Modelo de infección de células hep-2 con Chlamydia Trachomatis Serovar l2 (eb’s/lgv vr-902b) y su aplicación en investigación.

Chlamydia trachomatis es una bacteria Gram negativa, intracelular obligada caracterizada por causar infección únicamente en humanos (tanto hombres como mujeres) y estar relacionada con enfermedades de transmisión sexual e infecciones oculares, por lo que puede conllevar a secuelas de interés si no s...

Full description

Autores:
Caro Burgos, Paola Andrea
Castañeda Franco, Yessica Marcela
Castellanos Hernández, Natalia
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2018
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3586
Acceso en línea:
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3586
Palabra clave:
Chlamydia Trachomatis
Enfermedades de Transmisión Sexual
Infecciones
Microorganismos
Rights
closedAccess
License
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019
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description Chlamydia trachomatis es una bacteria Gram negativa, intracelular obligada caracterizada por causar infección únicamente en humanos (tanto hombres como mujeres) y estar relacionada con enfermedades de transmisión sexual e infecciones oculares, por lo que puede conllevar a secuelas de interés si no se da un tratamiento oportuno. Por lo anterior, Chlamydia trachomatis es un microorganismo importante de estudio; a través del siguiente proyecto se estableció el modelo de infección de células HEp-2 con cuerpos elementales (EB’s) de C. trachomatis serovar L2 por medio de cultivo celular, donde se instauró las condiciones para el crecimiento adecuado de las células en un tiempo y con una confluencia determinada, para ser empleadas en los diferentes ensayos, efectuándose un protocolo de infección y siendo demostrado a partir de la coloración de Giemsa permitiendo evaluar características morfológicas tanto de las células HEp-2 sin infectar e infectadas y así mismo de los cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis y finalmente aplicando la técnica de Inmunofluorescencia Directa para la detección de la proteína de membrana MOMP de Chlamydia trachomatis. Tras los ensayos llevados a cabo se determinó la densidad celular necesaria para obtener una confluencia del 90% y poder realizar la infección, la cual se evidenció con presencia de cuerpos elementales próximos y dentro del citoplasma celular, vacuolas y además un notorio daño celular luego de la infección. Este proyecto servirá como modelo de investigación para ser aplicado en diferentes campos científicos.
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spelling Sánchez Mora, Ruth Melida166f302591d01453f1d13fdfdfc6358aCaro Burgos, Paola Andrea301d285fd0fdde7d995ebb36f11b0003Castañeda Franco, Yessica Marcela015151d503de5664f389eea10b49bb4fCastellanos Hernández, Nataliaf99749a31cd06b63b90efbeefe4aed862021-10-29T19:32:52Z2021-10-29T19:32:52Z2018-11https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/358658656Chlamydia trachomatis es una bacteria Gram negativa, intracelular obligada caracterizada por causar infección únicamente en humanos (tanto hombres como mujeres) y estar relacionada con enfermedades de transmisión sexual e infecciones oculares, por lo que puede conllevar a secuelas de interés si no se da un tratamiento oportuno. Por lo anterior, Chlamydia trachomatis es un microorganismo importante de estudio; a través del siguiente proyecto se estableció el modelo de infección de células HEp-2 con cuerpos elementales (EB’s) de C. trachomatis serovar L2 por medio de cultivo celular, donde se instauró las condiciones para el crecimiento adecuado de las células en un tiempo y con una confluencia determinada, para ser empleadas en los diferentes ensayos, efectuándose un protocolo de infección y siendo demostrado a partir de la coloración de Giemsa permitiendo evaluar características morfológicas tanto de las células HEp-2 sin infectar e infectadas y así mismo de los cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis y finalmente aplicando la técnica de Inmunofluorescencia Directa para la detección de la proteína de membrana MOMP de Chlamydia trachomatis. Tras los ensayos llevados a cabo se determinó la densidad celular necesaria para obtener una confluencia del 90% y poder realizar la infección, la cual se evidenció con presencia de cuerpos elementales próximos y dentro del citoplasma celular, vacuolas y además un notorio daño celular luego de la infección. Este proyecto servirá como modelo de investigación para ser aplicado en diferentes campos científicos.INTRODUCCIÓN 13 1. OBJETIVOS 15 1.1. Objetivo general. 15 1.2. Objetivos específicos. 15 2. ANTECEDENTES 16 3. MARCO TEORICO 20 3.1 Líneas celulares como modelo de investigación celular. 20 3.2 Cultivo celular 20 3.2.1 Ventajas del Cultivo Celular 21 3.2.2 Desventajas 22 3.3 Línea celular HEp-2. 23 3.4 Chlamydia trachomatis 24 3.4.1 Ciclo de Vida. 26 3.4.2 Interacción huésped – parásito. 27 3.4.3 Transmisión. 28 3.4.4 Factores de riesgo. 29 3.4.5 Enfermedades relacionadas 29 3.4.6 Presentación clínica. 30 3.4.7. Prevalencia en Colombia. 31 3.4.8 Diagnóstico y tratamiento convencional para Chlamydia trachomatis. 32 3.5. Chlamydia trachomatis serovar L2. 33 3.6 ATCC (EB’s/ LGV - L2 VR 902B) 34 3.7 Aplicaciones del modelo de investigación con Chlamydia trachomatis 34 4. DISEÑO METODOLÓGICO 39 4.1. Tipo y enfoque de la investigación. 39 4.2. Universo, población y muestra 4.3. Hipótesis 39 4.4 Procedimientos y técnicas. 39 4.4.1 Establecimiento del cultivo de la línea celular HEp-240 4.4.2 Infección de células HEp-2 con Chlamydia trachomatis. 45 4.4.3 Protocolo de la infección. 46 4.5 Evaluación estadística de los datos obtenidos52 5. RESULTADOS53 5.1 Cultivo de la línea celular HEp-2. 53 5.2 Coloración de Giemsa 58 8 5.3 Infección de células HEp-2 con Chlamydia trachomatis 61 5.3.1 Determinación de la concentración celular 61 5.3.2 Infección de las células Hep2 65 5.3.3 Inmunofluorescencia directa73 6. DISCUSIÓN 77 7. CONCLUSIONES 84 8. REFERENCIAS 85PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico97p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.CBacteriología y Laboratorio ClínicoUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbModelo de infección de células hep-2 con Chlamydia Trachomatis Serovar l2 (eb’s/lgv vr-902b) y su aplicación en investigación.Trabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionMartínez TM. Diagnóstico microbiológico de Chlamydia trachomatis: Estado actual de un problema. Rev. chil. infectol. [Internet]. 2001 [citado 2018 Abr 19]; 18(4): 275-284. 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