Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros.
En la actualidad una de las microalgas más estudiadas es H. pluvialis debido a que esta presenta la capacidad de acumulación de uno de los principales carotenoides utilizados en la industria como lo es la astaxantina, esto ocurre cuando se encuentra sometida a diferentes factores de estrés, razón po...
- Autores:
-
Garcia Martin, Laura
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2018
- Institución:
- Colegio Mayor de Cundinamarca
- Repositorio:
- Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3700
- Acceso en línea:
- https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3700
- Palabra clave:
- Microalgas
Carotenoides
Cultivo
Análisis estadístico
Pluvialis
Astaxantina
Biorreactor
Factores de estrés
Acetato de sodio
- Rights
- closedAccess
- License
- Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018
| id |
UCOLMAYOR2_2af4a80446aaa3e180ea0b74b06031ed |
|---|---|
| oai_identifier_str |
oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3700 |
| network_acronym_str |
UCOLMAYOR2 |
| network_name_str |
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca |
| repository_id_str |
|
| dc.title.spa.fl_str_mv |
Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros. |
| title |
Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros. |
| spellingShingle |
Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros. Microalgas Carotenoides Cultivo Análisis estadístico Pluvialis Astaxantina Biorreactor Factores de estrés Acetato de sodio |
| title_short |
Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros. |
| title_full |
Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros. |
| title_fullStr |
Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros. |
| title_full_unstemmed |
Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros. |
| title_sort |
Producción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros. |
| dc.creator.fl_str_mv |
Garcia Martin, Laura |
| dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv |
Lancheros, Laura Garcia |
| dc.contributor.author.none.fl_str_mv |
Garcia Martin, Laura |
| dc.subject.lemb.none.fl_str_mv |
Microalgas Carotenoides Cultivo Análisis estadístico |
| topic |
Microalgas Carotenoides Cultivo Análisis estadístico Pluvialis Astaxantina Biorreactor Factores de estrés Acetato de sodio |
| dc.subject.proposal.spa.fl_str_mv |
Pluvialis Astaxantina Biorreactor Factores de estrés Acetato de sodio |
| description |
En la actualidad una de las microalgas más estudiadas es H. pluvialis debido a que esta presenta la capacidad de acumulación de uno de los principales carotenoides utilizados en la industria como lo es la astaxantina, esto ocurre cuando se encuentra sometida a diferentes factores de estrés, razón por la cual en el presente estudio se manejan dos tratamientos con diferentes concentraciones de acetato de sodio (0,299 mg/L Y 1,6 mg/L), las cuales fueron evaluadas en el medio RM con la influencia de diferente condiciones como pH de 6.7, fotoperiodos 20h luz y 4h oscuridad , luz blanca, temperatura 25 ± 2° C, aire filtrado y agitación a 100 rpm en un biorreactor TEC-FERM de 5 litros, proponéndose como objetivo del presente estudio realizar el proceso de producción de astaxantina en H. pluvialis bajo las condiciones mencionadas. Los resultados obtenidos con 0,299 mg/L de acetato de sodio determinaron un crecimiento celular máximo de 2,0 x 104 Cel/ mL y una concentración máxima de astaxantina de 2,530 µg/mL durante 34 días, mientras que con 1,6 mg/L de acetato de sodio se obtuvo un crecimiento celular máximo de 3,5 x 104 Cel/mL y una concentración máxima de astaxantina de 1,9 µg/ml. La morfología de la microalga se conservó durante el cultivo. El análisis estadístico realizado estableció que no hay diferencias significativas (P>0,05) entre tratamientos, lo cual permite concluir que con las dos concentraciones de acetato de sodio y las demás condiciones del proceso realizado en el biorreactor se obtuvo el colorante astaxantina. |
| publishDate |
2018 |
| dc.date.issued.none.fl_str_mv |
2018-11 |
| dc.date.accessioned.none.fl_str_mv |
2021-11-22T20:40:07Z |
| dc.date.available.none.fl_str_mv |
2021-11-22T20:40:07Z |
| dc.type.spa.fl_str_mv |
Trabajo de grado - Pregrado |
| dc.type.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
| dc.type.coarversion.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85 |
| dc.type.content.spa.fl_str_mv |
Text |
| dc.type.driver.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
| dc.type.redcol.spa.fl_str_mv |
https://purl.org/redcol/resource_type/TP |
| dc.type.version.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| format |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
| status_str |
publishedVersion |
| dc.identifier.uri.none.fl_str_mv |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3700 |
| dc.identifier.barcode.none.fl_str_mv |
58650 |
| url |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3700 |
| identifier_str_mv |
58650 |
| dc.language.iso.spa.fl_str_mv |
spa |
| language |
spa |
| dc.relation.references.spa.fl_str_mv |
Garcia J, De Vicente M, Galan B. Microalgae, old sustainable food and fashion nutraceuticals. Rev Microbial Biotechnology. España. 2017 Sept [Citado 2018 Febrero 27]. Disponible en: http://digital.csic.es/handle/10261/154331 Allewaert C Vanormelingen P Prosc old T Gomez P Gonzalez M Bilcke G D’Hondt S, Vyverman W. Species diversity in European Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales).Rev. Phycologia. Germany. 2015 octubre. [Citado 2018 Febrero 27]. Disponible en: http://www.phycologia.org/doi/10.2216/15-55.1 Juun J, Choi S, Kim J, Chang W, Sim S. Development of thin-film photo-bioreactor and its application to outdoor culture of microalgae 2013. Rev PubMed. Japón. [Internet]. 2013 Jun [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23361185 Kang J, Lee H, Park S. Complementary limiting factors of astaxanthin synthesis during photoautotrophic induction of Haematococcus pluvialis: C/N ratio and light intensity . Rev. PubMed. Estados Unidos. [Internet]. 2013 Abril [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17216459 Bangxiang H, Hou L, Dong M,Shi J, Huang X, Ding Y, Cong X,Zhang F,Zhang X, Zang X.Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis:Astaxanthin Induction by High Light with Acetateand Fe2+. Rev International Journal Molecular Sciences. China. 2018 Enero. [Citado 2018 Febrero 27]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29316673 Camacho J, González G, Klotz B. Producción de Astaxantina en Haematococcus pluvialis bajo diferentes condiciones de estrés. Rev. Nova. Colombia [Internet]. 2013 Mayo. [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: http://unicolmayor.edu.co/publicaciones/index.php/nova/article/view/227/458 Niño Milena. Evaluación de medios de cultivo para la extracción de astaxantina con Haematococcus pluvialis. Tesis. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. 2013 [Citado 2017 Octubre 29]. Dsiponible en: http://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/nova/article/view/2073/2273 Hamed I. The Evolution and Versatility of Microalgae Biotechnology: A Review. Rev Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. Estados Unidos.2016 Sept [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/1541-4337.12227/full Sidharth Arora, Richa Rani, Sanjoy Ghosh.Review Bioreactors in solid state fermentation technology: Design, applications and engineering aspects. Rev Journal of Biotechnology. India. 2018 Febrero.[Citado 2018 Febrero 27]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S016816561830018X?via%3Dihub Zuluaga D. Curso: Operación fermentador TECFERM 5L. (Anexo A) Center for Science in the Public Interest. CSPI Says Food Dyes Pose Rainbow of Risks Cancer, Hyperactivity, Allergic Reactions. Rev Estados Unidos. Nutrition Action [Internet]. 2010 Jun. [citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: https://cspinet.org/new/201006291.html Cortázar. A, Coronel. C, Escalante. A., González. C. Contaminación generada por colorantes en la industria textil. Rev. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. México [Internet]. 2014 Ene. [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa4/n3/e1.html Kang J, Lee H, Park S. Complementary limiting factors of astaxanthin synthesis during photoautotrophic induction of Haematococcus pluvialis: C/N ratio and light intensity . Rev. PubMed. Estados Unidos. [Internet]. 2013 Abril [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17216459 Córdoba N, Acero N, Duque L, Jiménez J, Serna J. Obtención y caracterización de astaxantina de la microalga Haematococcus pluvialis. Rev. UGciencia. Colombia [Internet]. 2011. [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: http://revistas.ugca.edu.co/index.php/ugciencia/article/view/426 Ramírez D. Evaluación del crecimiento y producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis en un fotobiorreactor tipo airlift. Tesis. Universidad Nacional de Colombia. 2013 [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: http://www.bdigital.unal.edu.co/11205/1/300061.2013.pdf Aravena I. Extracción de astaxantina de Haematococcus pluvialis usando co2 supercrítico. Tesis. Universidad Pontificia Universidad Católica de Chile [Internet]. 2011. [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: https://repositorio.uc.cl/bitstream/handle/11534/1487/567778.pdf?sequence=1&isAllowe d=y Yoo J.Choi S. Kim B. Sim S. Optimal design of scalable photo-bioreactor for phototropic culturing of Haematococcus pluvialis. Rev. Bioprocess Biosyst Eng. Korea [Internet]. 2012 Mayo. [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21909667 Valdés J, Montañez J, Águila C, Méndez A, Valdivia B. Tecnología de cultivo de microalgas en fotobiorreactores. Rev. AQM . México [Internet]. 2012 Enero [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: http://www.posgradoeinvestigacion.uadec.mx/AQM/No.%207/4.html Cifuentes S, Gonzalez M, Vargas S, Hoeneisen M, González N. Optimization of biomass, total carotenoids and astaxanthin production in Haematococcus pluvialis Flotow strain Steptoe (Nevada, USA) under laboratory conditions. Rev Biol Res. Chile. [Internet]. 2003 Marzo. [citado 2018 Marzo 01]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm .nih.gov/pubmed/14631867 Woong C,Jeon Y, Sang Y. Combined effects of light intensity and acetate concentration on the growth of unicellular microalga Haematococcus pluvialis. Rev Enzyme and Microbial Technology. Corea del Sur.2006 Julio. [accessed Mar 01 2018]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/228353480_Combined_effects_of_light_intensi ty_and_acetate_concentration_on_the_growth_of_unicellular_microalga_Haematococcus _pluvialis Gonzalez M, Cifuentes A, Gomez P. Growth and total carotenoid content in four chilean strains of Haematococcus pluvialis flotow, under laboratory conditions. Rev Guayana Botanica.Chile.2009 [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: https://search.proquest.com/openview/9248d4f7903018ebac4313376fed3923/1?pqorigsite=gscholar&cbl=54986 Zheng G, Chunxiao M, Xiaowen Z, Dong X, Xuexia M, Yitao W, Limin Y, Hongxin L, Lingling C, Naihao Y. Induction of salicylic acid (SA) on transcriptional expression of eight carotenoid genes and astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis. Rev Enzyme and Microbial Technology.China. 2012 Septiembre. [accessed Mar 01 2018]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141022912001147?via%3Dihub Nunes, Moira, Vieira, Armando Augusto Henriques, Pinto, Ernani, Carneiro, Ronaldo Leal, & Monteiro, Antonio Carlos. Carotenogênese em células de Haematococcus pluvialis induzidas pelos estresses luminoso e nutricional. Rev Pesquisa Agropecuária Brasileira, Sao Paulo [Internet]. 2013 Agosto [2017 Oct 28] 48(8), 825- 832. Disponible en: http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0100204X2013000800006&script=sci_abstract&tl ng=es Sipaúba-Tavares LH., Millan RN., Berchielli-Morais FA.. Effects of some parameters in upscale culture of Haematococcus pluvialis Flotow. Braz. J. Biol. [Internet]. 2013 Aug [cited 2018 Mar 01] ; 73( 3 ): 585-591. Available from: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S151969842013000300585&lng =en&nrm=iso&tlng=en Park J, Choi S,Hong M, Sim S. Enhanced astaxanthin production from microalga, Haematococcus pluvialis by two-stage perfusion culture with stepwise light irradiation. Rev. Bioprocess and Biosystems Engineering, Corea del sur [Internet]. 2014 Octubre[2018 Mayo 01] 10, 2039-2047.Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00449-014-1180-y Kiryag Jearim Hernández Morales, María Eugenia Pérez Morales, Carmen Jáuregui Romo, Luis Alberto Alcántara Jurado,Lilia Angélica Hurtado Ayala. Condiciones de producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis: Revisión bibliográfica 2003- 2013. Rev. mex. cienc. farm , Mexico[Internet]. 2013 Agosto [2017 Oct 28] Disponible en: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1870-01952015000100007 Hernández A. Labbé J. Yoo J. Microalgas, cultivo y beneficios. Rev. biol. mar. oceanogr. [Internet]. 2014 Ago [citado 2018 Ago 26] ; 49( 2 ): 157-173. Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718- 19572014000200001&lng=es. http://dx.doi.org/10.4067/S0718-19572014000200001 Wen Z, Liu Z, Hou Y, Liu C, Gao F, Zheng Y Chen F. Ethanol induced astaxanthin accumulation and transcriptional expression of carotenogenic genes in Haematococcus pluvialis. Rev. Enzyme and Microbial Technology. Corea del sur. 2015 Octubre.[cited 2018 Mar 01] ; 78( 3 ): 10-17. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141022915300168?via%3Dihub Poonkum W, Powtongsook S,Pavasant P.Astaxanthin induction in Microalga H. pluvialis with flat panel airlift photobioreactors under indoor and outdoor conditions. Rev Prep Biochem Biotechnol. 2015 Enero.[cited 2018 Mar 01] ; 45( 1 ): 1-17. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25105532 Wan M, Zhang Z, Wang J, Huan J, Fan J, Yu A, Wang W, Li Y. Sequential Heterotrophy-Dilution-Photoinduction Cultivation of Haematococcus pluvialis for efficient production of astaxanthin. Rev Bioresour Technol.2015 Diciembre.[cited 2018 Mar 01] ; 63: 198-557. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26433152 Wang N, Guan B, Kong Q, Sun H, Zhao Y, Duan L. Enchancing biomass of Haematococcus pluvialis and astaxanthin production by pH . controlled fed- batch culture. Rev Food and Fermentation Industries. China. 2016 Junio. .[cited 2018 Mar 01] ; 42(2): 120-124. Available from: http://en.cnki.com.cn/Article_en/CJFDTotalSPFX201602021.htm Cheng J, Li K,Yang Z, Zhou J, Cen K. Enhancing the growth rate and astaxanthin yield of Haematococcus pluvialis by nuclear irradiation and high concentration of carbon dioxide stress. Rev. Bioresource Technology. Corea del sur. 2016 Marzo. [cited 2018 Mar 01] ;49-54. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852415017162?via%3Dihub Fatima Nasrin Haque. Intensified green production of astaxanthin from Haematococcus pluvialis. Tesis. The University of Guelph. 2016 [Citado 2018 Mar 01]. Disponible en: https://atrium.lib.uoguelph.ca/xmlui/bitstream/handle/10214/9933/Haque_Fatima_20160 9_MASc.pdf?sequence=1&isAllowed=y Fatima Haque, Animesh Dutta, Mahendra Thimmanagari,Yi Wai Chiang. Integrated Haematococcus pluvialis biomassproduction and nutrient removal using bioethanolplant waste effluent.Rev. Process Safety and Environmental Protection, Canada [Internet]. 2017 Junio [2017 Oct 29]. Disponible en: http://www.sciencedirect.com.ezproxy.javeriana.edu.co:2048/science/article/pii/S095758 2017301945 . Marcelinus Christwardana, H. Hadiyanto. The effects of audible sound for enhancing the growth rate of microalgae Haematococcus pluvialis in vegetative stage. Rev. HAYATI Journal of Biosciences , Indonesia [Internet]. 2017 Agosto [2017 Oct 28] . Disponible en: http://www.sciencedirect.com.ezproxy.javeriana.edu.co:2048/science/article/pii/S197830 1917301420 Ke Li, Jun Cheng, Qing Ye, Yong He, Junhu Zhou, Kefa Cen. In vivo kinetics of lipids and astaxanthin evolution in Haematococcus pluvialis mutant under 15% CO2 using Raman microspectroscopy. Rev. Bioresource Technology, Zhejiang [Internet]. 2017 Mayo [2017 Oct 29]. Disponible en: https://www-sciencedirectcom.ezproxy.javeriana.edu.co/science/article/pii/S0960852417306247 Wanida Pan-utai, Pramuk Parakulsuksatid, Naraporn Phomkaivon. Effect of inducing agents on growth and astaxanthin production in Haematococcus pluvialis: organic and inorganic.Rev. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology, Tailandia [Internet]. 2017 Septiembre [2017 Oct 29]. Disponible en: http://www.sciencedirect.com.ezproxy.javeriana.edu.co:2048/science/article/pii/S187881 8117304619 Zheng Y, Li Z, Tao M, Li J, Hu Z. Effects of selenite on green microalga Haematococcus pluvialis: Bioaccumulation of selenium and enhancement of astaxanthin production.Rev Aquatic Toxicology, Amsterdam[Internet]. 2017 Diciembre [2018 May 01]; 183:21-27. Available from: http://europepmc.org/abstract/med/27987436 Christian D, Zhang J, Sawdon A, AnPeng C.Enhanced astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis using high carbon dioxide concentration and light illumination. Rev Bioresource Technology, Moscú[Internet]. 2018 Febrerp [2018 May 01]. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852418302712 Ma R, Skye R, Chua E, Alsenani F, Eltanahy E, Netzel M, Lu Y, Peer M.Gene expression profiling of astaxanthin and fatty acid pathways in Haematococcus pluvialis in response to different LED lighting conditions. Rev Bioresource Technology,Australia [Internet]. 2018 Febrero [2018 May 01]. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852417320989?via%3Dihub Bangxiang H, Lulu H, Manman D, Shi J, Huang X, Ding Y, Cong X, Zhang f, Zhang X, Zang X.Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis: Astaxanthin Induction by High Light with Acetate and Fe2+. Rev. International Journal of Molecular Sciences. China. [Internet]. 2018 Febrero [2018 May 01]. Available from: http://www.mdpi.com/1422-0067/19/1/17 Matheus V, Sant´ ana L. Biotechnology: the role of science and technology upon society. Rev Unisaita Science and Technology. Colombia [Internet]. 2016 December. [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: http://ojs.unisanta.br/index.php/sat/article/view/753/796 Fernández J, Guillén A, Gutiérrez G, Flores J, Pérez J. Presencia de Haematococcus pluvialis (Flotow, 1844) en la provincia de Zamora (Haematococcaceae). Bol. Real Sociedad Española de Historia Sección Biologia. España [Internet]. 2015. [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: http://historia.bio.ucm.es/rsehn/cont/publis/boletines/296.pdf Xi T, Dae K, Woon R. Enhancement of astaxanthin production using Haematococcus pluvialis with novel LED wavelength shift strategy. Rev. AGRIS. Estados Unidos. [Internet]. 2015 Febrero [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: http://agris.fao.org/agris-search/search.do?recordID=US201600261036 Valdés J, Montañez J, Águila C, Méndez A, Valdivia B. Tecnología de cultivo de microalgas en fotobiorreactores. Rev. AQM . México [Internet]. 2012 Enero [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: http://www.posgradoeinvestigacion.uadec.mx/AQM/No.%207/4.html Arias M, Martínez J, Cañizares R. Producción de biodiesel a partir de microalgas: parámetros del cultivo que afectan la producción de lípidos. Acta biol.Colomb. [Internet]. 2013 Apr [cited 2017 Oct 26] ; 18( 1 ): 43-68. Available from: http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120- 548X2013000100004&lng=en Hernández A, Labbé J, Garzón E. REVISIÓN: Microalgas, cultivo y beneficios. Rev. Biología Marina y Oceanografía. Chile [Internet]. 2014 Agosto [2017 Oct 26]; 157- 173. Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=47931776001 Hernández J, Pérez M, Jáuregui C, Alcántara L, Hurtado A. Condiciones de producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis: Revisión bibliográfica 2003-2013. Rev. mex. cienc. farm [Internet]. 2015 Mar [citado 2017 Oct 26]; 46( 1 ): 7-16. Disponible en: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1870- 01952015000100007&lng=es Abalde. J. La microalga Haematococcus como fuente de astaxantina. (Libro). España Universidad e da Coruña [Internet]. 2010 Mar [citado 2017 Oct 26]; 95-96. Disponible en: http://ruc.udc.es/dspace/bitstream/handle/2183/10777/CC%2048%20art%205.pdf?sequen ce=1 Mota M, Lopes R, Koubaa M,Roohinejad S, Barba F, Delgadillo I, Saraiva J. Fermentation at non-conventional conditions in food- and bio-sciences by the application of advanced processing technologies. Rev. Critical Reviews in Biotechnology. [Internet]. 2017 Abril [citado 2018 Marzo 03]; 38( 1 ): 122-140. Disponible en: https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/07388551.2017.1312272?scroll=top&need Access=true Moheimani N, Isdepsky A, Lisec J, Raes E, Borowitzka M. Coccolithophorid Algae Culture in Closed Photobioreactors. Rev Biotechonology and bioengineering. [Internet]. 2011 Mayo [citado 2018 Marzo 05]. Disponible en: http://onlinelibrary.wiley.com/wol1/doi/10.1002/bit.23161/full Borowitzka M. Commercial production of microalgae: ponds, tanks, tubes and fermenters. Rev Journal of Biotechnology. [Internet] 1999 Enero [citado 2018 Marzo 05]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168165699000838 Lemoine Y. Schoefs B. Secondary ketocarotenoid astaxanthin biosynthesis in algae: a multifunctional response to stress. Rev Photosynth Res. [Internet]. 2010 Noviembre [citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs11120-010-9583-3#citeas Baobei W. Zhen Z. Qiang H. Sommerfeld M Yinghua L. Danxiang H. Cellular capacities for high-light acclimation and changing lipid profiles across life cycle stages of the green alga Haematococcus pluvialis. Rev Plos One. [Internet]. 2014 Septiembre. [Citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4164365/ Catarina A. Amaro H. Malcata F. Microalgae as sources of carotenoids. Rev Mar Drugs. . [Internet]. 2011 Abril. [Citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3124977/ Goksan T. Ak I. Gokpinar S. An alternative approach to the traditional mixotrophic cultures of Haematococcus pluvialis Flotow (Chlorophyceae). Rev J Microbiol Biotechnol. [Internet]. 2010 Sep. [Citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20890091 Choi Y. Yun Y. Park J. Yang J. Determination of the time transferring cells for astaxanthin production considering two-stage process of Haematococcus pluvialis cultivation. Rev. Bioresour Technol [Internet]. 2011 Dic. [Citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22004594 Culture Colletion of Algae at The University at Austin ( UTEX). Composición de medios para microalgas. [Internet]. . [Citado 2018 septiembre 20]. Disponible en: https://utex.org/products/volvox-medium Villa A. Herazo D. Torrez A. Efecto del fotoperiodo sobre el crecimiento de la diatomea Chaetoceros calcitrans (CLON C-CAL) en cultivos estaticos. Rev Intropical. [Internet]. 2014 Dic. [Citado 2018 Septiembre 20]. Disponible en: http://revistas.unimagdalena.edu.co/index.php/intropica/article/view/1438/818 González A. Barajas A. Ardila A. Producción de biomasa y proteínas de Chlorella vulgaris Beyerinck ( Chlorellales: Chlorellaceae) a través del diseño de medios de cultivo selectivos. Rev Corpoica Ciencia y Tecnologia Agropecuaria. [Internet]. 2017 Dic. [Citado 2018 Septiembre 20]. Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/ccta/v18n3/0122-8706-ccta-18-03-00451.pdf Benavete J. Montañez C. Aguilar N. Méndez A. Valdivia B. Tecnología de cultivos de microalgas en fotobioreactores. Rev. Acta química mexicana. [Internet]. 2012 Dic. [Citado 2018 Septiembre 20]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/262560081_Tecnologia_de_Cultivo_de_Microa lgas_en_Fotobiorreactores |
| dc.rights.spa.fl_str_mv |
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018 |
| dc.rights.uri.spa.fl_str_mv |
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ |
| dc.rights.accessrights.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/closedAccess |
| dc.rights.creativecommons.spa.fl_str_mv |
Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) |
| dc.rights.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/access_right/c_14cb |
| rights_invalid_str_mv |
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018 https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) http://purl.org/coar/access_right/c_14cb |
| eu_rights_str_mv |
closedAccess |
| dc.format.extent.spa.fl_str_mv |
94p. |
| dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv |
application/pdf |
| dc.publisher.spa.fl_str_mv |
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca |
| dc.publisher.faculty.spa.fl_str_mv |
Facultad de Ciencias de la Salud |
| dc.publisher.place.spa.fl_str_mv |
Bogotá D.C |
| dc.publisher.program.spa.fl_str_mv |
Bacteriología y Laboratorio Clínico |
| institution |
Colegio Mayor de Cundinamarca |
| bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/1/PROYECTO%20FINAL.pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/2/PROYECTO%20FINAL-A.pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/3/Cartas%20proyecto%20final..pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/4/license.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/5/PROYECTO%20FINAL.pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/7/PROYECTO%20FINAL-A.pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/9/Cartas%20proyecto%20final..pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/6/PROYECTO%20FINAL.pdf.jpg https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/8/PROYECTO%20FINAL-A.pdf.jpg https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/10/Cartas%20proyecto%20final..pdf.jpg |
| bitstream.checksum.fl_str_mv |
360a9744ec1736ab3fb7af0a58271413 46909eb03ad42236cc9bc72b27a2fc64 e56b45b82680a70344c6baf701409d02 2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7a d6059dfc9801d4f55fccb3f308bd3f04 e1fcbc2a3a47d1a19242564f77c12578 0a90778a90200b52ad54079991eeeb71 4313aea867078d092e5b60769914754d 89988bb0a5964cbd401cddf880e96e3c 107923e6d12592928aa0dd0a6065335e |
| bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 |
| repository.name.fl_str_mv |
Biblioteca Digital Unicolmayor |
| repository.mail.fl_str_mv |
repositorio@unicolmayor.edu.co |
| _version_ |
1812210034577244160 |
| spelling |
Lancheros, Laura Garcia1822aa7d279667bec107c60744206741600Garcia Martin, Lauraf6d4c11e2c10a6e58fcafce6f5c853a76002021-11-22T20:40:07Z2021-11-22T20:40:07Z2018-11https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/370058650En la actualidad una de las microalgas más estudiadas es H. pluvialis debido a que esta presenta la capacidad de acumulación de uno de los principales carotenoides utilizados en la industria como lo es la astaxantina, esto ocurre cuando se encuentra sometida a diferentes factores de estrés, razón por la cual en el presente estudio se manejan dos tratamientos con diferentes concentraciones de acetato de sodio (0,299 mg/L Y 1,6 mg/L), las cuales fueron evaluadas en el medio RM con la influencia de diferente condiciones como pH de 6.7, fotoperiodos 20h luz y 4h oscuridad , luz blanca, temperatura 25 ± 2° C, aire filtrado y agitación a 100 rpm en un biorreactor TEC-FERM de 5 litros, proponéndose como objetivo del presente estudio realizar el proceso de producción de astaxantina en H. pluvialis bajo las condiciones mencionadas. Los resultados obtenidos con 0,299 mg/L de acetato de sodio determinaron un crecimiento celular máximo de 2,0 x 104 Cel/ mL y una concentración máxima de astaxantina de 2,530 µg/mL durante 34 días, mientras que con 1,6 mg/L de acetato de sodio se obtuvo un crecimiento celular máximo de 3,5 x 104 Cel/mL y una concentración máxima de astaxantina de 1,9 µg/ml. La morfología de la microalga se conservó durante el cultivo. El análisis estadístico realizado estableció que no hay diferencias significativas (P>0,05) entre tratamientos, lo cual permite concluir que con las dos concentraciones de acetato de sodio y las demás condiciones del proceso realizado en el biorreactor se obtuvo el colorante astaxantina.RESUMEN 18 INTRODUCCION 20 OBJETIVO GENERAL 22 OBJETIVOS ESPECIFICOS 22 1. ANTECEDENTES 23 2. MARCO REFERENCIAL 30 2.1. Biotecnología 30 2.1.1. Aplicaciones de la biotecnología 30 2.2. Microalga 31 2.2.1. Haematococcus pluvialis 32 2.2.2. Clasificación taxonómica de H. pluvialis 32 2.2.3. Ciclo de vida H. pluvialis 33 2.3. Factores de estrés 34 2.3.1. Luz 34 2.3.1.1. Fotoperiodos 35 2.3.2. Fuentes de carbono 35 2.3.2.1. Acetato de sodio 35 2.3.3. Temperatura 36 2.3.4. pH 36 2.3.5. Agitación 36 2.4. Astaxantina 36 2.4.1. Estructura de la astaxantina 37 2.4.2. Biosíntesis de la astaxantina en H. pluvialis 37 2.4.3. Aplicaciones de la astaxantina 38 2.5. Biorreactores 39 2.5.1. Tipos de biorreactores 39 2.5.1.1. Sistema abierto 39 2.5.1.2. Sistema cerrado 40 2.5.1.2.1. Biorreactor TER-FERM 5 L 40 3. DISEÑO METODOLOGICO 42 3.1. Tipo de investigación 42 3.2. Hipótesis 42 3.3. Población 42 3.4. Muestra 43 3.5. Variables 44 3.5.1. Variable dependiente 44 3.5.1.1. Indicadores variable dependiente 44 3.5.2. Variable independiente 44 3.5.2.1. Indicadores variables independiente 45 3.6. Técnicas y procedimientos 45 3.6.1. Microorganismo 45 3.6.2. Biorreactor TEC-FERM 46 3.6.3. Medio de cultivo 46 3.6.4. Condiciones de estrés 47 3.6.5. Curva de crecimiento 48 3.6.6. Determinación de clorofila y astaxantina 48 3.6.7. Método de determinación 48 3.6.8. Determinación de pigmentos 48 3.6.9. Análisis estadístico ANOVA 49 4. RESULTADOS 50 5. DISCUSIÓN 65 6. CONCLUSIONES 71 7. SUGERENCIAS 73 8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 79 9. ANEXOS 86PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico94p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.CBacteriología y Laboratorio ClínicoUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbProducción biotecnológica de Astaxantina a partir Haematococcus Pluvialis en biorreactor Tec-ferm de 5 litros.Trabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionGarcia J, De Vicente M, Galan B. Microalgae, old sustainable food and fashion nutraceuticals. Rev Microbial Biotechnology. España. 2017 Sept [Citado 2018 Febrero 27]. Disponible en: http://digital.csic.es/handle/10261/154331Allewaert C Vanormelingen P Prosc old T Gomez P Gonzalez M Bilcke G D’Hondt S, Vyverman W. Species diversity in European Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales).Rev. Phycologia. Germany. 2015 octubre. [Citado 2018 Febrero 27]. Disponible en: http://www.phycologia.org/doi/10.2216/15-55.1Juun J, Choi S, Kim J, Chang W, Sim S. Development of thin-film photo-bioreactor and its application to outdoor culture of microalgae 2013. Rev PubMed. Japón. [Internet]. 2013 Jun [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23361185Kang J, Lee H, Park S. Complementary limiting factors of astaxanthin synthesis during photoautotrophic induction of Haematococcus pluvialis: C/N ratio and light intensity . Rev. PubMed. Estados Unidos. [Internet]. 2013 Abril [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17216459Bangxiang H, Hou L, Dong M,Shi J, Huang X, Ding Y, Cong X,Zhang F,Zhang X, Zang X.Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis:Astaxanthin Induction by High Light with Acetateand Fe2+. Rev International Journal Molecular Sciences. China. 2018 Enero. [Citado 2018 Febrero 27]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29316673Camacho J, González G, Klotz B. Producción de Astaxantina en Haematococcus pluvialis bajo diferentes condiciones de estrés. Rev. Nova. Colombia [Internet]. 2013 Mayo. [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: http://unicolmayor.edu.co/publicaciones/index.php/nova/article/view/227/458Niño Milena. Evaluación de medios de cultivo para la extracción de astaxantina con Haematococcus pluvialis. Tesis. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. 2013 [Citado 2017 Octubre 29]. Dsiponible en: http://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/nova/article/view/2073/2273Hamed I. The Evolution and Versatility of Microalgae Biotechnology: A Review. Rev Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. Estados Unidos.2016 Sept [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/1541-4337.12227/fullSidharth Arora, Richa Rani, Sanjoy Ghosh.Review Bioreactors in solid state fermentation technology: Design, applications and engineering aspects. Rev Journal of Biotechnology. India. 2018 Febrero.[Citado 2018 Febrero 27]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S016816561830018X?via%3DihubZuluaga D. Curso: Operación fermentador TECFERM 5L. (Anexo A)Center for Science in the Public Interest. CSPI Says Food Dyes Pose Rainbow of Risks Cancer, Hyperactivity, Allergic Reactions. Rev Estados Unidos. Nutrition Action [Internet]. 2010 Jun. [citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: https://cspinet.org/new/201006291.htmlCortázar. A, Coronel. C, Escalante. A., González. C. Contaminación generada por colorantes en la industria textil. Rev. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. México [Internet]. 2014 Ene. [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa4/n3/e1.htmlKang J, Lee H, Park S. Complementary limiting factors of astaxanthin synthesis during photoautotrophic induction of Haematococcus pluvialis: C/N ratio and light intensity . Rev. PubMed. Estados Unidos. [Internet]. 2013 Abril [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17216459Córdoba N, Acero N, Duque L, Jiménez J, Serna J. Obtención y caracterización de astaxantina de la microalga Haematococcus pluvialis. Rev. UGciencia. Colombia [Internet]. 2011. [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: http://revistas.ugca.edu.co/index.php/ugciencia/article/view/426Ramírez D. Evaluación del crecimiento y producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis en un fotobiorreactor tipo airlift. Tesis. Universidad Nacional de Colombia. 2013 [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: http://www.bdigital.unal.edu.co/11205/1/300061.2013.pdfAravena I. Extracción de astaxantina de Haematococcus pluvialis usando co2 supercrítico. Tesis. Universidad Pontificia Universidad Católica de Chile [Internet]. 2011. [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: https://repositorio.uc.cl/bitstream/handle/11534/1487/567778.pdf?sequence=1&isAllowe d=yYoo J.Choi S. Kim B. Sim S. Optimal design of scalable photo-bioreactor for phototropic culturing of Haematococcus pluvialis. Rev. Bioprocess Biosyst Eng. Korea [Internet]. 2012 Mayo. [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21909667Valdés J, Montañez J, Águila C, Méndez A, Valdivia B. Tecnología de cultivo de microalgas en fotobiorreactores. Rev. AQM . México [Internet]. 2012 Enero [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: http://www.posgradoeinvestigacion.uadec.mx/AQM/No.%207/4.htmlCifuentes S, Gonzalez M, Vargas S, Hoeneisen M, González N. Optimization of biomass, total carotenoids and astaxanthin production in Haematococcus pluvialis Flotow strain Steptoe (Nevada, USA) under laboratory conditions. Rev Biol Res. Chile. [Internet]. 2003 Marzo. [citado 2018 Marzo 01]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm .nih.gov/pubmed/14631867Woong C,Jeon Y, Sang Y. Combined effects of light intensity and acetate concentration on the growth of unicellular microalga Haematococcus pluvialis. Rev Enzyme and Microbial Technology. Corea del Sur.2006 Julio. [accessed Mar 01 2018]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/228353480_Combined_effects_of_light_intensi ty_and_acetate_concentration_on_the_growth_of_unicellular_microalga_Haematococcus _pluvialisGonzalez M, Cifuentes A, Gomez P. Growth and total carotenoid content in four chilean strains of Haematococcus pluvialis flotow, under laboratory conditions. Rev Guayana Botanica.Chile.2009 [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: https://search.proquest.com/openview/9248d4f7903018ebac4313376fed3923/1?pqorigsite=gscholar&cbl=54986Zheng G, Chunxiao M, Xiaowen Z, Dong X, Xuexia M, Yitao W, Limin Y, Hongxin L, Lingling C, Naihao Y. Induction of salicylic acid (SA) on transcriptional expression of eight carotenoid genes and astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis. Rev Enzyme and Microbial Technology.China. 2012 Septiembre. [accessed Mar 01 2018]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141022912001147?via%3DihubNunes, Moira, Vieira, Armando Augusto Henriques, Pinto, Ernani, Carneiro, Ronaldo Leal, & Monteiro, Antonio Carlos. Carotenogênese em células de Haematococcus pluvialis induzidas pelos estresses luminoso e nutricional. Rev Pesquisa Agropecuária Brasileira, Sao Paulo [Internet]. 2013 Agosto [2017 Oct 28] 48(8), 825- 832. Disponible en: http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0100204X2013000800006&script=sci_abstract&tl ng=esSipaúba-Tavares LH., Millan RN., Berchielli-Morais FA.. Effects of some parameters in upscale culture of Haematococcus pluvialis Flotow. Braz. J. Biol. [Internet]. 2013 Aug [cited 2018 Mar 01] ; 73( 3 ): 585-591. Available from: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S151969842013000300585&lng =en&nrm=iso&tlng=enPark J, Choi S,Hong M, Sim S. Enhanced astaxanthin production from microalga, Haematococcus pluvialis by two-stage perfusion culture with stepwise light irradiation. Rev. Bioprocess and Biosystems Engineering, Corea del sur [Internet]. 2014 Octubre[2018 Mayo 01] 10, 2039-2047.Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00449-014-1180-yKiryag Jearim Hernández Morales, María Eugenia Pérez Morales, Carmen Jáuregui Romo, Luis Alberto Alcántara Jurado,Lilia Angélica Hurtado Ayala. Condiciones de producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis: Revisión bibliográfica 2003- 2013. Rev. mex. cienc. farm , Mexico[Internet]. 2013 Agosto [2017 Oct 28] Disponible en: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1870-01952015000100007Hernández A. Labbé J. Yoo J. Microalgas, cultivo y beneficios. Rev. biol. mar. oceanogr. [Internet]. 2014 Ago [citado 2018 Ago 26] ; 49( 2 ): 157-173. Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718- 19572014000200001&lng=es. http://dx.doi.org/10.4067/S0718-19572014000200001Wen Z, Liu Z, Hou Y, Liu C, Gao F, Zheng Y Chen F. Ethanol induced astaxanthin accumulation and transcriptional expression of carotenogenic genes in Haematococcus pluvialis. Rev. Enzyme and Microbial Technology. Corea del sur. 2015 Octubre.[cited 2018 Mar 01] ; 78( 3 ): 10-17. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141022915300168?via%3DihubPoonkum W, Powtongsook S,Pavasant P.Astaxanthin induction in Microalga H. pluvialis with flat panel airlift photobioreactors under indoor and outdoor conditions. Rev Prep Biochem Biotechnol. 2015 Enero.[cited 2018 Mar 01] ; 45( 1 ): 1-17. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25105532Wan M, Zhang Z, Wang J, Huan J, Fan J, Yu A, Wang W, Li Y. Sequential Heterotrophy-Dilution-Photoinduction Cultivation of Haematococcus pluvialis for efficient production of astaxanthin. Rev Bioresour Technol.2015 Diciembre.[cited 2018 Mar 01] ; 63: 198-557. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26433152Wang N, Guan B, Kong Q, Sun H, Zhao Y, Duan L. Enchancing biomass of Haematococcus pluvialis and astaxanthin production by pH . controlled fed- batch culture. Rev Food and Fermentation Industries. China. 2016 Junio. .[cited 2018 Mar 01] ; 42(2): 120-124. Available from: http://en.cnki.com.cn/Article_en/CJFDTotalSPFX201602021.htmCheng J, Li K,Yang Z, Zhou J, Cen K. Enhancing the growth rate and astaxanthin yield of Haematococcus pluvialis by nuclear irradiation and high concentration of carbon dioxide stress. Rev. Bioresource Technology. Corea del sur. 2016 Marzo. [cited 2018 Mar 01] ;49-54. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852415017162?via%3DihubFatima Nasrin Haque. Intensified green production of astaxanthin from Haematococcus pluvialis. Tesis. The University of Guelph. 2016 [Citado 2018 Mar 01]. Disponible en: https://atrium.lib.uoguelph.ca/xmlui/bitstream/handle/10214/9933/Haque_Fatima_20160 9_MASc.pdf?sequence=1&isAllowed=yFatima Haque, Animesh Dutta, Mahendra Thimmanagari,Yi Wai Chiang. Integrated Haematococcus pluvialis biomassproduction and nutrient removal using bioethanolplant waste effluent.Rev. Process Safety and Environmental Protection, Canada [Internet]. 2017 Junio [2017 Oct 29]. Disponible en: http://www.sciencedirect.com.ezproxy.javeriana.edu.co:2048/science/article/pii/S095758 2017301945. Marcelinus Christwardana, H. Hadiyanto. The effects of audible sound for enhancing the growth rate of microalgae Haematococcus pluvialis in vegetative stage. Rev. HAYATI Journal of Biosciences , Indonesia [Internet]. 2017 Agosto [2017 Oct 28] . Disponible en: http://www.sciencedirect.com.ezproxy.javeriana.edu.co:2048/science/article/pii/S197830 1917301420Ke Li, Jun Cheng, Qing Ye, Yong He, Junhu Zhou, Kefa Cen. In vivo kinetics of lipids and astaxanthin evolution in Haematococcus pluvialis mutant under 15% CO2 using Raman microspectroscopy. Rev. Bioresource Technology, Zhejiang [Internet]. 2017 Mayo [2017 Oct 29]. Disponible en: https://www-sciencedirectcom.ezproxy.javeriana.edu.co/science/article/pii/S0960852417306247Wanida Pan-utai, Pramuk Parakulsuksatid, Naraporn Phomkaivon. Effect of inducing agents on growth and astaxanthin production in Haematococcus pluvialis: organic and inorganic.Rev. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology, Tailandia [Internet]. 2017 Septiembre [2017 Oct 29]. Disponible en: http://www.sciencedirect.com.ezproxy.javeriana.edu.co:2048/science/article/pii/S187881 8117304619Zheng Y, Li Z, Tao M, Li J, Hu Z. Effects of selenite on green microalga Haematococcus pluvialis: Bioaccumulation of selenium and enhancement of astaxanthin production.Rev Aquatic Toxicology, Amsterdam[Internet]. 2017 Diciembre [2018 May 01]; 183:21-27. Available from: http://europepmc.org/abstract/med/27987436Christian D, Zhang J, Sawdon A, AnPeng C.Enhanced astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis using high carbon dioxide concentration and light illumination. Rev Bioresource Technology, Moscú[Internet]. 2018 Febrerp [2018 May 01]. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852418302712Ma R, Skye R, Chua E, Alsenani F, Eltanahy E, Netzel M, Lu Y, Peer M.Gene expression profiling of astaxanthin and fatty acid pathways in Haematococcus pluvialis in response to different LED lighting conditions. Rev Bioresource Technology,Australia [Internet]. 2018 Febrero [2018 May 01]. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960852417320989?via%3DihubBangxiang H, Lulu H, Manman D, Shi J, Huang X, Ding Y, Cong X, Zhang f, Zhang X, Zang X.Transcriptome Analysis in Haematococcus pluvialis: Astaxanthin Induction by High Light with Acetate and Fe2+. Rev. International Journal of Molecular Sciences. China. [Internet]. 2018 Febrero [2018 May 01]. Available from: http://www.mdpi.com/1422-0067/19/1/17Matheus V, Sant´ ana L. Biotechnology: the role of science and technology upon society. Rev Unisaita Science and Technology. Colombia [Internet]. 2016 December. [Citado 2017 Febrero 25]. Disponible en: http://ojs.unisanta.br/index.php/sat/article/view/753/796Fernández J, Guillén A, Gutiérrez G, Flores J, Pérez J. Presencia de Haematococcus pluvialis (Flotow, 1844) en la provincia de Zamora (Haematococcaceae). Bol. Real Sociedad Española de Historia Sección Biologia. España [Internet]. 2015. [Citado 2017 Febrero 26]. Disponible en: http://historia.bio.ucm.es/rsehn/cont/publis/boletines/296.pdfXi T, Dae K, Woon R. Enhancement of astaxanthin production using Haematococcus pluvialis with novel LED wavelength shift strategy. Rev. AGRIS. Estados Unidos. [Internet]. 2015 Febrero [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: http://agris.fao.org/agris-search/search.do?recordID=US201600261036Valdés J, Montañez J, Águila C, Méndez A, Valdivia B. Tecnología de cultivo de microalgas en fotobiorreactores. Rev. AQM . México [Internet]. 2012 Enero [citado 2017 Oct. 26]. Disponible en: http://www.posgradoeinvestigacion.uadec.mx/AQM/No.%207/4.htmlArias M, Martínez J, Cañizares R. Producción de biodiesel a partir de microalgas: parámetros del cultivo que afectan la producción de lípidos. Acta biol.Colomb. [Internet]. 2013 Apr [cited 2017 Oct 26] ; 18( 1 ): 43-68. Available from: http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120- 548X2013000100004&lng=enHernández A, Labbé J, Garzón E. REVISIÓN: Microalgas, cultivo y beneficios. Rev. Biología Marina y Oceanografía. Chile [Internet]. 2014 Agosto [2017 Oct 26]; 157- 173. Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=47931776001Hernández J, Pérez M, Jáuregui C, Alcántara L, Hurtado A. Condiciones de producción de astaxantina por Haematococcus pluvialis: Revisión bibliográfica 2003-2013. Rev. mex. cienc. farm [Internet]. 2015 Mar [citado 2017 Oct 26]; 46( 1 ): 7-16. Disponible en: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1870- 01952015000100007&lng=esAbalde. J. La microalga Haematococcus como fuente de astaxantina. (Libro). España Universidad e da Coruña [Internet]. 2010 Mar [citado 2017 Oct 26]; 95-96. Disponible en: http://ruc.udc.es/dspace/bitstream/handle/2183/10777/CC%2048%20art%205.pdf?sequen ce=1Mota M, Lopes R, Koubaa M,Roohinejad S, Barba F, Delgadillo I, Saraiva J. Fermentation at non-conventional conditions in food- and bio-sciences by the application of advanced processing technologies. Rev. Critical Reviews in Biotechnology. [Internet]. 2017 Abril [citado 2018 Marzo 03]; 38( 1 ): 122-140. Disponible en: https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/07388551.2017.1312272?scroll=top&need Access=trueMoheimani N, Isdepsky A, Lisec J, Raes E, Borowitzka M. Coccolithophorid Algae Culture in Closed Photobioreactors. Rev Biotechonology and bioengineering. [Internet]. 2011 Mayo [citado 2018 Marzo 05]. Disponible en: http://onlinelibrary.wiley.com/wol1/doi/10.1002/bit.23161/fullBorowitzka M. Commercial production of microalgae: ponds, tanks, tubes and fermenters. Rev Journal of Biotechnology. [Internet] 1999 Enero [citado 2018 Marzo 05]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168165699000838Lemoine Y. Schoefs B. Secondary ketocarotenoid astaxanthin biosynthesis in algae: a multifunctional response to stress. Rev Photosynth Res. [Internet]. 2010 Noviembre [citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs11120-010-9583-3#citeasBaobei W. Zhen Z. Qiang H. Sommerfeld M Yinghua L. Danxiang H. Cellular capacities for high-light acclimation and changing lipid profiles across life cycle stages of the green alga Haematococcus pluvialis. Rev Plos One. [Internet]. 2014 Septiembre. [Citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4164365/Catarina A. Amaro H. Malcata F. Microalgae as sources of carotenoids. Rev Mar Drugs. . [Internet]. 2011 Abril. [Citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3124977/Goksan T. Ak I. Gokpinar S. An alternative approach to the traditional mixotrophic cultures of Haematococcus pluvialis Flotow (Chlorophyceae). Rev J Microbiol Biotechnol. [Internet]. 2010 Sep. [Citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20890091Choi Y. Yun Y. Park J. Yang J. Determination of the time transferring cells for astaxanthin production considering two-stage process of Haematococcus pluvialis cultivation. Rev. Bioresour Technol [Internet]. 2011 Dic. [Citado 2018 agosto 20]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22004594Culture Colletion of Algae at The University at Austin ( UTEX). Composición de medios para microalgas. [Internet]. . [Citado 2018 septiembre 20]. Disponible en: https://utex.org/products/volvox-mediumVilla A. Herazo D. Torrez A. Efecto del fotoperiodo sobre el crecimiento de la diatomea Chaetoceros calcitrans (CLON C-CAL) en cultivos estaticos. Rev Intropical. [Internet]. 2014 Dic. [Citado 2018 Septiembre 20]. Disponible en: http://revistas.unimagdalena.edu.co/index.php/intropica/article/view/1438/818González A. Barajas A. Ardila A. Producción de biomasa y proteínas de Chlorella vulgaris Beyerinck ( Chlorellales: Chlorellaceae) a través del diseño de medios de cultivo selectivos. Rev Corpoica Ciencia y Tecnologia Agropecuaria. [Internet]. 2017 Dic. [Citado 2018 Septiembre 20]. Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/ccta/v18n3/0122-8706-ccta-18-03-00451.pdfBenavete J. Montañez C. Aguilar N. Méndez A. Valdivia B. Tecnología de cultivos de microalgas en fotobioreactores. Rev. Acta química mexicana. [Internet]. 2012 Dic. [Citado 2018 Septiembre 20]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/262560081_Tecnologia_de_Cultivo_de_Microa lgas_en_FotobiorreactoresMicroalgasCarotenoidesCultivoAnálisis estadísticoPluvialisAstaxantinaBiorreactorFactores de estrésAcetato de sodioORIGINALPROYECTO FINAL.pdfPROYECTO FINAL.pdfapplication/pdf1366221https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/1/PROYECTO%20FINAL.pdf360a9744ec1736ab3fb7af0a58271413MD51open accessPROYECTO FINAL-A.pdfPROYECTO FINAL-A.pdfapplication/pdf1992901https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/2/PROYECTO%20FINAL-A.pdf46909eb03ad42236cc9bc72b27a2fc64MD52open accessCartas proyecto final..pdfCartas proyecto final..pdfapplication/pdf234852https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/3/Cartas%20proyecto%20final..pdfe56b45b82680a70344c6baf701409d02MD53metadata only accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814828https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/4/license.txt2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7aMD54open accessTEXTPROYECTO FINAL.pdf.txtPROYECTO FINAL.pdf.txtExtracted texttext/plain10908https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/5/PROYECTO%20FINAL.pdf.txtd6059dfc9801d4f55fccb3f308bd3f04MD55open accessPROYECTO FINAL-A.pdf.txtPROYECTO FINAL-A.pdf.txtExtracted texttext/plain118201https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/7/PROYECTO%20FINAL-A.pdf.txte1fcbc2a3a47d1a19242564f77c12578MD57open accessCartas proyecto final..pdf.txtCartas proyecto final..pdf.txtExtracted texttext/plain18https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/9/Cartas%20proyecto%20final..pdf.txt0a90778a90200b52ad54079991eeeb71MD59metadata only accessTHUMBNAILPROYECTO FINAL.pdf.jpgPROYECTO FINAL.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg6341https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/6/PROYECTO%20FINAL.pdf.jpg4313aea867078d092e5b60769914754dMD56open accessPROYECTO FINAL-A.pdf.jpgPROYECTO FINAL-A.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg7099https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/8/PROYECTO%20FINAL-A.pdf.jpg89988bb0a5964cbd401cddf880e96e3cMD58open accessCartas proyecto final..pdf.jpgCartas proyecto final..pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg7831https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3700/10/Cartas%20proyecto%20final..pdf.jpg107923e6d12592928aa0dd0a6065335eMD510metadata only accessunicolmayor/3700oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/37002021-11-23 03:00:35.147An error occurred on the license name.|||https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/open accessBiblioteca Digital Unicolmayorrepositorio@unicolmayor.edu.coTEEgT0JSQSAoVEFMIFkgQ09NTyBTRSBERUZJTkUgTcOBUyBBREVMQU5URSkgU0UgT1RPUkdBIEJBSk8gTE9TIFRFUk1JTk9TIERFIEVTVEEgTElDRU5DSUEgUMOaQkxJQ0EgREUgQ1JFQVRJVkUgQ09NTU9OUyAo4oCcTFBDQ+KAnSBPIOKAnExJQ0VOQ0lB4oCdKS4gTEEgT0JSQSBFU1TDgSBQUk9URUdJREEgUE9SIERFUkVDSE9TIERFIEFVVE9SIFkvVSBPVFJBUyBMRVlFUyBBUExJQ0FCTEVTLiBRVUVEQSBQUk9ISUJJRE8gQ1VBTFFVSUVSIFVTTyBRVUUgU0UgSEFHQSBERSBMQSBPQlJBIFFVRSBOTyBDVUVOVEUgQ09OIExBIEFVVE9SSVpBQ0nDk04gUEVSVElORU5URSBERSBDT05GT1JNSURBRCBDT04gTE9TIFTDiVJNSU5PUyBERSBFU1RBIExJQ0VOQ0lBIFkgREUgTEEgTEVZIERFIERFUkVDSE8gREUgQVVUT1IuCgpNRURJQU5URSBFTCBFSkVSQ0lDSU8gREUgQ1VBTFFVSUVSQSBERSBMT1MgREVSRUNIT1MgUVVFIFNFIE9UT1JHQU4gRU4gRVNUQSBMSUNFTkNJQSwgVVNURUQgQUNFUFRBIFkgQUNVRVJEQSBRVUVEQVIgT0JMSUdBRE8gRU4gTE9TIFRFUk1JTk9TIFFVRSBTRSBTRcORQUxBTiBFTiBFTExBLiBFTCBMSUNFTkNJQU5URSBDT05DRURFIEEgVVNURUQgTE9TIERFUkVDSE9TIENPTlRFTklET1MgRU4gRVNUQSBMSUNFTkNJQSBDT05ESUNJT05BRE9TIEEgTEEgQUNFUFRBQ0nDk04gREUgU1VTIFRFUk1JTk9TIFkgQ09ORElDSU9ORVMuCjEuIERlZmluaWNpb25lcwoKYS4JT2JyYSBDb2xlY3RpdmEgZXMgdW5hIG9icmEsIHRhbCBjb21vIHVuYSBwdWJsaWNhY2nDs24gcGVyacOzZGljYSwgdW5hIGFudG9sb2fDrWEsIG8gdW5hIGVuY2ljbG9wZWRpYSwgZW4gbGEgcXVlIGxhIG9icmEgZW4gc3UgdG90YWxpZGFkLCBzaW4gbW9kaWZpY2FjacOzbiBhbGd1bmEsIGp1bnRvIGNvbiB1biBncnVwbyBkZSBvdHJhcyBjb250cmlidWNpb25lcyBxdWUgY29uc3RpdHV5ZW4gb2JyYXMgc2VwYXJhZGFzIGUgaW5kZXBlbmRpZW50ZXMgZW4gc8OtIG1pc21hcywgc2UgaW50ZWdyYW4gZW4gdW4gdG9kbyBjb2xlY3Rpdm8uIFVuYSBPYnJhIHF1ZSBjb25zdGl0dXllIHVuYSBvYnJhIGNvbGVjdGl2YSBubyBzZSBjb25zaWRlcmFyw6EgdW5hIE9icmEgRGVyaXZhZGEgKGNvbW8gc2UgZGVmaW5lIGFiYWpvKSBwYXJhIGxvcyBwcm9ww7NzaXRvcyBkZSBlc3RhIGxpY2VuY2lhLiBhcXVlbGxhIHByb2R1Y2lkYSBwb3IgdW4gZ3J1cG8gZGUgYXV0b3JlcywgZW4gcXVlIGxhIE9icmEgc2UgZW5jdWVudHJhIHNpbiBtb2RpZmljYWNpb25lcywganVudG8gY29uIHVuYSBjaWVydGEgY2FudGlkYWQgZGUgb3RyYXMgY29udHJpYnVjaW9uZXMsIHF1ZSBjb25zdGl0dXllbiBlbiBzw60gbWlzbW9zIHRyYWJham9zIHNlcGFyYWRvcyBlIGluZGVwZW5kaWVudGVzLCBxdWUgc29uIGludGVncmFkb3MgYWwgdG9kbyBjb2xlY3Rpdm8sIHRhbGVzIGNvbW8gcHVibGljYWNpb25lcyBwZXJpw7NkaWNhcywgYW50b2xvZ8OtYXMgbyBlbmNpY2xvcGVkaWFzLgoKYi4JT2JyYSBEZXJpdmFkYSBzaWduaWZpY2EgdW5hIG9icmEgYmFzYWRhIGVuIGxhIG9icmEgb2JqZXRvIGRlIGVzdGEgbGljZW5jaWEgbyBlbiDDqXN0YSB5IG90cmFzIG9icmFzIHByZWV4aXN0ZW50ZXMsIHRhbGVzIGNvbW8gdHJhZHVjY2lvbmVzLCBhcnJlZ2xvcyBtdXNpY2FsZXMsIGRyYW1hdGl6YWNpb25lcywg4oCcZmljY2lvbmFsaXphY2lvbmVz4oCdLCB2ZXJzaW9uZXMgcGFyYSBjaW5lLCDigJxncmFiYWNpb25lcyBkZSBzb25pZG/igJ0sIHJlcHJvZHVjY2lvbmVzIGRlIGFydGUsIHJlc8O6bWVuZXMsIGNvbmRlbnNhY2lvbmVzLCBvIGN1YWxxdWllciBvdHJhIGVuIGxhIHF1ZSBsYSBvYnJhIHB1ZWRhIHNlciB0cmFuc2Zvcm1hZGEsIGNhbWJpYWRhIG8gYWRhcHRhZGEsIGV4Y2VwdG8gYXF1ZWxsYXMgcXVlIGNvbnN0aXR1eWFuIHVuYSBvYnJhIGNvbGVjdGl2YSwgbGFzIHF1ZSBubyBzZXLDoW4gY29uc2lkZXJhZGFzIHVuYSBvYnJhIGRlcml2YWRhIHBhcmEgZWZlY3RvcyBkZSBlc3RhIGxpY2VuY2lhLiAoUGFyYSBldml0YXIgZHVkYXMsIGVuIGVsIGNhc28gZGUgcXVlIGxhIE9icmEgc2VhIHVuYSBjb21wb3NpY2nDs24gbXVzaWNhbCBvIHVuYSBncmFiYWNpw7NuIHNvbm9yYSwgcGFyYSBsb3MgZWZlY3RvcyBkZSBlc3RhIExpY2VuY2lhIGxhIHNpbmNyb25pemFjacOzbiB0ZW1wb3JhbCBkZSBsYSBPYnJhIGNvbiB1bmEgaW1hZ2VuIGVuIG1vdmltaWVudG8gc2UgY29uc2lkZXJhcsOhIHVuYSBPYnJhIERlcml2YWRhIHBhcmEgbG9zIGZpbmVzIGRlIGVzdGEgbGljZW5jaWEpLgoKYy4JTGljZW5jaWFudGUsIGVzIGVsIGluZGl2aWR1byBvIGxhIGVudGlkYWQgdGl0dWxhciBkZSBsb3MgZGVyZWNob3MgZGUgYXV0b3IgcXVlIG9mcmVjZSBsYSBPYnJhIGVuIGNvbmZvcm1pZGFkIGNvbiBsYXMgY29uZGljaW9uZXMgZGUgZXN0YSBMaWNlbmNpYS4KCmQuCUF1dG9yIG9yaWdpbmFsLCBlcyBlbCBpbmRpdmlkdW8gcXVlIGNyZcOzIGxhIE9icmEuCgplLglPYnJhLCBlcyBhcXVlbGxhIG9icmEgc3VzY2VwdGlibGUgZGUgcHJvdGVjY2nDs24gcG9yIGVsIHLDqWdpbWVuIGRlIERlcmVjaG8gZGUgQXV0b3IgeSBxdWUgZXMgb2ZyZWNpZGEgZW4gbG9zIHTDqXJtaW5vcyBkZSBlc3RhIGxpY2VuY2lhCgpmLglVc3RlZCwgZXMgZWwgaW5kaXZpZHVvIG8gbGEgZW50aWRhZCBxdWUgZWplcmNpdGEgbG9zIGRlcmVjaG9zIG90b3JnYWRvcyBhbCBhbXBhcm8gZGUgZXN0YSBMaWNlbmNpYSB5IHF1ZSBjb24gYW50ZXJpb3JpZGFkIG5vIGhhIHZpb2xhZG8gbGFzIGNvbmRpY2lvbmVzIGRlIGxhIG1pc21hIHJlc3BlY3RvIGEgbGEgT2JyYSwgbyBxdWUgaGF5YSBvYnRlbmlkbyBhdXRvcml6YWNpw7NuIGV4cHJlc2EgcG9yIHBhcnRlIGRlbCBMaWNlbmNpYW50ZSBwYXJhIGVqZXJjZXIgbG9zIGRlcmVjaG9zIGFsIGFtcGFybyBkZSBlc3RhIExpY2VuY2lhIHBlc2UgYSB1bmEgdmlvbGFjacOzbiBhbnRlcmlvci4KCjIuIERlcmVjaG9zIGRlIFVzb3MgSG9ucmFkb3MgeSBleGNlcGNpb25lcyBMZWdhbGVzLgpOYWRhIGVuIGVzdGEgTGljZW5jaWEgcG9kcsOhIHNlciBpbnRlcnByZXRhZG8gY29tbyB1bmEgZGlzbWludWNpw7NuLCBsaW1pdGFjacOzbiBvIHJlc3RyaWNjacOzbiBkZSBsb3MgZGVyZWNob3MgZGVyaXZhZG9zIGRlbCB1c28gaG9ucmFkbyB5IG90cmFzIGxpbWl0YWNpb25lcyBvIGV4Y2VwY2lvbmVzIGEgbG9zIGRlcmVjaG9zIGRlbCBhdXRvciBiYWpvIGVsIHLDqWdpbWVuIGxlZ2FsIHZpZ2VudGUgbyBkZXJpdmFkbyBkZSBjdWFscXVpZXIgb3RyYSBub3JtYSBxdWUgc2UgbGUgYXBsaXF1ZS4KCjMuIENvbmNlc2nDs24gZGUgbGEgTGljZW5jaWEuCkJham8gbG9zIHTDqXJtaW5vcyB5IGNvbmRpY2lvbmVzIGRlIGVzdGEgTGljZW5jaWEsIGVsIExpY2VuY2lhbnRlIG90b3JnYSBhIFVzdGVkIHVuYSBsaWNlbmNpYSBtdW5kaWFsLCBsaWJyZSBkZSByZWdhbMOtYXMsIG5vIGV4Y2x1c2l2YSB5IHBlcnBldHVhIChkdXJhbnRlIHRvZG8gZWwgcGVyw61vZG8gZGUgdmlnZW5jaWEgZGUgbG9zIGRlcmVjaG9zIGRlIGF1dG9yKSBwYXJhIGVqZXJjZXIgZXN0b3MgZGVyZWNob3Mgc29icmUgbGEgT2JyYSB0YWwgeSBjb21vIHNlIGluZGljYSBhIGNvbnRpbnVhY2nDs246CgphLglSZXByb2R1Y2lyIGxhIE9icmEsIGluY29ycG9yYXIgbGEgT2JyYSBlbiB1bmEgbyBtw6FzIE9icmFzIENvbGVjdGl2YXMsIHkgcmVwcm9kdWNpciBsYSBPYnJhIGluY29ycG9yYWRhIGVuIGxhcyBPYnJhcyBDb2xlY3RpdmFzLgoKYi4JRGlzdHJpYnVpciBjb3BpYXMgbyBmb25vZ3JhbWFzIGRlIGxhcyBPYnJhcywgZXhoaWJpcmxhcyBww7pibGljYW1lbnRlLCBlamVjdXRhcmxhcyBww7pibGljYW1lbnRlIHkvbyBwb25lcmxhcyBhIGRpc3Bvc2ljacOzbiBww7pibGljYSwgaW5jbHV5w6luZG9sYXMgY29tbyBpbmNvcnBvcmFkYXMgZW4gT2JyYXMgQ29sZWN0aXZhcywgc2Vnw7puIGNvcnJlc3BvbmRhLgoKYy4JRGlzdHJpYnVpciBjb3BpYXMgZGUgbGFzIE9icmFzIERlcml2YWRhcyBxdWUgc2UgZ2VuZXJlbiwgZXhoaWJpcmxhcyBww7pibGljYW1lbnRlLCBlamVjdXRhcmxhcyBww7pibGljYW1lbnRlIHkvbyBwb25lcmxhcyBhIGRpc3Bvc2ljacOzbiBww7pibGljYS4KTG9zIGRlcmVjaG9zIG1lbmNpb25hZG9zIGFudGVyaW9ybWVudGUgcHVlZGVuIHNlciBlamVyY2lkb3MgZW4gdG9kb3MgbG9zIG1lZGlvcyB5IGZvcm1hdG9zLCBhY3R1YWxtZW50ZSBjb25vY2lkb3MgbyBxdWUgc2UgaW52ZW50ZW4gZW4gZWwgZnV0dXJvLiBMb3MgZGVyZWNob3MgYW50ZXMgbWVuY2lvbmFkb3MgaW5jbHV5ZW4gZWwgZGVyZWNobyBhIHJlYWxpemFyIGRpY2hhcyBtb2RpZmljYWNpb25lcyBlbiBsYSBtZWRpZGEgcXVlIHNlYW4gdMOpY25pY2FtZW50ZSBuZWNlc2FyaWFzIHBhcmEgZWplcmNlciBsb3MgZGVyZWNob3MgZW4gb3RybyBtZWRpbyBvIGZvcm1hdG9zLCBwZXJvIGRlIG90cmEgbWFuZXJhIHVzdGVkIG5vIGVzdMOhIGF1dG9yaXphZG8gcGFyYSByZWFsaXphciBvYnJhcyBkZXJpdmFkYXMuIFRvZG9zIGxvcyBkZXJlY2hvcyBubyBvdG9yZ2Fkb3MgZXhwcmVzYW1lbnRlIHBvciBlbCBMaWNlbmNpYW50ZSBxdWVkYW4gcG9yIGVzdGUgbWVkaW8gcmVzZXJ2YWRvcywgaW5jbHV5ZW5kbyBwZXJvIHNpbiBsaW1pdGFyc2UgYSBhcXVlbGxvcyBxdWUgc2UgbWVuY2lvbmFuIGVuIGxhcyBzZWNjaW9uZXMgNChkKSB5IDQoZSkuCgo0LiBSZXN0cmljY2lvbmVzLgpMYSBsaWNlbmNpYSBvdG9yZ2FkYSBlbiBsYSBhbnRlcmlvciBTZWNjacOzbiAzIGVzdMOhIGV4cHJlc2FtZW50ZSBzdWpldGEgeSBsaW1pdGFkYSBwb3IgbGFzIHNpZ3VpZW50ZXMgcmVzdHJpY2Npb25lczoKCmEuCVVzdGVkIHB1ZWRlIGRpc3RyaWJ1aXIsIGV4aGliaXIgcMO6YmxpY2FtZW50ZSwgZWplY3V0YXIgcMO6YmxpY2FtZW50ZSwgbyBwb25lciBhIGRpc3Bvc2ljacOzbiBww7pibGljYSBsYSBPYnJhIHPDs2xvIGJham8gbGFzIGNvbmRpY2lvbmVzIGRlIGVzdGEgTGljZW5jaWEsIHkgVXN0ZWQgZGViZSBpbmNsdWlyIHVuYSBjb3BpYSBkZSBlc3RhIGxpY2VuY2lhIG8gZGVsIElkZW50aWZpY2Fkb3IgVW5pdmVyc2FsIGRlIFJlY3Vyc29zIGRlIGxhIG1pc21hIGNvbiBjYWRhIGNvcGlhIGRlIGxhIE9icmEgcXVlIGRpc3RyaWJ1eWEsIGV4aGliYSBww7pibGljYW1lbnRlLCBlamVjdXRlIHDDumJsaWNhbWVudGUgbyBwb25nYSBhIGRpc3Bvc2ljacOzbiBww7pibGljYS4gTm8gZXMgcG9zaWJsZSBvZnJlY2VyIG8gaW1wb25lciBuaW5ndW5hIGNvbmRpY2nDs24gc29icmUgbGEgT2JyYSBxdWUgYWx0ZXJlIG8gbGltaXRlIGxhcyBjb25kaWNpb25lcyBkZSBlc3RhIExpY2VuY2lhIG8gZWwgZWplcmNpY2lvIGRlIGxvcyBkZXJlY2hvcyBkZSBsb3MgZGVzdGluYXRhcmlvcyBvdG9yZ2Fkb3MgZW4gZXN0ZSBkb2N1bWVudG8uIE5vIGVzIHBvc2libGUgc3VibGljZW5jaWFyIGxhIE9icmEuIFVzdGVkIGRlYmUgbWFudGVuZXIgaW50YWN0b3MgdG9kb3MgbG9zIGF2aXNvcyBxdWUgaGFnYW4gcmVmZXJlbmNpYSBhIGVzdGEgTGljZW5jaWEgeSBhIGxhIGNsw6F1c3VsYSBkZSBsaW1pdGFjacOzbiBkZSBnYXJhbnTDrWFzLiBVc3RlZCBubyBwdWVkZSBkaXN0cmlidWlyLCBleGhpYmlyIHDDumJsaWNhbWVudGUsIGVqZWN1dGFyIHDDumJsaWNhbWVudGUsIG8gcG9uZXIgYSBkaXNwb3NpY2nDs24gcMO6YmxpY2EgbGEgT2JyYSBjb24gYWxndW5hIG1lZGlkYSB0ZWNub2zDs2dpY2EgcXVlIGNvbnRyb2xlIGVsIGFjY2VzbyBvIGxhIHV0aWxpemFjacOzbiBkZSBlbGxhIGRlIHVuYSBmb3JtYSBxdWUgc2VhIGluY29uc2lzdGVudGUgY29uIGxhcyBjb25kaWNpb25lcyBkZSBlc3RhIExpY2VuY2lhLiBMbyBhbnRlcmlvciBzZSBhcGxpY2EgYSBsYSBPYnJhIGluY29ycG9yYWRhIGEgdW5hIE9icmEgQ29sZWN0aXZhLCBwZXJvIGVzdG8gbm8gZXhpZ2UgcXVlIGxhIE9icmEgQ29sZWN0aXZhIGFwYXJ0ZSBkZSBsYSBvYnJhIG1pc21hIHF1ZWRlIHN1amV0YSBhIGxhcyBjb25kaWNpb25lcyBkZSBlc3RhIExpY2VuY2lhLiBTaSBVc3RlZCBjcmVhIHVuYSBPYnJhIENvbGVjdGl2YSwgcHJldmlvIGF2aXNvIGRlIGN1YWxxdWllciBMaWNlbmNpYW50ZSBkZWJlLCBlbiBsYSBtZWRpZGEgZGUgbG8gcG9zaWJsZSwgZWxpbWluYXIgZGUgbGEgT2JyYSBDb2xlY3RpdmEgY3VhbHF1aWVyIHJlZmVyZW5jaWEgYSBkaWNobyBMaWNlbmNpYW50ZSBvIGFsIEF1dG9yIE9yaWdpbmFsLCBzZWfDum4gbG8gc29saWNpdGFkbyBwb3IgZWwgTGljZW5jaWFudGUgeSBjb25mb3JtZSBsbyBleGlnZSBsYSBjbMOhdXN1bGEgNChjKS4KCmIuCVVzdGVkIG5vIHB1ZWRlIGVqZXJjZXIgbmluZ3VubyBkZSBsb3MgZGVyZWNob3MgcXVlIGxlIGhhbiBzaWRvIG90b3JnYWRvcyBlbiBsYSBTZWNjacOzbiAzIHByZWNlZGVudGUgZGUgbW9kbyBxdWUgZXN0w6luIHByaW5jaXBhbG1lbnRlIGRlc3RpbmFkb3MgbyBkaXJlY3RhbWVudGUgZGlyaWdpZG9zIGEgY29uc2VndWlyIHVuIHByb3ZlY2hvIGNvbWVyY2lhbCBvIHVuYSBjb21wZW5zYWNpw7NuIG1vbmV0YXJpYSBwcml2YWRhLiBFbCBpbnRlcmNhbWJpbyBkZSBsYSBPYnJhIHBvciBvdHJhcyBvYnJhcyBwcm90ZWdpZGFzIHBvciBkZXJlY2hvcyBkZSBhdXRvciwgeWEgc2VhIGEgdHJhdsOpcyBkZSB1biBzaXN0ZW1hIHBhcmEgY29tcGFydGlyIGFyY2hpdm9zIGRpZ2l0YWxlcyAoZGlnaXRhbCBmaWxlLXNoYXJpbmcpIG8gZGUgY3VhbHF1aWVyIG90cmEgbWFuZXJhIG5vIHNlcsOhIGNvbnNpZGVyYWRvIGNvbW8gZXN0YXIgZGVzdGluYWRvIHByaW5jaXBhbG1lbnRlIG8gZGlyaWdpZG8gZGlyZWN0YW1lbnRlIGEgY29uc2VndWlyIHVuIHByb3ZlY2hvIGNvbWVyY2lhbCBvIHVuYSBjb21wZW5zYWNpw7NuIG1vbmV0YXJpYSBwcml2YWRhLCBzaWVtcHJlIHF1ZSBubyBzZSByZWFsaWNlIHVuIHBhZ28gbWVkaWFudGUgdW5hIGNvbXBlbnNhY2nDs24gbW9uZXRhcmlhIGVuIHJlbGFjacOzbiBjb24gZWwgaW50ZXJjYW1iaW8gZGUgb2JyYXMgcHJvdGVnaWRhcyBwb3IgZWwgZGVyZWNobyBkZSBhdXRvci4KCmMuCVNpIHVzdGVkIGRpc3RyaWJ1eWUsIGV4aGliZSBww7pibGljYW1lbnRlLCBlamVjdXRhIHDDumJsaWNhbWVudGUgbyBlamVjdXRhIHDDumJsaWNhbWVudGUgZW4gZm9ybWEgZGlnaXRhbCBsYSBPYnJhIG8gY3VhbHF1aWVyIE9icmEgRGVyaXZhZGEgdSBPYnJhIENvbGVjdGl2YSwgVXN0ZWQgZGViZSBtYW50ZW5lciBpbnRhY3RhIHRvZGEgbGEgaW5mb3JtYWNpw7NuIGRlIGRlcmVjaG8gZGUgYXV0b3IgZGUgbGEgT2JyYSB5IHByb3BvcmNpb25hciwgZGUgZm9ybWEgcmF6b25hYmxlIHNlZ8O6biBlbCBtZWRpbyBvIG1hbmVyYSBxdWUgVXN0ZWQgZXN0w6kgdXRpbGl6YW5kbzogKGkpIGVsIG5vbWJyZSBkZWwgQXV0b3IgT3JpZ2luYWwgc2kgZXN0w6EgcHJvdmlzdG8gKG8gc2V1ZMOzbmltbywgc2kgZnVlcmUgYXBsaWNhYmxlKSwgeS9vIChpaSkgZWwgbm9tYnJlIGRlIGxhIHBhcnRlIG8gbGFzIHBhcnRlcyBxdWUgZWwgQXV0b3IgT3JpZ2luYWwgeS9vIGVsIExpY2VuY2lhbnRlIGh1YmllcmVuIGRlc2lnbmFkbyBwYXJhIGxhIGF0cmlidWNpw7NuICh2LmcuLCB1biBpbnN0aXR1dG8gcGF0cm9jaW5hZG9yLCBlZGl0b3JpYWwsIHB1YmxpY2FjacOzbikgZW4gbGEgaW5mb3JtYWNpw7NuIGRlIGxvcyBkZXJlY2hvcyBkZSBhdXRvciBkZWwgTGljZW5jaWFudGUsIHTDqXJtaW5vcyBkZSBzZXJ2aWNpb3MgbyBkZSBvdHJhcyBmb3JtYXMgcmF6b25hYmxlczsgZWwgdMOtdHVsbyBkZSBsYSBPYnJhIHNpIGVzdMOhIHByb3Zpc3RvOyBlbiBsYSBtZWRpZGEgZGUgbG8gcmF6b25hYmxlbWVudGUgZmFjdGlibGUgeSwgc2kgZXN0w6EgcHJvdmlzdG8sIGVsIElkZW50aWZpY2Fkb3IgVW5pZm9ybWUgZGUgUmVjdXJzb3MgKFVuaWZvcm0gUmVzb3VyY2UgSWRlbnRpZmllcikgcXVlIGVsIExpY2VuY2lhbnRlIGVzcGVjaWZpY2EgcGFyYSBzZXIgYXNvY2lhZG8gY29uIGxhIE9icmEsIHNhbHZvIHF1ZSB0YWwgVVJJIG5vIHNlIHJlZmllcmEgYSBsYSBub3RhIHNvYnJlIGxvcyBkZXJlY2hvcyBkZSBhdXRvciBvIGEgbGEgaW5mb3JtYWNpw7NuIHNvYnJlIGVsIGxpY2VuY2lhbWllbnRvIGRlIGxhIE9icmE7IHkgZW4gZWwgY2FzbyBkZSB1bmEgT2JyYSBEZXJpdmFkYSwgYXRyaWJ1aXIgZWwgY3LDqWRpdG8gaWRlbnRpZmljYW5kbyBlbCB1c28gZGUgbGEgT2JyYSBlbiBsYSBPYnJhIERlcml2YWRhICh2LmcuLCAiVHJhZHVjY2nDs24gRnJhbmNlc2EgZGUgbGEgT2JyYSBkZWwgQXV0b3IgT3JpZ2luYWwsIiBvICJHdWnDs24gQ2luZW1hdG9ncsOhZmljbyBiYXNhZG8gZW4gbGEgT2JyYSBvcmlnaW5hbCBkZWwgQXV0b3IgT3JpZ2luYWwiKS4gVGFsIGNyw6lkaXRvIHB1ZWRlIHNlciBpbXBsZW1lbnRhZG8gZGUgY3VhbHF1aWVyIGZvcm1hIHJhem9uYWJsZTsgZW4gZWwgY2Fzbywgc2luIGVtYmFyZ28sIGRlIE9icmFzIERlcml2YWRhcyB1IE9icmFzIENvbGVjdGl2YXMsIHRhbCBjcsOpZGl0byBhcGFyZWNlcsOhLCBjb21vIG3DrW5pbW8sIGRvbmRlIGFwYXJlY2UgZWwgY3LDqWRpdG8gZGUgY3VhbHF1aWVyIG90cm8gYXV0b3IgY29tcGFyYWJsZSB5IGRlIHVuYSBtYW5lcmEsIGFsIG1lbm9zLCB0YW4gZGVzdGFjYWRhIGNvbW8gZWwgY3LDqWRpdG8gZGUgb3RybyBhdXRvciBjb21wYXJhYmxlLgoKZC4JUGFyYSBldml0YXIgdG9kYSBjb25mdXNpw7NuLCBlbCBMaWNlbmNpYW50ZSBhY2xhcmEgcXVlLCBjdWFuZG8gbGEgb2JyYSBlcyB1bmEgY29tcG9zaWNpw7NuIG11c2ljYWw6CgppLglSZWdhbMOtYXMgcG9yIGludGVycHJldGFjacOzbiB5IGVqZWN1Y2nDs24gYmFqbyBsaWNlbmNpYXMgZ2VuZXJhbGVzLiBFbCBMaWNlbmNpYW50ZSBzZSByZXNlcnZhIGVsIGRlcmVjaG8gZXhjbHVzaXZvIGRlIGF1dG9yaXphciBsYSBlamVjdWNpw7NuIHDDumJsaWNhIG8gbGEgZWplY3VjacOzbiBww7pibGljYSBkaWdpdGFsIGRlIGxhIG9icmEgeSBkZSByZWNvbGVjdGFyLCBzZWEgaW5kaXZpZHVhbG1lbnRlIG8gYSB0cmF2w6lzIGRlIHVuYSBzb2NpZWRhZCBkZSBnZXN0acOzbiBjb2xlY3RpdmEgZGUgZGVyZWNob3MgZGUgYXV0b3IgeSBkZXJlY2hvcyBjb25leG9zIChwb3IgZWplbXBsbywgU0FZQ08pLCBsYXMgcmVnYWzDrWFzIHBvciBsYSBlamVjdWNpw7NuIHDDumJsaWNhIG8gcG9yIGxhIGVqZWN1Y2nDs24gcMO6YmxpY2EgZGlnaXRhbCBkZSBsYSBvYnJhIChwb3IgZWplbXBsbyBXZWJjYXN0KSBsaWNlbmNpYWRhIGJham8gbGljZW5jaWFzIGdlbmVyYWxlcywgc2kgbGEgaW50ZXJwcmV0YWNpw7NuIG8gZWplY3VjacOzbiBkZSBsYSBvYnJhIGVzdMOhIHByaW1vcmRpYWxtZW50ZSBvcmllbnRhZGEgcG9yIG8gZGlyaWdpZGEgYSBsYSBvYnRlbmNpw7NuIGRlIHVuYSB2ZW50YWphIGNvbWVyY2lhbCBvIHVuYSBjb21wZW5zYWNpw7NuIG1vbmV0YXJpYSBwcml2YWRhLgoKaWkuCVJlZ2Fsw61hcyBwb3IgRm9ub2dyYW1hcy4gRWwgTGljZW5jaWFudGUgc2UgcmVzZXJ2YSBlbCBkZXJlY2hvIGV4Y2x1c2l2byBkZSByZWNvbGVjdGFyLCBpbmRpdmlkdWFsbWVudGUgbyBhIHRyYXbDqXMgZGUgdW5hIHNvY2llZGFkIGRlIGdlc3Rpw7NuIGNvbGVjdGl2YSBkZSBkZXJlY2hvcyBkZSBhdXRvciB5IGRlcmVjaG9zIGNvbmV4b3MgKHBvciBlamVtcGxvLCBsb3MgY29uc2FncmFkb3MgcG9yIGxhIFNBWUNPKSwgdW5hIGFnZW5jaWEgZGUgZGVyZWNob3MgbXVzaWNhbGVzIG8gYWxnw7puIGFnZW50ZSBkZXNpZ25hZG8sIGxhcyByZWdhbMOtYXMgcG9yIGN1YWxxdWllciBmb25vZ3JhbWEgcXVlIFVzdGVkIGNyZWUgYSBwYXJ0aXIgZGUgbGEgb2JyYSAo4oCcdmVyc2nDs24gY292ZXLigJ0pIHkgZGlzdHJpYnV5YSwgZW4gbG9zIHTDqXJtaW5vcyBkZWwgcsOpZ2ltZW4gZGUgZGVyZWNob3MgZGUgYXV0b3IsIHNpIGxhIGNyZWFjacOzbiBvIGRpc3RyaWJ1Y2nDs24gZGUgZXNhIHZlcnNpw7NuIGNvdmVyIGVzdMOhIHByaW1vcmRpYWxtZW50ZSBkZXN0aW5hZGEgbyBkaXJpZ2lkYSBhIG9idGVuZXIgdW5hIHZlbnRhamEgY29tZXJjaWFsIG8gdW5hIGNvbXBlbnNhY2nDs24gbW9uZXRhcmlhIHByaXZhZGEuCgplLglHZXN0acOzbiBkZSBEZXJlY2hvcyBkZSBBdXRvciBzb2JyZSBJbnRlcnByZXRhY2lvbmVzIHkgRWplY3VjaW9uZXMgRGlnaXRhbGVzIChXZWJDYXN0aW5nKS4gUGFyYSBldml0YXIgdG9kYSBjb25mdXNpw7NuLCBlbCBMaWNlbmNpYW50ZSBhY2xhcmEgcXVlLCBjdWFuZG8gbGEgb2JyYSBzZWEgdW4gZm9ub2dyYW1hLCBlbCBMaWNlbmNpYW50ZSBzZSByZXNlcnZhIGVsIGRlcmVjaG8gZXhjbHVzaXZvIGRlIGF1dG9yaXphciBsYSBlamVjdWNpw7NuIHDDumJsaWNhIGRpZ2l0YWwgZGUgbGEgb2JyYSAocG9yIGVqZW1wbG8sIHdlYmNhc3QpIHkgZGUgcmVjb2xlY3RhciwgaW5kaXZpZHVhbG1lbnRlIG8gYSB0cmF2w6lzIGRlIHVuYSBzb2NpZWRhZCBkZSBnZXN0acOzbiBjb2xlY3RpdmEgZGUgZGVyZWNob3MgZGUgYXV0b3IgeSBkZXJlY2hvcyBjb25leG9zIChwb3IgZWplbXBsbywgQUNJTlBSTyksIGxhcyByZWdhbMOtYXMgcG9yIGxhIGVqZWN1Y2nDs24gcMO6YmxpY2EgZGlnaXRhbCBkZSBsYSBvYnJhIChwb3IgZWplbXBsbywgd2ViY2FzdCksIHN1amV0YSBhIGxhcyBkaXNwb3NpY2lvbmVzIGFwbGljYWJsZXMgZGVsIHLDqWdpbWVuIGRlIERlcmVjaG8gZGUgQXV0b3IsIHNpIGVzdGEgZWplY3VjacOzbiBww7pibGljYSBkaWdpdGFsIGVzdMOhIHByaW1vcmRpYWxtZW50ZSBkaXJpZ2lkYSBhIG9idGVuZXIgdW5hIHZlbnRhamEgY29tZXJjaWFsIG8gdW5hIGNvbXBlbnNhY2nDs24gbW9uZXRhcmlhIHByaXZhZGEuCgo1LiBSZXByZXNlbnRhY2lvbmVzLCBHYXJhbnTDrWFzIHkgTGltaXRhY2lvbmVzIGRlIFJlc3BvbnNhYmlsaWRhZC4KQSBNRU5PUyBRVUUgTEFTIFBBUlRFUyBMTyBBQ09SREFSQU4gREUgT1RSQSBGT1JNQSBQT1IgRVNDUklUTywgRUwgTElDRU5DSUFOVEUgT0ZSRUNFIExBIE9CUkEgKEVOIEVMIEVTVEFETyBFTiBFTCBRVUUgU0UgRU5DVUVOVFJBKSDigJxUQUwgQ1VBTOKAnSwgU0lOIEJSSU5EQVIgR0FSQU5Uw41BUyBERSBDTEFTRSBBTEdVTkEgUkVTUEVDVE8gREUgTEEgT0JSQSwgWUEgU0VBIEVYUFJFU0EsIElNUEzDjUNJVEEsIExFR0FMIE8gQ1VBTFFVSUVSQSBPVFJBLCBJTkNMVVlFTkRPLCBTSU4gTElNSVRBUlNFIEEgRUxMQVMsIEdBUkFOVMONQVMgREUgVElUVUxBUklEQUQsIENPTUVSQ0lBQklMSURBRCwgQURBUFRBQklMSURBRCBPIEFERUNVQUNJw5NOIEEgUFJPUMOTU0lUTyBERVRFUk1JTkFETywgQVVTRU5DSUEgREUgSU5GUkFDQ0nDk04sIERFIEFVU0VOQ0lBIERFIERFRkVDVE9TIExBVEVOVEVTIE8gREUgT1RSTyBUSVBPLCBPIExBIFBSRVNFTkNJQSBPIEFVU0VOQ0lBIERFIEVSUk9SRVMsIFNFQU4gTyBOTyBERVNDVUJSSUJMRVMgKFBVRURBTiBPIE5PIFNFUiBFU1RPUyBERVNDVUJJRVJUT1MpLiBBTEdVTkFTIEpVUklTRElDQ0lPTkVTIE5PIFBFUk1JVEVOIExBIEVYQ0xVU0nDk04gREUgR0FSQU5Uw41BUyBJTVBMw41DSVRBUywgRU4gQ1VZTyBDQVNPIEVTVEEgRVhDTFVTScOTTiBQVUVERSBOTyBBUExJQ0FSU0UgQSBVU1RFRC4KCjYuIExpbWl0YWNpw7NuIGRlIHJlc3BvbnNhYmlsaWRhZC4KQSBNRU5PUyBRVUUgTE8gRVhJSkEgRVhQUkVTQU1FTlRFIExBIExFWSBBUExJQ0FCTEUsIEVMIExJQ0VOQ0lBTlRFIE5PIFNFUsOBIFJFU1BPTlNBQkxFIEFOVEUgVVNURUQgUE9SIERBw5FPIEFMR1VOTywgU0VBIFBPUiBSRVNQT05TQUJJTElEQUQgRVhUUkFDT05UUkFDVFVBTCwgUFJFQ09OVFJBQ1RVQUwgTyBDT05UUkFDVFVBTCwgT0JKRVRJVkEgTyBTVUJKRVRJVkEsIFNFIFRSQVRFIERFIERBw5FPUyBNT1JBTEVTIE8gUEFUUklNT05JQUxFUywgRElSRUNUT1MgTyBJTkRJUkVDVE9TLCBQUkVWSVNUT1MgTyBJTVBSRVZJU1RPUyBQUk9EVUNJRE9TIFBPUiBFTCBVU08gREUgRVNUQSBMSUNFTkNJQSBPIERFIExBIE9CUkEsIEFVTiBDVUFORE8gRUwgTElDRU5DSUFOVEUgSEFZQSBTSURPIEFEVkVSVElETyBERSBMQSBQT1NJQklMSURBRCBERSBESUNIT1MgREHDkU9TLiBBTEdVTkFTIExFWUVTIE5PIFBFUk1JVEVOIExBIEVYQ0xVU0nDk04gREUgQ0lFUlRBIFJFU1BPTlNBQklMSURBRCwgRU4gQ1VZTyBDQVNPIEVTVEEgRVhDTFVTScOTTiBQVUVERSBOTyBBUExJQ0FSU0UgQSBVU1RFRC4KCjcuIFTDqXJtaW5vLgoKYS4JRXN0YSBMaWNlbmNpYSB5IGxvcyBkZXJlY2hvcyBvdG9yZ2Fkb3MgZW4gdmlydHVkIGRlIGVsbGEgdGVybWluYXLDoW4gYXV0b23DoXRpY2FtZW50ZSBzaSBVc3RlZCBpbmZyaW5nZSBhbGd1bmEgY29uZGljacOzbiBlc3RhYmxlY2lkYSBlbiBlbGxhLiBTaW4gZW1iYXJnbywgbG9zIGluZGl2aWR1b3MgbyBlbnRpZGFkZXMgcXVlIGhhbiByZWNpYmlkbyBPYnJhcyBEZXJpdmFkYXMgbyBDb2xlY3RpdmFzIGRlIFVzdGVkIGRlIGNvbmZvcm1pZGFkIGNvbiBlc3RhIExpY2VuY2lhLCBubyB2ZXLDoW4gdGVybWluYWRhcyBzdXMgbGljZW5jaWFzLCBzaWVtcHJlIHF1ZSBlc3RvcyBpbmRpdmlkdW9zIG8gZW50aWRhZGVzIHNpZ2FuIGN1bXBsaWVuZG8gw61udGVncmFtZW50ZSBsYXMgY29uZGljaW9uZXMgZGUgZXN0YXMgbGljZW5jaWFzLiBMYXMgU2VjY2lvbmVzIDEsIDIsIDUsIDYsIDcsIHkgOCBzdWJzaXN0aXLDoW4gYSBjdWFscXVpZXIgdGVybWluYWNpw7NuIGRlIGVzdGEgTGljZW5jaWEuCgpiLglTdWpldGEgYSBsYXMgY29uZGljaW9uZXMgeSB0w6lybWlub3MgYW50ZXJpb3JlcywgbGEgbGljZW5jaWEgb3RvcmdhZGEgYXF1w60gZXMgcGVycGV0dWEgKGR1cmFudGUgZWwgcGVyw61vZG8gZGUgdmlnZW5jaWEgZGUgbG9zIGRlcmVjaG9zIGRlIGF1dG9yIGRlIGxhIG9icmEpLiBObyBvYnN0YW50ZSBsbyBhbnRlcmlvciwgZWwgTGljZW5jaWFudGUgc2UgcmVzZXJ2YSBlbCBkZXJlY2hvIGEgcHVibGljYXIgeS9vIGVzdHJlbmFyIGxhIE9icmEgYmFqbyBjb25kaWNpb25lcyBkZSBsaWNlbmNpYSBkaWZlcmVudGVzIG8gYSBkZWphciBkZSBkaXN0cmlidWlybGEgZW4gbG9zIHTDqXJtaW5vcyBkZSBlc3RhIExpY2VuY2lhIGVuIGN1YWxxdWllciBtb21lbnRvOyBlbiBlbCBlbnRlbmRpZG8sIHNpbiBlbWJhcmdvLCBxdWUgZXNhIGVsZWNjacOzbiBubyBzZXJ2aXLDoSBwYXJhIHJldm9jYXIgZXN0YSBsaWNlbmNpYSBvIHF1ZSBkZWJhIHNlciBvdG9yZ2FkYSAsIGJham8gbG9zIHTDqXJtaW5vcyBkZSBlc3RhIGxpY2VuY2lhKSwgeSBlc3RhIGxpY2VuY2lhIGNvbnRpbnVhcsOhIGVuIHBsZW5vIHZpZ29yIHkgZWZlY3RvIGEgbWVub3MgcXVlIHNlYSB0ZXJtaW5hZGEgY29tbyBzZSBleHByZXNhIGF0csOhcy4gTGEgTGljZW5jaWEgcmV2b2NhZGEgY29udGludWFyw6Egc2llbmRvIHBsZW5hbWVudGUgdmlnZW50ZSB5IGVmZWN0aXZhIHNpIG5vIHNlIGxlIGRhIHTDqXJtaW5vIGVuIGxhcyBjb25kaWNpb25lcyBpbmRpY2FkYXMgYW50ZXJpb3JtZW50ZS4KCjguIFZhcmlvcy4KCmEuCUNhZGEgdmV6IHF1ZSBVc3RlZCBkaXN0cmlidXlhIG8gcG9uZ2EgYSBkaXNwb3NpY2nDs24gcMO6YmxpY2EgbGEgT2JyYSBvIHVuYSBPYnJhIENvbGVjdGl2YSwgZWwgTGljZW5jaWFudGUgb2ZyZWNlcsOhIGFsIGRlc3RpbmF0YXJpbyB1bmEgbGljZW5jaWEgZW4gbG9zIG1pc21vcyB0w6lybWlub3MgeSBjb25kaWNpb25lcyBxdWUgbGEgbGljZW5jaWEgb3RvcmdhZGEgYSBVc3RlZCBiYWpvIGVzdGEgTGljZW5jaWEuCgpiLglTaSBhbGd1bmEgZGlzcG9zaWNpw7NuIGRlIGVzdGEgTGljZW5jaWEgcmVzdWx0YSBpbnZhbGlkYWRhIG8gbm8gZXhpZ2libGUsIHNlZ8O6biBsYSBsZWdpc2xhY2nDs24gdmlnZW50ZSwgZXN0byBubyBhZmVjdGFyw6EgbmkgbGEgdmFsaWRleiBuaSBsYSBhcGxpY2FiaWxpZGFkIGRlbCByZXN0byBkZSBjb25kaWNpb25lcyBkZSBlc3RhIExpY2VuY2lhIHksIHNpbiBhY2Npw7NuIGFkaWNpb25hbCBwb3IgcGFydGUgZGUgbG9zIHN1amV0b3MgZGUgZXN0ZSBhY3VlcmRvLCBhcXXDqWxsYSBzZSBlbnRlbmRlcsOhIHJlZm9ybWFkYSBsbyBtw61uaW1vIG5lY2VzYXJpbyBwYXJhIGhhY2VyIHF1ZSBkaWNoYSBkaXNwb3NpY2nDs24gc2VhIHbDoWxpZGEgeSBleGlnaWJsZS4KCmMuCU5pbmfDum4gdMOpcm1pbm8gbyBkaXNwb3NpY2nDs24gZGUgZXN0YSBMaWNlbmNpYSBzZSBlc3RpbWFyw6EgcmVudW5jaWFkYSB5IG5pbmd1bmEgdmlvbGFjacOzbiBkZSBlbGxhIHNlcsOhIGNvbnNlbnRpZGEgYSBtZW5vcyBxdWUgZXNhIHJlbnVuY2lhIG8gY29uc2VudGltaWVudG8gc2VhIG90b3JnYWRvIHBvciBlc2NyaXRvIHkgZmlybWFkbyBwb3IgbGEgcGFydGUgcXVlIHJlbnVuY2llIG8gY29uc2llbnRhLgoKZC4JRXN0YSBMaWNlbmNpYSByZWZsZWphIGVsIGFjdWVyZG8gcGxlbm8gZW50cmUgbGFzIHBhcnRlcyByZXNwZWN0byBhIGxhIE9icmEgYXF1w60gbGljZW5jaWFkYS4gTm8gaGF5IGFycmVnbG9zLCBhY3VlcmRvcyBvIGRlY2xhcmFjaW9uZXMgcmVzcGVjdG8gYSBsYSBPYnJhIHF1ZSBubyBlc3TDqW4gZXNwZWNpZmljYWRvcyBlbiBlc3RlIGRvY3VtZW50by4gRWwgTGljZW5jaWFudGUgbm8gc2UgdmVyw6EgbGltaXRhZG8gcG9yIG5pbmd1bmEgZGlzcG9zaWNpw7NuIGFkaWNpb25hbCBxdWUgcHVlZGEgc3VyZ2lyIGVuIGFsZ3VuYSBjb211bmljYWNpw7NuIGVtYW5hZGEgZGUgVXN0ZWQuIEVzdGEgTGljZW5jaWEgbm8gcHVlZGUgc2VyIG1vZGlmaWNhZGEgc2luIGVsIGNvbnNlbnRpbWllbnRvIG11dHVvIHBvciBlc2NyaXRvIGRlbCBMaWNlbmNpYW50ZSB5IFVzdGVkLgo= |