Ptimización de péptidos quiméricos derivados del Antígeno AMA – 1 de Plasmodium yoelii, para el anclaje a moléculas h2-ied en modelo murino.

La malaria ha sido descrita por la OMS como una de las enfermedades tropicales de mayor importancia en salud publica debido a las cifras de mortalidad y morbilidad que presentan en su mayor parte en zonas donde los determinantes de salud son precarios, esto debido a las dificultades encontradas para...

Full description

Autores:
Hernández Bermúdez, Luisa Fernanda
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2022
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/5710
Palabra clave:
Plasmodium
Complejo mayor de histocompatibilidad
Péptido
AMA-1
Bioinformática
Rights
closedAccess
License
Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2022
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description La malaria ha sido descrita por la OMS como una de las enfermedades tropicales de mayor importancia en salud publica debido a las cifras de mortalidad y morbilidad que presentan en su mayor parte en zonas donde los determinantes de salud son precarios, esto debido a las dificultades encontradas para su control y eliminación. La existencia de un tratamiento profiláctico se hace cada vez más necesario para mitigar los efectos de esta afección representando así un reto para la comunidad científica, por esta razón se han diseñado nuevas estrategias para hallar proteínas candidatas a vacuna contra la malaria. En este proyecto se evaluó la antigenicidad y capacidad de unión a Complejo Mayor de Histocompatibilidad H2- IEd de péptidos derivados de regiones conservadas de la proteína AMA – 1 de Plasmodium yoelii, adicionalmente mediante herramientas bioinformáticas se diseñaron 6 constructos de péptidos quiméricos con alta unión a H2-IEd que permiten ser utilizados como objeto de estudio para la determinación de la respuesta inmune presentada en modelo murino. Los resultados obtenidos nos permiten garantizar la metodología y su aplicabilidad para la evaluación in vitro de péptidos y la optimización in silico de constructos que representen importancia en el desarrollo de un tratamiento profiláctico peptídico ante esta u otra enfermedad
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spelling Rodríguez, Kewin Jaira5000c3477a296ecf6e262c0d6ee1e2bHernández Rojas, Edith del Carmen691add7415cca2135c3de6050313997b600Hernández Bermúdez, Luisa Fernanda54da9569e4c2693a0546290d189190d72022-10-18T14:31:59Z2022-10-18T14:31:59Z2022https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/5710La malaria ha sido descrita por la OMS como una de las enfermedades tropicales de mayor importancia en salud publica debido a las cifras de mortalidad y morbilidad que presentan en su mayor parte en zonas donde los determinantes de salud son precarios, esto debido a las dificultades encontradas para su control y eliminación. La existencia de un tratamiento profiláctico se hace cada vez más necesario para mitigar los efectos de esta afección representando así un reto para la comunidad científica, por esta razón se han diseñado nuevas estrategias para hallar proteínas candidatas a vacuna contra la malaria. En este proyecto se evaluó la antigenicidad y capacidad de unión a Complejo Mayor de Histocompatibilidad H2- IEd de péptidos derivados de regiones conservadas de la proteína AMA – 1 de Plasmodium yoelii, adicionalmente mediante herramientas bioinformáticas se diseñaron 6 constructos de péptidos quiméricos con alta unión a H2-IEd que permiten ser utilizados como objeto de estudio para la determinación de la respuesta inmune presentada en modelo murino. Los resultados obtenidos nos permiten garantizar la metodología y su aplicabilidad para la evaluación in vitro de péptidos y la optimización in silico de constructos que representen importancia en el desarrollo de un tratamiento profiláctico peptídico ante esta u otra enfermedadRESUMEN..9 1. INTRODUCCIÓN....9 2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.13 2.1. Pregunta problema ......15 3. OBJETIVOS......15 3.1. General.15 3.2. Específicos..16 3.2.1. Determinar la antigenicidad de péptidos derivados de regiones conservadas de la proteína AMA – 1 de Plasmodium yoelii. ...16 3.2.2. Seleccionar péptidos derivados de regiones conservadas de la proteína AMA1 de Plasmodium yoelii dependientes de su unión a moléculas H2-IEd 16 3.2.3. Diseñar y seleccionar in silico péptidos quiméricos con capacidad de unión a H2-IEd . 16 4. ANTECEDENTES .16 5. MARCO REFERENCIAL 18 5.1. Malaria .18 5.1.1. Ciclo de vida.20 5.2. Epidemiología ..21 5.3. Malaria murina.23 5.3.1. Plasmodium yoelii 24 5.3.2. Cultivo celular .....24 5.4. Aspectos éticos.25 5.4.1. Normativa de manejo animal..25 6. DISEÑO METODOLÓGICO ..25 6.1. Universo, población, muestra ...25 6.1.1. Población de estudio...26 6.1.2. Muestra 26 6.2. Justificación 26 6.2.2. Hipótesis...29 7. METODOLOGÍA...29 7.2. Infección de ratones con Plasmodium yoelii 17XNL ...30 7.2.1. Parasitemia e histología .....31 1.1. Evaluación de antigenicidad de péptidos derivados de PyAMA-1.31 7.3. Cultivo de Plasmodium yoelii 17XNL....32 7.3.1. Cultivo celular .....32 7.4. Evaluación de reconocimiento específico de molécula H2-IEd por anticuerpo producido in vitro ..34 7.4.1. Purificación de moléculas H2-IEd .....34 7.5. Cuantificación de moléculas H2 - IEd36 7.6. Perfil de unión de péptidos a moléculas H2-IEd 36 7.7. Diseño y optimización de péptidos quiméricos para anclaje a moléculas H2-IEd.37 8. RESULTADOS .37 8.1. Curso de la infección por Plasmodium yoelii en modelo murino.38 8.2. Infección in vitro de GRs murinos con P. yoelii41 8.3. Evaluación de antigenicidad presentada por cada péptido derivado de regiones conservadas de la proteína AMA-1 de Plasmodium yoelii..42 8.4. Evaluación de capacidad de unión a CMH H2-IEd...45 8.4.1. Evaluación de identidad del H2 – IEd obtenido.....47 8.4.2. Cuantificación CMH 49 8.5. Constructos diseñados in silico con alta unión a H2-IEd 52 9. Discusión 59 10. CONCLUSIONES...65 BIBLIOGRAFÍA67PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico71p.application/pdfspaDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2022https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbPtimización de péptidos quiméricos derivados del Antígeno AMA – 1 de Plasmodium yoelii, para el anclaje a moléculas h2-ied en modelo murino.Trabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionFacultad de Ciencias de la SaludBogotáBacteriología y Laboratorio ClínicoOPS, OMS. Guía para atención clínica integral del paciente con malaria. Bogotá: Ministerio de la Protección Social. 2010Organization WH. 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FORMATO IDENTIFICACIÓN TRABAJOS DE GRADO firmado (1).pdf.txtExtracted texttext/plain3111https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/5710/10/5.%20arreglado%20luisa%20FORMATO%20IDENTIFICACI%c3%93N%20TRABAJOS%20DE%20GRADO%20firmado%20%281%29.pdf.txt2f64b5013c79b9562d24fbfc35c5a68bMD510metadata only accessCARTA DERECHOS DE AUTOR Hernandez.pdf.txtCARTA DERECHOS DE AUTOR Hernandez.pdf.txtExtracted texttext/plain1146https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/5710/12/CARTA%20DERECHOS%20DE%20AUTOR%20Hernandez.pdf.txt529eaaa98481479efa24dfe4179301adMD512metadata only accessTHUMBNAILPROYECTO DE GRADO - LUISA FERNANDA HERNÁNDEZ BERMÚDEZ.pdf.jpgPROYECTO DE GRADO - LUISA FERNANDA HERNÁNDEZ BERMÚDEZ.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg7604https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/5710/7/PROYECTO%20DE%20GRADO%20-%20LUISA%20FERNANDA%20HERN%c3%81NDEZ%20BERM%c3%9aDEZ.pdf.jpgc719d839cc55c65d2dc73e34b9305692MD57open accessPresentación final 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