPA 24 4.3 FENOTIPIFICACIÓN DE LA CEPA EG1285 DE C. ELEGANS 24 4.4 OBSERVACIÓN POR MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA 26 4.5 ANÁLISIS DEL AGUA DEL RIO TUNJUELITO 26 4.6 ANÁLISIS ESTADÍSTICO DE LOS DATOS 26 5. RESULTADOS 28 5.1 LOS ESTADIOS DE LA CEPA N2 Y EG1285 NO PRESENTAN DIFERENCIAS 28 5.2 LA CEPA EG1285 EXPRESA LA PROTEÍNA GFP EN LAS NEURONAS GABA 30 5.3 LAS CEPAS N2 Y EG1285 NO PRESENTAN DIFERENCIAS EN LAS CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS 31 5.3.1 La supervivencia C. elegans no difiere entre la cepa EG1285 y N2 31 32 5.3.2 La motilidad de C. elegans no difiere entre la cepa N2 y EG1285 32 5.3.3 La reproducción de C. elegans no difiere entre la cepa N2 y EG1285 33 5.4 EL AGUA DEL RÍO TUNJUELITO A LA ALTURA DE LAS CURTIEMBRES NO GENERA DOSIS LETAL EN LA CEPA EG1285 DE C. ELEGANS 34 5.5 EFECTO DEL AGUA SOBRE LAS CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS CEPA EG1285 35 5.5.1 La supervivencia de la cepa EG1285 varía con el tratamiento del agua del río Tunjuelito 35 5.5.2 La motilidad de la cepa EG1285 se afectó con el tratamiento del agua del río Tunjuelito 36 5.5.3 La tasa de reproducción de la cepa EG1285 disminuyó con el tratamiento del agua del río Tunjuelito 37 5.6 EFECTO DEL AGUA SOBRE LAS NEURONAS GABA 38 5.7 LA MUESTRA DE AGUA DEL RÍO TUNJUELITO CONTIENE TRAZAS DE CROMO 40 6. DISCUSIÓN 41 7. CONCLUSIONES 44 REFERENCIAS 45 ANEXOS 49PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico60p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá DCBacteriología y Laboratorio ClínicoDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbEvaluación del efecto del agua de las curtiembres de San Benito localidad de Tunjuelito en la cepa transgénica EG1285 de Caenorhabditis elegansTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionSan Benito- TunjuelitoTobergte DR, Curtis S. Ensayos Toxicológicos y Métodos de Evaluación de Calidad de Aguas. J Chem Inf Model. 2013;53(9):1689–99.Williams L, Dusenbery DB. AQUATIC TOXICITY TESTING USING THE NEMATODE , CA ENOR HA BDI TIS EL EGA NS Environmental Protection Agency @ PA ) has pub-. Society. 1990;9:1285–90.Peter E, Candido M, Jones D. Transgenic Caenorhabditis elegans strains as biosensors. Trends Biotechnol. 1996;14(4):125–9.Little EE, Greenberg BM, DeLonay AJ, ASTM Committee E-47 on Biological Effects and Environmental Fate., Environmental Toxicology and Risk Assessment (7h : 1997 : St. Louis M. Environmental toxicology and risk assessment. seventh volume. ASTM; 1998. 418 p.Dhawan R, Dusenbery DB, Williams PL. Comparison of lethality, reproduction, and behavior as toxicological endpoints in the nematode caenorhabditis elegans. J Toxicol Environ Heal - Part A. 1999;58(7):451–62.Anderson GL, Boyd WA, Williams PL. Assessment of Sublethal Endpoints for Toxicity Testing With the Nematode Caenorhabditis Elegans. Environ Toxicol Chem. 2005;20(4):833.Anderson GL, Cole RD, Williams PL. 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